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目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。 相似文献
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针对传统余热锅炉水动力计算软件的局限性,同时兼顾到软件的交互性、通用性以及可扩展性的要求,以归纳的通用水动力数学模型,基于面向对象程序设计方法建立了各管段计算模块,通过使用 C ++编程语言编制了计算软件。实例应用表明:该软件能适应复杂锅炉在不同热负荷、不同结构设计下的水动力计算要求,使用灵活方便,计算结果可为优化设计提供理论支持。 相似文献
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常宝华 《交通世界(建养机械)》2014,(23):71-72
冲击压实作为加固公路路基的创新技术,目前其还没形成成熟的理论计算方法,但通过冲击压实在公路路基中的应用得出了一些有价值的结论。该技术的施工流程是在通过采取高能量的冲击碾压机,对公路路基采取连续作业的冲击压实,随着冲击压实遍数的增加,使得土层由上到下得到压密,从而形成加固层有效满足公路路基承载力以及稳定性的要求。 相似文献
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桥梁水下承台施工技术 总被引:1,自引:0,他引:1
水中主墩是桥梁工程施工的关键,也是某桥梁主桥段的控制性工程.主墩下部结构施工方案的拟定直接影响到该桥的节点进度,对按期完成施工任务,早日实现全线贯通具有重要意义.鉴于此,在分析该工程施工难点的基础上,详细探讨其水下承台施工技术,以期为同行提供参考借鉴. 相似文献
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常鸿雁 《南通航运职业技术学院学报》2014,13(1):102-104
文章研究了高职数字化图书馆的内涵,提出了采编电子化建设、资源专业化建设、内外资源多样化建设等建设内容,并就数字化资源的使用提出了具体措施,对提升图书馆服务功能具有借鉴意义。 相似文献