姜黄素对食管癌细胞系放射敏感性的影响及其机理

目的　探讨姜黄素对食管癌细胞系Eca10 9的放射增敏作用及其机制。方法　利用细胞克隆技术进行剂量 -存活曲线分析 ,末端脱氧核苷酰转移酶法检测细胞凋亡 ,并对细胞周期进行分析。结果　姜黄素组D0 值为 91.35cGy ,空白对照和空白药物组D0 值分别为 130 .0 7cGy和 138.37cGy ,(P <0 .0 5 )。流式细胞仪分析空白组和姜黄素组凋亡区阳性细胞分别为 1.0 1%和 87.5 8% (P <0 .0 5 ) ;经姜黄素处理后 ,与对照组相比 ,G0 1 期细胞比例降低 ,G2 + M期细胞比例增高。结论　姜黄素可以明显提高Eca 10 9细胞的放射敏感性 ,机制可能与其引起瘤细胞周期阻滞 ,诱导肿瘤细胞凋亡有关     

Identification of differentially expressed genes in two new human bladder carcinoma cell lines

Objective To screen and identify differentially expressed genes in two new human urothelial carcinoma cell lines, BLS-211 and BLX. Methods Suppression subtractive hybridization （SSH） was used to createa subtracted library, and clones were sequenced. Results Totally 13 over-expressed genes in BLX and 9 in BLS-211 cells were obtained, respectively. Among them, 18 were known genes and 4 were new ESTs （Expressed Sequence Tag）, and were collected by GenBank dbEST database （The access number was EB390424-7）. Conclusion SSH is a powerful method for the identification of differentially expressed genes. The differential expression of some BCG-associated genes in different ceils may be related to the different responses to clinical BCG therapy. The identified new ESTs can be cloned for full length to further study their functions.     

不同表型的人宫颈癌细胞亚克隆株的基因表达谱

目的　采用基因芯片技术分析同一人宫颈癌细胞株来源 ,锚着依赖性不同的两个亚克隆细胞株的侵袭相关基因表达。方法　采用有限稀释法建立CS12 13细胞的CS0 3和CS0 7亚克隆细胞株 ,检测其在软琼脂中的集落形成率 ,分别用流式细胞术和免疫组化法观察细胞黏附分子CD4 4和E cadherin、Fibronetin的表达 ,并将CS0 3和CS0 7细胞的总RNA经逆转录获得的cDNA作为探针 ,与含 10 11个与细胞信号转导和细胞膜受体相关基因表达谱芯片杂交 ,信号用ScanArray 30 0 0扫描分析。结果　CS0 3和CS0 7细胞的集落形成率分别是 0和 38.5 % ,CD4 4表达分别是 35 .1%和 13.7% ;两者的基因表达谱差异明显 ,CS0 3细胞中表达上调的基因为 12个 ,CS0 7细胞中有 2 1个基因表达增加 ,其中一些与细胞增生、迁移、凋亡 ,细胞间信号传导和肿瘤转移相关 ,包括p34cdc2 、转化生长因子 β刺激蛋白 (TSC2 2 )、纤维蛋白酶原活性因子抑制剂 (PAI 1)和桥粒相关蛋白 (PININ)等。结论　同一来源的人宫颈癌细胞株中有多个差异表达基因 ,它们参与人宫颈癌细胞的表型特征 ,可能影响肿瘤的进展。     

THE CONSTRUCTION AND EXPRESSION OF THE MURINE SCFV GENE IN E. COLI AGAINST HUMAN CERVICAL CANCER

Objective To obtain the gene of murine Single chain Fv fragment （ScFv） against haman cervical cancer and to express it in E. coli. Methods The variable region gene fragments of the heavy and light chains, which were amplified respectively using recombinant DNA techniques from CsA125 hybridama cells, were spliced together through a flexible linker to ScFv against human cervical cancer. The ScFv genes were then cloned into expression vector pCANTAB 5E and expressed in E. coli HB2151 and TG1 respectively. The soluble ScFv were characterized by SDSPAGE and Western blot. The antigen-binding activities of the soluble and phage displayed ScFv were assayed by ELISA and cell immunohistochemical analysis. Results The expressed ScFv antibodies were soluble and phage displayed. soluble ScFv secreted and expressed in E. coli HB2151 induced by IPTG were confirmed with SDS-PAGE, Western blot and ELISA. The specific binding capacity of the soluble and phage displayed ScFv to the surface associated antigen of human cervical cancer cell line was further confirmed with immunohistochemical studies. Conclusion The soluble and phage displayed ScFv expressed in E. coll against haman cervical cancer showed high, specific affinity for the cervical cancer cell line surface associated antigen.     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因表达对人肝癌细胞的生长抑制

使用转导有单纯疱疹Ⅰ型病毒胸苷激酶（ＨＳＶ１－ＴＫ）基因的人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞株建立了裸鼠移植瘤模型，并进行了在体和体外试验性无环鸟苷（ＡＣＶ）治疗。结果发现基因转导后的肝癌细胞表现出对ＡＣＶ的敏感性，肝癌细胞生长抑制与ＡＣＶ的剂量有关；用药组裸鼠除平均瘤重明显低于对照组外，还可见细胞核分裂指数降低，伴有细胞变性和坏死。结果表明：ＨＳＶ１－ＴＫ基因经逆转录病毒转导后，用ＡＣＶ诱导表达明显抑制了人肝癌细胞的生长。     

逆转录病毒转移的β－半乳糖苷酶基因在成纤维细胞中的表达

为了研究逆转录病毒载体转移外源基因的实用性，我们采用小鼠白血病病毒（ＭｏＭＬＶ）载体将大肠杆菌的β－半乳糖苷酶基因（ｌａｃＺ）和抗新霉素（ＮｅｏＲ）基因转移到大鼠成纤维细胞内，对整合后的前病毒结构和基因表达进行了酶活性测定和ＤＮＡ分析。结果表明：ｌａｃＺ基因可以在大鼠皮肤成纤维细胞和２０８Ｆ细胞株中较长时间地表达；前病毒整合位点、靶细胞特性和整合后的载体结构与转入基因表达的稳定性紧密相关。     

铁路综合移动通信网组网关键技术分析与研究

针对铁路综合移动通信网的组网存在的很多难题,根据以往的GSM组网技术难以解决铁路通信网组网存在的特有问题,概述铁路综合移动通信网的发展和组网技术,分析铁路通信网组网独特的特点和存在的特有难题,结合这些特点提出了解决办法;然后,重点阐述这些组网技术对现有铁路业务的适应性,以及其对未来发展铁路业务发展的支持性;着重分析和研究铁路通信网组网的关键技术问题与策略。     

人白细胞介素-2 cDNA导入对卵巢癌耐药细胞株耐药性的逆转

为了构建ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒，并探讨白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ导入对顺铂诱导的卵巢癌耐药细胞株耐药性的影响。我们采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ－２ｃＤＮＡ片段，构建ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒。导入顺铂诱导的人卵巢癌耐药细胞株，观察其耐药性的改变。结果成功构建了ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒，并在Ｃｏｓ－７细胞高效表达，导入卵巢癌耐药细胞后其对顺铂的敏感性显著升高。说明转导ｐｃＤ－ＮＡ－ＩＬ－２基因的人卵巢癌耐药细胞株其耐药性有明显逆转，而且ＩＬ－２亦可逆转非ｍｄｒ１依赖的耐药性     

现代机械设计的创新方法

随着社会经济的不断发展，现代机械制造业得到了长足的发展。机械设计作为机械工程最重要的组成部分，能够决定机械性能的有效发挥。新形势下，现代机械设计也需要与时俱进，实现机械设计和创新有机结合，创造性地设计出时代发展所需要的机械，更好地为社会经济发展服务。现代机械设计的创新，是现代机械设计发展的原动力，对于保障机械生产有着不可替代的推动作用。