Preparation of recombinant firefly luciferase by a simple and rapid expression and purification method and its application in bacterial detection

A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence.     

浅谈城市排水规划

城市排水规划是城市建设的重要组成部分,要编制出适应城市近期和远期的发展,符合国家节能减排的原则,能充分发挥排水设施作用,保证城市水环境不受污染的排水规划,需要掌握城市建设发展、城市现状、存在的问题等情况,并提出合理的解决对策。该文介绍了编制城市排水规划应注意的一些要点、雨水和污水规划方案制定的方法、近期改善城市环境的措施,为今后城市排水规划的制定提供了参考意见。     

纵横四大洋拖航六万里--"德意"轮拖带"基辅"号航母纪实

2000年5月15日,一艘悬挂五星红旗的拖船在北冰洋的纷飞大雪中悄然驶抵俄罗斯北方军港--摩尔曼斯克港.放眼望去,位于北极圈、环山而建的摩尔曼斯克军港,零星散布着几艘炮艇和小舰艇,周围的山峰白雪皑皑,一派肃杀的气氛.而在凛烈的寒风中,"基辅"号航空母舰这只庞然大物静静地靠在码头上,硕大的躯体上斑斑驳驳,满目疮痍,仿佛一头伤痕累累、奄奄一息的雄狮,在等候着命运的宣判……     

船级社的合并态势

在其它业务领域,如银行或航空领域,合并包括一系列的兼并或组合.对于船级社而言,要考虑的是各组织之间进行兼并或合并时,安全责任如何转移,因为部分组织是官方性质的,而另一些是属于半官方性质的.     

磴口黄河特大桥0号块空间应力分析研究

采用大型通用有限元软件MIADS FEA进行空间计算,以磴口黄河特大桥为工程实例进行研究。用三维有限单元法对连续梁桥0号块作分析,对施工中0号块在最大悬臂状态下和成桥阶段的应力作计算,计算出各阶段0号块的应力状态,为优化设计和改进施工方法提供依据。对运营节段0号块在最不利荷载组合作用下的应力作计算,计算出0号块的应力状态。     

自升式移动平台结构安全评估

现在,有许多海洋平台在从事海上油气田的勘探和开发,其中自升式移动平台扮演着重要的角色.我国目前有自升式移动平台30座,这些平台大多经历了较长的服役期,有些平台的结构已发生了一些变化.如何保证这些平台的安全,最大限度地发挥其结构潜能是工程界和理论界迫切需要解决的问题.     

搞好新建公路绿化 恢复自然生态平衡

结合哈同公路佳哈段的绿化谈公路绿化美化的作用和方法 ,总结经验并指出了不足 ,可供有关人员参考。     

迎接新世纪为社会经济发展再作新贡献

船舶工业是一项综合性工业,它是衡量一个国家综合国力的标志之一.船舶工业的强弱兴衰,不仅直接关系到海军国防建设,交通航运事业和海洋工程以及水产捕捞事业的发展,而且随着船舶工业的蓬勃发展,还能带动一大批机电工业和配套产品工业的发展,因此船舶工业在国民经济建设中,占有举足轻重的地位.     

DF11型机车柴油机静液压冷却系统故障分析与处理

针对近年采武汉铁路局DF11型机车静液压冷却系统发生故障,通过对故障信息收集,故障原因探究,摸索出判断、分析、处理系统故障的有效方法.     

高校非常规水资源设计方案简介

以天津市某高校对非常规水资源的利用进行介绍,通过对雨水利用量、杂用水量和生活污水回用量进行分析和计算,并以此为基础提出建议,可为高校的非常规水进一步有效利用提供思路。