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101.
构建及鉴定携带角蛋白启动子和人乳头瘤病毒16E6/E7基因的重组腺病毒 总被引:2,自引:0,他引:2
目的利用AdEasy系统构建携带人角蛋白启动子的人乳头瘤病毒-16(HPV-16)E6/E7基因重组腺病毒,并通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。方法应用PCR方法从含有HPV-16全基因序列的质粒上扩增E6/E7基因,构建pCDNA3.1(-)-K14-E6/E7-polA载体,扩增、酶切获得K14-E6/E7-polA片段插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack上,构建重组穿梭载体pAdTrack-K14-E6/E7-polA,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组得到腺病毒质粒pAd-K14-E6/E7-polA,经人胚肾293细胞包装后得到重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。氢化铯(CsCl)梯度离心纯化病毒,提取病毒再感染后的293细胞总RNA,通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。结果通过同源重组的方法构建了腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA载体,经酶切和测序鉴定该质粒构建成功。293细胞包装3d后观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,CsCl梯度离心纯化最终获得7.2×1010pfu/mL滴度的重组病毒;用该滴度病毒重新感染293细胞3d后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测E6/E7有表达。结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和E6/E7的重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。这将为进一步研究HPV-16E6/E7基因功能及利用基因治疗女性宫颈癌奠定了基础。 相似文献
102.
本文深入研究了基于VaR的投资决策问题,给出了VaR约束下的投资组合优化模型。该模型在Markowitz均值一方差模型的基础上,加入了VaR约束,保证了与我国金融机构现有投资选择方法在技术上的一致性。我们还给出了一种几何求解方法,巧妙地解决了传统Laganerge乘子法无法处理上述模型的问题。 相似文献
103.
原发性肾病综合征患儿白细胞介素-4、γ-干扰素与激素疗效的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨原发性肾病综合征患儿治疗前外周血白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)与激素治疗效应的关系。方法31例原发性肾病综合征患儿于治疗前抽取静脉血分离单个核细胞,加入植物血凝素刺激其生长,取其上清液,用酶联免疫吸附双抗夹心法检测IL-4、IFN-γ,激素治疗8周后根据治疗反应分为激素敏感组(17例)及激素耐药组(14例)。20例健康儿童作为对照组。结果原发性肾病综合征中激素敏感组治疗前外周血IL-4水平明显高于激素耐药组(P<0.01);IFN-γ水平在激素敏感组及激素耐药组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论测定肾病综合征患儿治疗前外周血中的IL-4可以作为预测激素疗效的一项指标。 相似文献
104.
105.
毛星 《铁道标准设计通讯》2014,(Z1):192-194
随着我国铁路建设的大发展,新建铁路隧道施工越来越多。为保证隧道施工的安全和隧道施工的进度,必须对隧道前方的地质变化情况进行准确实时的了解,这就要求做好隧道的超前地质预报工作。地质雷达是一种扫描速度快、操作简单、分辨率高、抗干扰能力强的无损预报方法,它对于隧道施工中经常遇到的地质问题,岩溶、断层破碎带、节理裂隙发育带、特殊岩土和富水地层等都具有良好的预报效果。 相似文献
106.
当前,随着科学技术水平的不断提高,各个国家都更加重视汽车驾驶的安全,汽车驾驶模拟器与现代化汽车驾驶教学结合起来,利用现代化的教学技术手段来提高教学的实际效果和质量。文章认为在汽车驾驶教学过程中使用汽车模拟器对于教学工作质量的提高具有重要的现实意义,能够有效提高学员对于基础理论知识的理解以及实践技能地提高。对于智能汽车驾驶模拟器在汽车驾驶教学中的应用意义,希望为有关专业人士带来一定的参考与借鉴。 相似文献
107.
基于将陡坡面简化为三个平面,推导了平面滑动稳定安全系数的计算公式,编制了相应的计算程序,为陡坡路段路堤填筑期及运营期的稳定性判断提供依据。 相似文献
108.
<正>在检测车载电网型电源电路时,类似"面对电路故障,首查电源正极线与搭铁"、"查找电路故障,就如顺藤摸瓜,要紧抓电流流经的电路这个藤"这样经典的维修宝典,难免显得有些牵强和不足。车载电网控制单元将电源的使用对象和电流 相似文献
109.
62201部队在上级业务部门的有力领导下,认真贯彻落实总部《军队汽车维修技术兵职业技能鉴定工作实施办法》,坚持“以鉴促建”、“以评促学”,加强组织领导,实施科学管理,共计鉴定中级汽车维修技工90余名、初级汽车维修技工270余名,充分调动了汽车维修技术兵爱军精武的积极性,有力促进了汽车维修技术兵队伍建设,进一步提升了车辆装备技术保障水平。 相似文献
110.
避难处所问题是当前海运界重点关注的课题之一,IMO及其很多成员国都在进行深入研究和实践。本文从避难处所问题的国内现状出发,以油轮为切入点,详细分析了中国面临的油污风险、油污防备体系存在的问题等,并结合国际公约和有关文件的要求,指出了中国建立避难处所体系的必要性和现实意义,同时根据中国实际,就中国建立避难处所体系提出了一些合理建议。 相似文献