增强型绿色荧光蛋白标记的Hela细胞株的建立

目的构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系。方法PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性。结果PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80%Hela细胞内均可见绿色荧光。加入含G418的选择性培养基进行选择性培养,选择荧光较强的Hela细胞经有限稀释,持续筛选及克隆化培养,获得稳定表达绿色荧光的Hela细胞克隆,扩大培养并传至10代以上,将此细胞株命名为Hela-EGFP。激光共聚焦显微镜观察发现:在蓝光(-395nm)激发时,Hela-EGFP细胞绿色荧光激发波长为395nm,最大发射峰为509nm。结论Hela-EGFP细胞株具备稳定表达EGFP的能力,为实时可视化进行宫颈癌侵袭转移机制的研究奠定了基础。     

一种具有柔顺抓取功能的水下作业机械手

建立了机械手的三维模型,对机械手的工作原理和静力学特性进行研究,分析了运动部件之间的相对关系;机械手采用液压驱动方式,驱动力大、结构简单;机械手有三个手指,采用4个驱动元件实现对机械手11个自由度的驱动,三个手指之间的相对位置可根据抓取目标物的形状而改变,抓取物体时具有形状自适应能力.     

船舶轮机管系在建造时的监督管理要点

船舶管系是船舶设备中一类非常重要且复杂的设备，它关系着船舶的正常运行和安全性能。新船的建造和监造时，船舶管系是监造人员的一项重要工作，本文就监造新船时船舶管系的管理要点进行剖析。     

好望角（CAPESIZE）散货船市场调查

对干散货市场现状及走势进行了分析，并针对我国铁矿砂进口需求的逐年增长趋势，对CAPESIZE型散货船的国内货运需求做了估算。     

数值模拟技术在铸造工艺中的应用

以生产厂家的典型铸件为例，根据实际生产条件，对其铸造工艺进行数值模拟计算．通过对数值模拟结果的分析，预测可能产生的铸造缺陷，进而提出新的优化铸造工艺的措施，以得到较高质量的铸件．     

重载货车助力宁夏煤炭外运

<正>近年来,在兰州铁路局管内包兰线上的三等小站—大坝站,由于增运增收的成绩,令人刮目相看。这正得益于C80重载货车的投入使用。2010年1月1日到5月20日,这个站装运经大秦线运输的煤炭专列954列372万t,有力促进了     

太原至中卫（银川）铁路通车运营

2011年1月11日，太原至中卫（银川）铁路通车仪式在太原、绥德、银川三地举行，标志着历时4年8个月建设的又一区际铁路干线太原至中卫（银川）铁路胜利通车运营。     

青海省公路建设监理方、承包方与建设单位合同履约探析

通过近年青海省公路建设发包方、承包方、监理方之间相互法律关系,阐明了当事人的义务,对青海省发包方、监理方、承包方合同履约进行探析。     

湿管式水喷淋系统在海上高速客船上的应用

根据MSC.44(65)决议所规定的《高速船固定喷水系统的标准》要求,对需要配备固定喷水系统的海上高速客船的湿管式水喷淋系统进行讨论分析。以某单位设计建造的该系统为例,讨论了海上高速客船湿管式水喷淋系统的设备选型及工作流程,为同行业的设计建造提供参考。