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以野生型2型人腺伴随病毒(AAV-2)基因组载体pSSV9-int-为基础,构建了一种携带和表达真核基因的基础AAV载体pSSV9/MulV-neosv,表达了neo基因,并采用该载体组建了携带人白细胞介素-2cDNA的重组AAV载体pSSV9/MulV-neosv-IL-2,转染A549细胞后表达了人白细胞介素-2基因。为应用腺伴随病毒作基因治疗研究提供了实验基础。 相似文献
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用野生型AAV-2感染宿主293细胞后对细胞进行了形态学观察,并采用AAVCap基因探针检测了感染细胞标本中的野生型AAVDNA;采用携带β-半乳糖苷酶基因,而不含AAVrep基因及其表达产物的重组AAV作对照,感染293细胞后检测细胞内β-半乳糖苷酶表达产物,同时对细胞作形态学观察。结果显示野生型AAV-2感染宿主细胞后24~48h,多数细胞胞体收缩、变形,部分细胞死亡、脱落,用Cap基因探针从病变的293细胞基因组DNA中检测到了野生AAVDNA;而被重组AAV感染的293细胞表达了β-半乳糖苷酶,而未出现细胞病变,本结果提示野生型AAV对敏感宿主细胞可表现出毒性作用,其原因可能与rep产物的作用有关。 相似文献
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