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目的 应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建NS5ABP37反式激活相关基因差异表达的cDNA文库,筛选NS5ABP37蛋白反式激活相关基因.方法 以表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5ABP37转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照,从转染后的细胞裂解液中提取mRNA并合成cDNA,经RsaⅠ酶切消化后将实验组cDNA分成两组,分别衔接两种不同接头,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR反应;第2次PCR产物与pGEM-T easy克隆载体连接,构建cDNA消减文库,并转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆经PCR鉴定后进行测序及同源性分析.结果 成功构建了人NS5ABP37蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA文库.扩增后得到60个200~1000bp插入片段的克隆,随机挑选其中20个测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得9种已知功能编码基因.结论 NS5ABP37基因功能涉及细胞生长调节、信号转导和能量代谢. 相似文献
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在大风浪天气条件下,为了使救助船在能够保障自身安全的前提下,尽早靠近遇险目标实施救助,采用专家问卷调查的方式,得到了北海救助局主力救助船的失速情况、航行风压差与风险等级隶属度等数据。根据模糊数学和风险分析理论,建立了救助船的风险评估模型,提出了基于电子海图的大风浪信息综合显示与救助船舶航线优选平台的功能需求,优化了航线风险评估流程,并设计了大风浪天气条件下海面遇险目标快速接近辅助决策系统。仿真结果表明:距离遇险目标最近的救助船北海救196航线风险等级过大,Ⅲ级风险的隶属度为1.0;救助船北海救108沿2号航线前往遇险目标时,会遭遇8级横风,Ⅲ级风险的隶属度为0.5,失速明显且航行时间过长;救助船北海救113的1号航线安全性较佳,时间最短,为最佳航线。仿真结果与实际结果一致,可见,系统有效。 相似文献
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李康 《交通世界(建养机械)》2010,(3):220-221
省道254线西支河桥修建于2001年,为空心板结构,桥梁全长65.0m,桥面宽17m,桥面铺装设计厚度10cm,C40水泥砼,自建成投入使用以来,桥面水泥砼结构基本完好,只有桥梁伸缩缝锚固端砼局部破损,然后不断延伸扩大,致使伸缩缝不能正常使用,形成桥梁病害。 相似文献
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汽车动力源变革与汽车交通的可持续性 总被引:1,自引:0,他引:1
从以燃油发动机为动力源的汽车交通发展的背景观察和发展趋势出发,论述了汽车交通发展非可持续性的三大方面;介绍了汽车动力源变革与汽车交通可持续发展的若干方面,其中包括从传统汽车到电动车质变过程的多种选择和汽车再制造业的兴起,同时结合北京实际,论述了优先发展公共交通与提高其吸引力的若干对策。 相似文献
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