脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究.方法 以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒载体连接,构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒.以脂质体Lipofectamine2000 转染Hela细胞,提取总RNA,通过RT-PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达,Western blot 及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位.结果 酶切和PCR鉴定证实BDNF基因片段正确克隆入载体质粒中,转染Hela细胞后,RT PCR证实BDNF EGFP融合蛋白在转录水平有表达,荧光显微镜观察显示BDNF EGFP融合蛋白主要分布于细胞质中,Western blot结果显示Hela细胞培养液中有BDNF EGFP融合蛋白存在. 结论成功构建了BDNF EGFP融合蛋白真核细胞表达质粒,BDNF EGFP融合蛋白能够在Hela细胞中表达,主要位于细胞质中并可以分泌到细胞外.     

快递企业配送网络的鲁棒性及其提升对策研究

为运用定量的方法提升快递企业配送网络的鲁棒性,以某快递企业的订单号为数据来源,通过网络爬虫、数据清洗等大数据处理手段,获得其在全国范围内的配送网点与路径数据,描绘了其配送网络的拓扑结构;构建重要度评价矩阵确定了配送网络中重要节点,并以其作为测试指标对该配送网络进行鲁棒性分析,结果表明该配送网络对随机性破坏表现出鲁棒性,对蓄意性破坏表现出脆弱性;以投入成本为约束,构造了鲁棒性优化模型,运用Python求解,验证了模型的可行性和有效性,并以求解结果为依据,对该配送网络提出鲁棒性提升对策。     

关于我国石油战略储备运输与海域环境保护的思考

通过对我国石油战略储备计划的实施，海上石油进口运输量的剧增，海洋环境污染风险的提高，以及我国防治船舶污染管理的现状等分析，阐述了代表国家行使海洋环境保护职能的海事主管机关所应采取的对策，以确保我国石油战略储备运输安全和海域环境免受污染。     

202型转向架改造及试制情况

我国铁路实行新运行图后，装用２０２型转向架的车辆反映出垂向振动大、侧滚振动严重、脱轨系数超标、磨耗严重、故障率显著上升等问题。为此，铁道部决定对该型转向架实施七项改进措施，使之适应提速要求。首辆补强改造试验车已通过车辆动力学试验，１９９７年７月２８日完成了图纸定型工作。     

精明增长的城市交通发展策略研究——以丽水中心城市为例

无序蔓延和交通拥堵是当前我国快速城市化进程普遍面临的问题。精明增长是一种高效、集约、紧凑的城市发展模式。文章以丽水为例,探讨精明增长模式下的城市交通发展战略。在解析精明增长内涵、发展目标和原则的基础上,首先从城市发展约束条件和自身诉求两个方面阐明了丽水市选择精明增长的必要性;基于城市交通面临的挑战,构建了丽水城市交通发展战略,进而提出相应的发展策略和发展目标。文章将对促进我国城市化朝着科学理性和可持续的方向发展具有一定的意义。     

数据驱动的收费站运行参数预测及车道配置

为优化电子不停车收费系统(ETC)推广期间收费站车道配置.依据数据驱动,提出了预测指定日期ETC和人工半自动收费车道(MTC)小时最高流量的方法.结合排队论和驾驶员在收费站选择车道的行为,提出了收费站车道资源配置的优化,并以上海市112个收费站实际数据为例进行验证.研究结果表明:所提出的预测收费站日流量、小时最高流量及ETC流量占比趋势等方法可行,可为收费站车道资源配置提供借鉴.     

首都机场线风源装置国产化研制

针对首都机场线用风源装置进行国产化研制，提出合理设计方案，实现了滑片式空压机国产化，解决了原车空压机存在的润滑油乳化和加油口机壳螺纹损坏问题，并优化了车辆对空压机的控制策略，可与原车风源装置在性能指标、气路电气接口保持一致。与原车风源装置进行对比，体现出国产化方案的优势。进行了型式试验、动静态调试、运营考核，验证了国产化风源装置的性能和可靠性。     

路侧开口车辆借道对公交专用道延误的影响

路侧开口车辆需借路侧式公交专用道才能汇入主线车流，借道过程中的车辆互扰行为会对公交车辆的运行延误产生影响。为研究道路开口交通属性对公交运行延误的影响程度，选取开口交通量、车辆转向比例、开口距下游交叉口距离为影响因素，基于实地调查数据，利用VISSIM软件设计仿真了多种场景下的交通运行，并利用灰色关联分析理论对仿真结果进行分析。结果表明：开口交通量、车辆转向比例、开口距下游交叉口距离均对公交延误产生较强的影响，其中开口交通量对公交延误的影响最大，关联度为0.804，车辆转向比例产生的影响最小，关联度为0.733。该结论可为公交专用道的交通组织管控、规划设计提供相关理论支撑。