Methylation status of the interferon-gamma gene promoter in chronic hepatitis B

Objective To evaluate the methylation status at CpG site -55 in the interferon-gamma (IFN-7) gene promoter and its effect on IFN-7 expression in chronic hepatitis B. Method The authors recruited 30 patients with UBeAg-positive chronic hepatitis B (CHB), 30 HBeAg-negative CHB patients, and 30 healthy blood donors. Pyrosequeneing was used to determine the methylation status at CpG site -55 in the IFN-γ gene promoter following bisulfite treatment of DNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). The expression of IFN-γ was analyzed by real-time RT-PCR and ELISA. HBV DNA in PBMCs was detected by nested PCR. Results The methylation level at CpG site -55 in the IFN-γ gene promoter was significantly increased, resulting in subsequent down-regulation of the expression of this cytoldne in CHB. The methylation level at CpG site -55 was significantly higher in HBeAg-positive patients than in HBeAg-negative ones (P<0.01) and was also significantly higher in PBMCs from HBV DNA-positive patients than from HBV DNA-negative ones (P<0.01) ; the methylation level at CpG site -55 was positively correlated with the amount of HBV DNA in serum (P<0.01). Oonclusion IFN-γ gene expression appears to be regulated by methylation of the IFN-γ gene promoter in CHB; the methylation level at CpG site -55 is associated with HBV infection.     

HBV preS1基因酵母表达载体的构建及表达

目的 构建HBV preS1基因的酵母表达载体,探讨HBV preS1蛋白的功能.方法 以HBV ayw亚型全长质粒PCP10为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增HBV preS1基因,克隆到pGEM-T载体中命名为T-preS1,以NcoⅠ和MluⅠ双酶切T-preS1后回收与酵母表达载体pSos连接,对重组质粒进行序列测定后命名为pSos-preS1,经醋酸锂法将其转化酵母菌cdc25(a),提取酵母蛋白质进行Western免疫印迹分析.结果 成功构建了HBV preS1基因的酵母表达载体,Western免疫印迹分析显示HBV preS1基因在酵母细胞中正确表达.结论 pSos-preS1的构建为通过SOS招募系统(sos-recruitment system, SRS)筛选与HBV preS1蛋白相互作用的蛋白和进一步探讨HBV preS1蛋白在HBV致病中的作用奠定了基础.     

慢性乙肝的干扰素治疗

<正>全世界约3亿人口为慢性乙肝病毒(HBV)感染者,我国有1.2亿以上。依亚洲资料估算HBV携带者的肝硬化年发生率为2％,HBV感染者发生肝癌的危险性高于非HBV感染者,台湾一份报告高200倍,有肝硬化者发生肝癌危险性最大。活动性肝硬化的5年存活率为55％,虽然肝移植可改善存活率,但是移植肝再感染几乎不可避免。如果HBV持续复制,慢性迁延性肝炎(CPH)也可发展为慢性活动性肝炎(CAH)、肝硬化(Cir),发生率高达1/3。可见,慢性HBV感染的抗病毒治疗十分重要。干扰素(IFN)治疗(5MU,每周3次,6个月)后,4.0％HBeAg阳性、HBV DNA阳性的慢性乙肝(CHB)患者出现治疗反应,但亚洲人对IFN治疗反应率低,仅为17％(9/54)。为能在CHB治疗中合理应用IFN,本文就治疗的生物学基础、疗效及影响因素,病例选择、副作用及存在问题等方面近年研究进展简要综述。     

新生儿性别与母亲HBsAg/抗—HBs状态的关系

<正> 流行病学资料证实,乙肝病毒(IIBV)感染后男性易成为乙肝表面抗原(IIBsAg)携带状态,而女性则易产生相应抗体(抗-IIBs)。国外研究双亲IIBsAg/抗-IIBs状态与其子女第二性比率(SSR,活产男婴数/活产女婴数)关系的结果表明,父母双方抗-IIBs均阴性而一方IIBsAg阳性时,SSR最高;父母双方IIBsAg均阴性而一方抗-IIBs阳性时,SSR最低。Blumberg等提出生物学假说,即HBV的抗原与男性相关抗原间存在交叉反应性,以解释这些现象。我们分析了1986年7月～1989年9月出生于我院新生儿的母亲IIBsAg/抗-IIBs状态,以探讨母亲IIBsAg/抗-IIBs与新生儿性别的关系。IIBsAg     

RIBA在慢性丙型病毒性肝炎中的应用价值

采用含ＨＣＶ三种抗原（Ｃ_（２２），Ｃ_（３３），Ｃ_（１００））的重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）检测了７１例抗－ＨＣＶ阳性（ＲＩＡ－２法）的慢性非甲非乙型肝炎患者血清并与ＨＣＶＲＮＡ结果进行了比较。ＲＩＢＡ阳性５６例，可疑８例，对应ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９４．６４％（５３／５６）和３７．５％（３／８），ＲＩＢＡ阴性的７例均未检出ＨＣＶ　ＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ阳性病例中ＲＩＢＡ多为阳性，可疑仅占５．３６％（３／５６），无１例阴性。可见，ＲＩＢＡ阳性即表示ＨＣＶ感染且存在病毒血症，ＲＩＢＡ可作为第二代ＲＩＡ或ＥＬＩＳＡ查抗－ＨＣＶ的确证实验。     

DETECTION OF PLASMA SOLUBLE INTERLEUKIN－2 RECEPTOR IN PATIENTS WITH SEVERE AND CHRONIC ACTIVE HEPATITIS B

ＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＰＬＡＳＭＡＳＯＬＵＢＬＥＩＮＴＥＲＬＥＵＫＩＮ－２ＲＥＣＥＰＴＯＲＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＳＥＶＥＲＥＡＮＤＣＨＲＯＮＩＣＡＣＴＩＶＥＨＥＰＡＴＩＴＩＳＢＺｈａｎｇＳｈｕｌｉｎ；ＷｕＧｕａｎｇｌｉ；ＹａｎＹｕｌａｎ；Ｃｈｅ...     

肾移植术后重症病毒性肝炎的病因学分析

对7例患者肾移植术后并发重症病毒性肝炎的病回进行了分析。发现所有患者均为HBSAg阳性的HBV感染者，2例重叠HCV感染，HAV和HDV重叠感染各1例。表明HBV感染及在此基础上其它肝炎病毒合并感染是发生重症肝炎的主要原因；治疗过程中环孢素A的应用和它所引起的肝肾毒性是移植后重症肝炎发生和影响患者预后的一个重要因素。提出应慎重考虑HBV感染者的肾移植适应症，有HCV、HDV重叠感染者不宜施行肾移植术。对HBsAg阳性肾移植患者应加强术后肝功能的监测，及早应用保肝药物。     

病毒性肝炎血清Ⅲ型前胶原测定及其临床意义

<正>肝纤维化是慢性肝炎的主要病理改变之一。它的发生和发展直接影响肝病的预后。近年来,临床检测学的飞速发展,新的检测方法相继问世,寻找肝硬化早期诊断及动态观察肝纤维化指标日益受到重视。本文检测100例慢性肝炎血清PcⅢ,并分析探讨其临床意义。     

应用抑制性消减杂交技术筛选HBxAg蛋白结合蛋白XBP1的上调基因

目的应用酵母双杂交及生物信息学(bioinformatics)技术获得HBxAg蛋白结合蛋白XBP1,为了解该基因的反式调节机制,利用抑制性消减杂交技术筛选并克隆XBP1蛋白反式激活的靶基因。方法以XBP1表达质粒pcD-NA3.1(-)-myc-his(A)-XBP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)-myc-his(A)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并合成cDNA,经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组,分别衔接两种不同接头,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次PCR反应,产物与T/A克隆载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆经PCR鉴定后进行测序及同源性分析。结果成功构建人XBP1蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA。扩增后得到80个200～1 000bp插入片段的克隆,随机挑选其中30个插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得28个已知编码序列基因和2个未知的新基因。结论 XBP1在肝细胞内表达后能够上调HepG2细胞中许多不同基因表达的变化,这些基因与细胞信号转导、细胞增殖与分化、免疫应答、能量代谢、细胞凋亡、肿瘤发生等生物过程密切相关。     

谈外露骨架橡胶油封的制造

结合生产实际，从胶料制备、外露骨架处理及粘合、模具设计与使用等方面，说明外露骨架橡胶油封制造工艺各环节的基本要求及方法，介绍了一种从高度入手，并考虑整体结构的模具设计新思路，并通过对两种工艺路线的对比，指出较合理的工艺是先硫化后磨削工艺。