微生物基因组测序策略

在复习近年来有关基因测序的文献基础上 ,综述了有关测序策略方面的进展。     

合生元对烧伤大鼠肠源性感染的影响

目的 探讨合生元治疗烧伤后肠源性感染的机制,为烧伤后肠源性感染的防治探求新途径。方法 动态检测大鼠体内的肠道示踪菌JM109易位率和血浆中LPS水平。结果 合生元治疗组大鼠体内JM109易位率以及血浆LPS水平明显低于烧伤对照组。结论 合生元能够快速补充肠道生理性厌氧菌,坚固肠粘膜外微生物屏障,阻止肠道条件致病菌和LPS经肠壁进入机体组织,对烧伤后肠源性感染有一定的预防和治疗作用。     

ANTIPROLIFERATIVE ACTIVITY OF HUMAN IFN-γ-EGF_3 FUSION PROTEIN ARE RELATED TO ITS EGF RECEPTOR COMPETITION

Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｇａｍｍａ（ＩＦＮ－γ）,ａｋｉｎｄｏｆｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃｃｙｔｏｋｉｎｅ,ｉｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｂａｓｅｄｏｎｍａｊｏｒａｎｔｉｇｅｎｉｃｄｉｆ－ｆｅｒｅｎｃｅ,ｉｔｉｓｍｏｒｅｐｏｔｅｎｔｉｎｉ...     

EXPRESSION OF HUMAN RECOMBINANT INTERLEUKIN-1 RECEPTOR ANTAGONIST (rhIL-1ra) IN E.COLI

ThisprojectissupportedbyChineseMedicalBoard(U.S.A)In1990,EisenbergisolatedacDNAfromthehumanmonocytelibrary,expressionofthecDNAinE.coltyieldedtheproteinthatcouldhinderIL--lbindingIL--lreceptor,hetermedtheproteininterleukin--1receptorantagonist(IL--lra)ti.23.IL--lraisauniquecytokinethatcanstronglybindthecellsurfacereceptorsofIL--Iwithoutinducinganydetectableintracellularresponses"'.SinceitisaneffectivecompetitiveinhibitorofIL--lbothinvitroandinvivot'3,IL--lraisausefultooltodetermineth…     

一种快速、简便的质粒DNA提取方法

一种快速、简便的质粒ＤＮＡ提取方法王建安，刘延娜，司华新，楚雍烈，范桂香（西安微生物学教研室西安７１００６１）质粒ＤＮＡ的提取是分子生物学最常用的技术，虽然方法颇多，但实用中费时不便，特别是不适用学生实验。在比较几种小量提取法的基础上，经反复实践，建...     

催化抗体的研究现状及展望

<正> 80年代后期。出现了一种新的生物技术工具催化抗体(Catalytic antibody)。它本质上是具有酶催化活性的免疫球蛋白,兼具抗体和酶两种特性,故又称之为抗体酶(Abzyme)。催化抗体问世虽仅短短5年,但很快引起许多科学家重视,认为它在生     

一种新的插入突变工具-TK-μM系统的组建和应用(摘要)

<正> Mu是细菌的一种噬菌体,因其能在细菌DNA内发生转座和随机插入到别的DNA中去,故近两年来倍受分子生物学者的重视。目前,把Mu经过基因操作后,已成功地作为导致DNA序列插入突变的工具应用于基因工程技术中。但其体积较大,使用受限。本文成功地对其进行了改造,经基因切割和拼接后,得到微小。Mu(称μM),其大小仅为3千硷基对(Kb),其基因组构成是(自左至右):一个对温度敏感的抑制基因;最低限量的、     

单纯疱疹病毒Ⅰ型DNA中BamHIC片断结构和功能的研究——Ⅰ.BamHI C片断的次级克隆和酶谱分析

运用DNA重组技术对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)DNA分子的BamHI C片断进行了次级克隆,建立了该基因片断中8个片断的无性繁殖系。同时利用核酸限制性内切酶的多酶解技术,对该片断作了酶谱分析。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV—1)基因突变株的生物学特性初步研究

应用病毒空斑滴定法及动物LD_(50)法对HSV-1基因插入突变株[HSV-1(RC)]的生物学特性进行了初步研究。发现HSV-1(RC)株在不同的6种细胞系上能够生长繁植,但在BHK-21、Hep-2细胞上较其亲代HSV-1(Δ305)及HSV-1(F)株生长缓慢,且空斑形成单位(pFU)数明显低于亲代株。动物LD_(50)实验结果HSV-1(F)株LD_(50)值为2.9×10~4pFU/0.1ml,而HSV-1(6305)及HSV-1(RC)LD_(50)值为0。实验结果提示:HSV-1基因组BamHI C片段插入突变处不是该病毒在一些细胞培养上生长所必需的基因片段,但对在某些细胞系上的生长仍具有影响作用。HSV-1的TK基因和BamHI C片段插入突变处则是病毒在动物整体上毒力强度的必需基因。在HSV-1基因组BamHI C片段处插入9.7kb大小的外源基因并不影响病毒在细胞上的组装和繁殖,但其毒力降低,建立的实用空斑滴定技术适用于病毒学研究,有推广应用价值。     

丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆和表达丙型肝炎病毒（HCV）1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物，采用巢式PCR法，从含HCV1bDY株全长eDNA的质粒HCV17中扩增出约480bp的目的片段，将其插入克隆载体pMD18-Tvector中，再亚克隆到原核表达载体pET-28a中；经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株，在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达；采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平。结果成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体，并得以表达。结论成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因，为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的Ns5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件。