人GLUT4基因的克隆及原核表达的初步实验研究

目的　通过反转录聚合酶链方法 ,从人新鲜手术肌肉组织获得人葡萄糖转运子 4 (GLUT4 )cDNA基因 ,并分别克隆入测序载体、表达载体 ,获得具有正确序列的目的基因及其原核表达产物 ,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定物质基础。方法　经GenBank在线检索 ,设计、确定人GLUT4cDNA基因特异引物 ,采用反转录聚合酶链 (RT PCR)方法从一例手术的人新鲜腹部肌肉组织总RNA模板中 ,获得人GLUT4表达片段cDNA的基因 ,经克隆入测序载体pGEM 3zf(- )测序 ,验证cDNA大小、完整性及序列。再克隆入表达载体 pBV2 2 0 ,经温度诱导 ,在E .coli获得表达。结果　以设计的特异引物 ,从人肌肉组织模板中能得到预期大小完整的人GLUT4cDNA基因 ,并能插入预定的克隆载体中测序 ,所得基因的序列与目的基因的序列相符。所获GLUT4cDNA基因插入原核非融合表达载体pBV2 2 0 ,获得预期大小的重组表达产物。结论　从人肌肉组织中能获得具有正确序列、含完整起始及终止密码的人GLUT4cDNA基因。该人GLUT4cDNA基因的体外重组体能在原核表达系统表达     

2008年汽车养路费开征

2008年汽车养路费从12月11日开始征稽，优惠期4个月，即在2008年4月10日前缴纳全年规费的，按统缴10个月计征。 据了解，养路费的缴费标准是客车每月每征费计量吨200元，货车每月每征费计量吨170元，摩托车每月每台17元。广州市区营运客车公路客运附加费每月每座60元，从化、增城的营运客车公路客运附加费每月每座55元。     

三跨预应力混凝土V形墩连续刚构桥静动载试验研究

通过对三跨(40 64 52)预应力混凝土V形连续刚构桥进行成桥静、动载试验，了解桥梁荷载作用下实际工作状态，测定结构的静力和动力特性，从而判断湖州路桥整体结构的安全承载能力和使用性能。     

支承桩的质量监督及质量问题处理

本文介绍支承桩的质量监督要点及事故处理方案.     

沥青混合料高温性能指标的试验研究及分析

通过大量的室内试验，对沥青混合料高温性能的四种评价指标(动稳定度、车辙试验相对变形、单轴蠕变试验劲度模量、Superpave混合料最大次数下的残余空隙率)进行了比较分析。提出了采用三项指标评价沥青混合料高温性能的评价方法。     

乌鲁木齐铁路局管内地质病害类型与防治

结合新疆维吾尔自治区特殊的自然环境和地质条件,分析乌鲁木齐铁路局管内地质病害类型和表现形式,以及主要病害形成的原因和分布特点。针对风沙灾害、盐渍土病害、雪害、水害、冻害和边坡溜坍、崩塌、落石等病害,提出防治措施。充分运用现代科学技术,研究铁路工程地质灾害的综合勘察、评价方法和防治措施。     

世界铁路创新技术与发展

西班牙铁路货物运输战略发展规划 2010年秋,西班牙政府批准了西班牙铁路货物运输战略发展规划,计划到2020年．铁路运输在国内货物运输市场所占比重应当从4.1％增加到10％．     

企业实施ERP系统的难点分析

ERP系统是指建立在信息技术基础上,以系统化的管理思想为企业决策层及员工提供决策运行手段的管理平台.企业实施ERP,不是简单的把自己手头的工作套进成熟的ERP系统软件平台,而是要进行管理思想、管理模式、管理组织、业务流程的全面变革.     

灵敏度方法在汽车设计中的应用

本文介绍了灵敏度方法,该方法可用来了解汽车参数改变对汽车系统响应的影响。不管所建的汽车数学模型复杂与否,此方法都可以对系统进行分析。应用时可采用不同的灵敏度函数形式：具有量纲与无量纲,包括一阶标准、百分比、对数和高阶标准灵敏度函数。灵敏度函数定义为系统变量对系统参数的偏微分。该方法可以研究系统时变与非时变参数对系统变量的影响,且可以缩短汽车系统的设计周期,避免实车试验带来的巨大经济负担。     

低客流公交运营模式优化方法

为解决低客流传统公交线路运营效率低的问题,考虑低客流公交线路客流时空特性,提出了采用传统公交与需求响应公交(demand response transit, DRT)相结合的组合运营模式：全时段传统公交模式(M1)、分时段传统公交+DRT模式(M2)全时段DRT模式(M3)的优化思路。分析了不同运营模式的要素,考虑乘客空间、时间特征,构建基于三维时空聚类的站点规划模型;考虑车辆行驶成本、乘客时间成本,以总班次运营成本最小为目标,构建了带有时间窗的灵活型DRT线路与调度规划模型,运用遗传算法进行求解。以北京市某公交线路进行仿真实证,仿真结果表明：M2相比M1、M3分别降低了9.0%、23.0%的运营成本。研究可针对低客流公共交通服务的运营方案制定与优化提供技术参考。