黄芩甙治疗重症急性胰腺炎肺损伤的实验研究

目的探讨黄芩甙(Baicalin,BA)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)损伤组织细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响。方法经胆胰管逆行注射62mmol/L的牛磺胆酸钠制备大鼠SAP72只,随机分为3组:正常对照组(SO,n=24)、SAP模型组(SAP,n=24)、黄芩甙治疗组(BA,n=24)。在术后3、6、12h动态观察大鼠胰腺、肺组织病理学改变以及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化,用免疫组化方法检测肺组织ICAM-1表达变化情况。结果BA治疗组光镜下肺组织炎症反应程度较SAP组减轻。治疗组6、12h MPO活性低于SAP组(P<0.05)。免疫组化显示SAP组肺组织ICAM-1随着时间推移表达逐渐增强,12h达峰值。BA治疗组ICAM-1各时相点表达均较SAP组为弱(P<0.05)。结论黄芩甙对胰腺炎肺损伤具有一定的治疗保护作用,其作用机制可能与抑制ICMA-1高表达,减少中性粒细胞(PMN)在肺脏聚集有关。     

LHF保存液低温保存大鼠胰腺的实验研究

研究自制 LHF器官保存液对 SD大鼠胰腺的保存效果。方法　 LHF和高渗枸椽酸腺嘌呤保存液保存大鼠胰腺 1 2 h、2 4 h、36h后进行胰岛细胞分离 ,观察保存前、后细胞形态、功能的变化。结果　 LHF液保存大鼠胰腺 36h内 ,组织含水量无显著的增加 ;保存液中胰淀粉酶、胰岛素含量低 ;细胞色素氧化酶活力无显著性降低。胰岛细胞分离后 ,细胞形态结构完整、分泌功能良好 ,其保存效果明显优于高渗枸椽酸腺嘌呤保存液。结论　 LHF作为胰腺保存液能够有效地保存大鼠胰腺 36h,可用于胰岛移植供体保存     

白藜芦醇治疗大鼠急性胰腺炎肺损伤的实验研究

目的探讨急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤与肺组织选择素(选择素P、选择素E)表达的关系及白藜芦醇对肺损伤的作用。方法96只雄性大鼠分为对照组、模型组、治疗组、溶剂组。用40 g/L牛黄胆酸钠逆行胆胰管注射建立胰腺炎模型,治疗组在建模后立刻经阴茎静脉注射溶解于吐温80溶剂中的白藜芦醇(10 mg/kg)。术后3、6、12 h取材,盲法光镜下观察大鼠肺组织病理学改变,同时检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞数及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫组化法检测肺脏毛细血管内皮选择素P、选择素E表达。结果治疗组肺组织损害明显较模型组肺组织轻(P<0.05);随时间推移模型组BALF中白细胞数及肺组织MPO活力逐渐增高,而治疗组BALF中白细胞数及肺组织MPO活力在各时间段均较模型组降低(P<0.05);选择素P、E在模型组呈强阳性表达,治疗组表达较弱。结论在胰腺炎肺损伤中白藜芦醇可能通过降低肺脏毛细血管内皮选择素表达,使白细胞与内皮细胞黏附减少,炎性细胞局部浸润降低,而达到治疗胰腺炎肺损伤的目的。     

积雪草甙防治PCI术后再狭窄的实验研究

目的探讨积雪草甙防治经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄的可行性。方法以球囊剥脱家兔髂动脉内膜后,用积雪草甙治疗4周,于造模及治疗4周后分别采血检测内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP),并光镜下观察髂动脉的形态学改变。结果家兔髂动脉球囊剥脱后ET、CRP升高,NO下降,与空白对照组相比有显著性差异(P均<0.001);光镜下见模型组血管内皮脱落,内弹力膜断裂,中膜部分断裂,外膜尚完整。积雪草甙治疗后,ET、CRP下降,NO升高,与病理对照组相比有显著性意义(P<0.05),并呈量-效关系;光镜下见内皮细胞覆盖,内膜基本修复,且高剂量组修复优于低剂量组。而病理对照组内皮细胞大部分脱落,内弹力膜断裂,部分伤及中膜,间质细胞大量增生。结论积雪草甙有促进内皮细胞生长、内膜修复的作用,初步提示其具有治疗PCI术后再狭窄的作用。     

大鼠面神经诱发电位的实验研究

目的探讨面神经诱发电位的最佳刺激参数和记录方法及临床应用价值。方法采用不同刺激波宽(0.04、0.1 ms)、不同记录方法(外耳道后壁、头顶)记录面神经诱发电位;切断面神经干,观察切断前与切断后面神经诱发电位的变化。结果在其他相同刺激条件和记录方法下,采用短波宽0.04 ms刺激较波宽0.1 ms刺激所得面神经诱发电位各波潜伏期标准差小;在相同刺激参数下,大鼠外耳道后壁记录较其头顶记录所得波形稳定;切断面神经干后,可见面神经诱发电位N1波潜伏期延长或波形消失等现象。结论采用刺激波宽0.04 ms,外耳道后壁记录可以获得较清晰、重复性好的面神经诱发电位波形;面神经诱发电位可以反映面神经的功能状态。     

抗乳增片治疗大鼠乳腺增生的实验研究

目的研究抗乳增片对大鼠乳腺增生病的治疗作用及其机制。方法采用手术摘除卵巢后腹腔注射苯甲酸雌二醇造成大鼠乳腺增生模型。结果与模型组比较,抗乳增片治疗组的大鼠乳头红肿、增大均较轻;血清雌二醇水平较低,孕酮水平较高;凝血时间延长;血流变各项指标明显改善。结论抗乳增片对大鼠乳腺增生病有治疗作用,其机制可能是通过调节大鼠的激素水平和改善血液流变性来实现的。     

清热益气通络方治疗糖尿病肾病大鼠蛋白尿的实验研究

目的探讨清热益气通络方治疗糖尿病肾病(DN)大鼠蛋白尿的机制。方法 37只采用单侧肾切除腹腔注射链脲佐菌素的方法建立的糖尿病肾病大鼠模型分为3组:模型组、中药组和厄贝沙坦组,另设正常对照组。连续治疗12周后,检测24h微量白蛋白(umAlb)、24h尿蛋白量(UPro)、内生肌酐清除率(Ccr)。免疫荧光双标记足细胞表面特异性蛋白(podocalyxin)、结蛋白(desmin),荧光标记足细胞肾胚胎瘤抑制基因(wilms tumor 1,WT1)计数足细胞数及密度。光镜及电镜观察肾小球结构。结果与对照组比,模型组大鼠BW/KW、24hUPro、24humAlb、Ccr及desmin吸光度显著增高(P<0.01或P<0.05),podocalyxin吸光度及足细胞密度显著降低(P<0.01);清热益气通络方及厄贝沙坦能改善DN大鼠以上指标,与模型组比有统计学差异(P<0.01或P<0.05);清热益气通络方降低24hUPro及上调podocalyxin表达的作用优于厄贝沙坦(P<0.05)。结论清热益气通络方药能降低DN尿蛋白的排泄,其作用机制可能与拮抗podocalyxin、desmin蛋白在足细胞的异常表达、一定程度抑制DN足细胞上皮-间充质转分化有关。     

阴离子交换树脂再生液循环的实验研究

通过对NaOH-H2O-C2H5OH-Na2SO4(NaCl)体系相平衡规律的研究,提出了循环利用阴离子交换树脂再生溶液的方法,该方法利用乙醇调整再生液体系的相平衡,分离出再生产物,实现再生液的循环使用,防止了水体污染和资源浪费.     

含铜、锌冷晶体停搏液对心肌保护的实验研究

以离体灌注鼠心为模型，观察了铜、锌加入ＳＴ·Ｔｈｏｍａｓ心脏停搏液对缺血再灌注心肌的保护作用。通过观察乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、磷酸肌酸酶（ＣＫ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）、丙二醛（ＭＤＡ）的含量及心肌超微结构改变，发现应用含铜、锌冷晶体停搏液能明显减轻心肌再灌注损伤，有利于术后心功能恢复。     

多类型、多层次、多目标继续教育体系的研究

本文通过分析目前国际、国内继续教育实施的现状,指出发展多类型、多层次、多目标的继续教育体系的重要意义,同时对构建国民终身教育平台,建立学习型社会需要解决的主要问题进行了深入探讨。     

大鼠去势后对颌骨和股骨骨小梁结构的影响

目的　观察雌激素低下时骨质疏松对颌骨和股骨骨小梁结构的影响。方法　切除SD雌性大鼠双侧卵巢 8周后处死大鼠 ,取颌骨和股骨标本 ,对组织切片进行骨组织形态计量学分析。结果　去势后大鼠颌骨、股骨均呈疏松化改变 ,实验组骨小梁面积比、骨小梁平均宽度、骨小梁平均间隔宽度与对照组具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,股骨的变化更为明显。结论　骨质疏松对全身骨组织和口腔骨组织的影响具有差异性 ,颌骨骨吸收小于全身骨组织的吸收。     

芝麻素对高脂血症大鼠脂代谢的作用

目的 探讨芝麻素对高脂血症大鼠脂代谢紊乱的作用.方法 选择SD大鼠,喂饲高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型.然后对高脂模型大鼠进行芝麻素干预7周后,检测各组大鼠的血脂、抗氧化酶和过氧化产物水平,观察肝脏组织的形态学变化.结果 芝麻素可以降低高脂血症大鼠血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)及载脂蛋白B(apolipoprotein B, apoB)的水平,适当升高高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)和载脂蛋白A(apolipoprotein A, apoA)的含量(P<0.05);可以降低高脂血症大鼠血清自由基代谢产物丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量,同时提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)的活力,提高机体抑制羟自由基的能力(P<0.05);芝麻素高、中、低剂量组对高脂血症大鼠肝脏的脂肪变性有不同程度的缓解作用.结论 芝麻素可以调节高脂血症大鼠的脂代谢,缓解机体的氧化应激,改善高脂血症大鼠肝脏的脂肪变性.     

高脂饮食诱发大鼠胰岛素抵抗的实验研究

目的　观察高脂饮食对正常大鼠胰岛素敏感性的影响。方法　用等热卡高脂饮食 (HF)饲养正常大鼠 ,并以胰岛素增敏剂曲格列酮进行干预 ,用葡萄糖 胰岛素耐量试验测定胰岛素敏感性 ,检测大鼠血压、血糖、胰岛素、内皮素 1、血脂、组织糖原及甘油三酯等指标。结果　等热卡HF对大鼠体重、血压、血糖无影响 ,胰岛素、甘油三酯、胆固醇及内皮素 1水平明显升高 ,高密度脂蛋白和组织糖原含量下降。HF 4周时已出现胰岛素抵抗 (IR) (K值 5 .6 3,与对照组K值7.77比较 ,P <0 .0 1)。HF 7周时 ,IR进一步加重。曲格列酮干预后 ,胰岛素敏感性明显改善。结论　HF能够诱发正常大鼠发生胰岛素抵抗 ,组织糖原合成下降与胰岛素抵抗有关     

卡托普利对高血压大鼠Klotho蛋白的影响

目的观察卡托普利对高血压模型大鼠Klotho蛋白及相关炎性因子的影响。方法 SD大鼠18只,随机分为正常组、模型组、干预组,其中模型组及干预组先给予N'-硝基-L-精氨酸灌胃建立高血压大鼠模型。造模成功后,干预组给予卡托普利100 mg/kg灌胃,正常组、模型组给予等体积的生理盐水灌胃。测大鼠尾动脉血压变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测血浆中Klotho蛋白、血栓素A2(thromboxane, TXA2)、内皮素(endothelin, ET)水平,硝酸还原酶法测一氧化氮(nitric oxide, NO)水平,TBA法测丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,WST-1法测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性。观察每组大鼠胸主动脉血管壁HE染色病理变化,免疫组化CD31标记观察血管内皮细胞损伤。结果与正常组比较,模型组TXA2、ET、MDA含量高于正常组(P<0.05),Klotho蛋白含量、NO含量、SOD活性低于正常组(P<0.05);与模型组比较,干预组TXA2、ET、MDA含量显著降低(P<0.05),Klotho蛋白含量、NO含量、SOD活性高于模型组(P<0.05)。HE染色结果显示:模型组大鼠主动脉血管中膜弹力纤维增生、紊乱,管壁较正常组增厚;干预组大鼠血管管壁厚度明显小于模型组。免疫组化结果显示:模型组大鼠主动脉血管内皮细胞受损、脱落;干预组大鼠血管内皮细胞增多、逐渐修复。结论卡托普利可以减轻内皮细胞的应激反应、修复血管内皮,改善血管内皮功能,提高Klotho蛋白水平。     

大鼠肾脏缺血后处理对肾功能及尿NAG酶的影响

目的 探讨SD大鼠肾脏缺血后处理(ischemic postconditioning)对肾功能和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)的影响.方法 SD大鼠54只,随机分为对照组(结扎右肾蒂,分离左肾动脉,暴露30 min)、缺血-再灌注(IR)组(结扎右肾蒂,左肾动脉阻断45 min后恢复血供)、缺血后处理(IPO)组(在IR组处理基础上,左肾动脉给予10次的再灌注20 s-缺血20 s).检测不同时间点肾功能和尿NAG酶.结果 IPO组比IR组的血尿素氮及肌酐均显著降低,6、12、24 h下降最明显(P＜0.05).IR组和IPO组尿NAG酶均高于对照组,IPO组较IR组6、12h降低明显(P＜0.05).结论 缺血后处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤具有保护作用,可以减轻血尿素氮及肌酐水平,减少肾小管损伤.     

自发性高血压大鼠纤维结合蛋白的表达及氯沙坦的干预作用

目的观察自发性高血压大鼠(SHR)血、尿纤维结合蛋白(fibronectin,Fn)水平、肾脏Fn的表达及氯沙坦的干预作用。方法雄性14周龄SHR 16只,随机分为高血压组(SHR组)和氯沙坦治疗组(T-SHR组),每组8只,T-SHR组氯沙坦灌胃30 mg/(kg.d);另选14周龄雄性Wistar-kyoto大鼠8只为正常对照组(WKY组)。16周后,观察各组大鼠体重、收缩压,双抗体夹心ELISA法检测血、尿Fn水平,免疫组化法检测肾脏Fn表达。结果①SHR组收缩压和尿Fn水平明显高于WKY组(P<0.05),血Fn水平明显低于WKY组(P<0.05),肾脏Fn主要表达于肾间质、部分肾小球系膜细胞和肾小球囊,其肾脏Fn表达明显高于WKY组(P<0.05);②T-SHR组收缩压及尿Fn水平较SHR组明显降低(P<0.05),血Fn水平较SHR组明显升高(P<0.05),肾脏Fn表达较SHR组明显降低(P<0.05)。结论 SHR尿Fn水平升高,血Fn水平降低,肾脏Fn表达水平上调;氯沙坦可能通过部分抑制SHR肾脏Fn的表达,对早期高血压肾损害有保护作用。     

异氟醚和安氟醚对大鼠海马神经元自发放电活动的影响

目的　研究吸入麻醉剂安氟醚和异氟醚对大鼠海马神经元自发放电活动的影响。方法　将新生SD大鼠迅速断头取全脑 ,置于通入 1.3 6g·L- 1(95% )O2 和 0 .0 98g·L- 1(5% )CO2 混合气体的 4℃人工脑脊液 (ACSF)中 ,再用振动切片机切制成 3 0 0～ 40 0 μm含海马的脑薄片 ,然后用全细胞膜片钳记录技术 ,分别观察不同浓度的安氟醚和异氟醚对海马神经元自发放电频率的影响。结果　安氟醚和异氟醚都能浓度依赖性地抑制海马CA1区神经元放电频率。安氟醚 (0 .2g·L- 1～ 0 .6g·L- 1)和异氟醚 (0 .12g·L- 1～ 0 .3 6g·L- 1)能使海马CA1区神经元放电频率产生明显的抑制作用 ,冲洗 5min后 ,放电频率可逐渐恢复到给药前水平。结论　安氟醚和异氟醚对大鼠海马CA1区神经元自发放电活动可产生明显可逆性的抑制作用 ,表明海马CA1区是吸入麻醉剂在中枢神经系统中的重要作用部位。     

非洛地平对SD大鼠骨组织形态学的影响

目的 明确非洛地平灌胃对SD大鼠骨质代谢的作用,确定其对骨质疏松的影响,为临床用药提供直接的动物实验证据.方法 SD大鼠132只,随机分为对照组及非洛地平高、中、底剂量组.对照组每天给予蒸馏水灌胃,非洛地平高、中、低剂量组分别每天给予非洛地平0.15、0.45、1.25mg/kg体重灌胃.3、4、5、6月后进行右侧股骨全长HE染色,计算平均骨小梁密度(MTPD)、平均骨小梁间距(MTPS)、平均骨小梁厚度(MTPT)、骨小梁间连接点数(TB.n)、骨小梁末端数(FFT)等静态参数.结果 ①3、4个月后,各组大鼠以上指标均无明显差异(P＞0.05);②5个月后,非洛地平高、中剂量组与正常对照组和低剂量组相比MTPD、MTPT、TB.n明显减低(P＜0.05),MTPS、FFT则明显增加(P＜0.05);③6个月后,非洛地平低剂量组与其他组相比,MTPD、MTPT、TB.n均明显增加(P＜0.05),MTPS、FFT明显减少(P＜0.05);而非洛地平高、中剂量组相比正常组,MTPD、MTPT、TB.n均明显减少(P＜0.05),MTPS、FFT明显增大,高剂量组尤甚(P＜0.05,P＜0.01).结论 非洛地平短期应用对大鼠股骨组织学结构无影响.随着用药时间的延长,中、高剂量能引起骨丢失;低剂量则能抑制骨吸收,利于向增加骨强度的方向发展,有效地保护骨骼.     

不同方式的睡眠剥夺对大鼠学习记忆的影响

目的探讨不同睡眠剥夺方式对大鼠学习记忆能力的影响及其可能机制。方法将24只大鼠用随机数字法分为空白组(不做任何处理140h)、对照组(连续睡眠剥夺120h)、实验1组(睡眠剥夺共计120h,分3次进行,每次40h;间歇2次,每次10h,共间歇20h)和实验2组(睡眠剥夺共计120h,分6次进行,每次20h;间歇5次,每次4h,共间歇20h)。睡眠剥夺后用旷场反应箱测试大鼠的行为,用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力,用试剂盒检测大鼠大脑皮层、海马和血浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及大脑皮层和海马中乙酰胆碱酯酶(TChE)含量。结果旷场反应测试大鼠兴奋性和探索性行为,实验组明显强于对照组,且实验2组强于实验1组(P<0.01);水迷宫测试大鼠学习记忆能力,实验组明显强于对照组,且实验2组强于实验1组(P<0.01);实验组大鼠大脑皮层、海马和血浆中SOD含量明显高于对照组,且实验2组高于实验1组(P<0.01);实验组大鼠大脑皮层、海马和血浆中MDA含量明显低于对照组(P<0.01),且实验2组低于实验1组;实验组大鼠大脑皮层和海马TChE含量明显低于对照组,且实验2组低于实验1组(P<0.01)。结论不同的间断性睡眠剥夺方式对大鼠学习记忆能力有不同的影响,一次性睡眠剥夺时间越长、间歇次数越少,学习记忆能力越差。这种作用可能与睡眠剥夺抑制了大脑皮层、海马和血浆中SOD活性,提高了MDA含量及TChE活性有关。     

右美托咪定对离体大鼠肠系膜动脉炎性相关蛋白表达的影响

目的研究右美托咪定(DEX)对大鼠肠系膜动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)及凋亡相关因子Caspase-3表达旳作用。方法取SPF级SD雄性大鼠,脱臼处死后,在体视显微镜下分离取出肠系膜动脉。建立脂多糖(LPS)诱导的血管损伤实验模型,并根据随机化原则将损伤血管分为DEX组和对照组。DEX组根据所给予DEX的浓度不同分为10~(-8)、10~(-7)、10~(-6) mol/L 3个亚组。分离提取各组动脉组织中RNA及总蛋白后,RT-PCR方法检测TNF-α、IL-1β及CaSR等因子的mRNA水平;Western blot检测TNF-α、CaSR、AMPK及Caspase-3等蛋白的表达变化。结果 10~(-8)、10~(-7)、10~(-6) mol/L DEX组中LPS诱导的血管炎性反应均明显降低,TNF-α的mRNA和蛋白表达及IL-1β的mRNA表达减弱。DEX组血管条的Caspase-3蛋白表达较LPS组显著降低。DEX对LPS诱导的血管AMPK蛋白表达和CaSR的mRNA表达没有明显作用。结论 DEX明显降低与炎症相关蛋白的表达,提示DEX有一定的抗炎症作用。