构建及鉴定携带角蛋白启动子和人乳头瘤病毒16E6/E7基因的重组腺病毒

目的利用AdEasy系统构建携带人角蛋白启动子的人乳头瘤病毒-16(HPV-16)E6/E7基因重组腺病毒,并通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。方法应用PCR方法从含有HPV-16全基因序列的质粒上扩增E6/E7基因,构建pCDNA3.1(-)-K14-E6/E7-polA载体,扩增、酶切获得K14-E6/E7-polA片段插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack上,构建重组穿梭载体pAdTrack-K14-E6/E7-polA,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组得到腺病毒质粒pAd-K14-E6/E7-polA,经人胚肾293细胞包装后得到重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。氢化铯(CsCl)梯度离心纯化病毒,提取病毒再感染后的293细胞总RNA,通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。结果通过同源重组的方法构建了腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA载体,经酶切和测序鉴定该质粒构建成功。293细胞包装3d后观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,CsCl梯度离心纯化最终获得7.2×1010pfu/mL滴度的重组病毒;用该滴度病毒重新感染293细胞3d后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测E6/E7有表达。结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和E6/E7的重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。这将为进一步研究HPV-16E6/E7基因功能及利用基因治疗女性宫颈癌奠定了基础。     

基于构件面向体系结构的C4ISR系统设计方法

介绍了C4ISR体系结构描述和设计方法("3A"视图),描述了在其指导下使用结构分析法和面向对象分析法开发体系结构产品的过程,并比较了这两种方法的优缺点.在此基础上,提出基于构件面向体系结构的设计方法来解决系统的互操作和复用问题,给出了支持该方法的迭代开发过程,阐述了该方法与C4ISR体系结构设计方法的对应关系, 为开发可复用、易于互操作的C4ISR系统提供了一种可行的技术途径.     

基于可视化装置的柴油机喷雾燃烧过程试验研究

利用喷雾燃烧多功能动态可视化试验装置,获得了清晰直观的燃烧室内喷雾燃烧过程图片,分析研究了两种燃烧室对喷雾和燃烧过程的影响。结果表明:燃烧室内喷雾贯穿力比涡流和挤流强,喷雾以近似直线形式扩展到凹坑壁后,大部分随涡流方向扩展;火焰首先在靠缩口型燃烧室中心处出现,而圆柱型燃烧室则在靠凹坑上边缘处出现;缩口型燃烧室比圆柱型燃烧室燃烧结束得稍早,燃烧性能更好。     

构建“五位一体”思想政治工作体系

经济要发展，体制要转型，思想政治工作应当率先实现转型。笔者认为，转型不仅是动态、与时俱进的，更应该是系统完善、关注职工各方面需求的。只有建立一个集宣传引导机制、学习培训机制、考核激励机制、文化建设机制和人文关怀机制“五位一体”的思想政治工作体系，才能真正做到以文化人，以情感人，以理服人，以福励人，才能帮助职工顺利度过思想心理纠结期，才能保障和加快交通事业转型发展。     

华通又一超大型沥拌产品问世

中国超大型筑养路设备又添新丁。一种广泛适用于高等级公路、城市道路、机场、广场、货场、码头等大型建设工程沥青混凝土路面底层和面层混合料搅拌作业的高品位超大型搅拌机械——“华通牌”ABH5000型强制间歇式沥青混合料搅拌设备，日前在镇江华展华通路面机械有限公司问世。     

HX_D1型机车T型插拔头和高压穿墙套管烧损原因分析及解决措施

介绍了HXD1型机车高压T型插拔头结构型式和烧损故障现象,对T型插拔头和高压穿墙套管发生的几种烧损问题进行了原因分析,并提出了预防解决措施。     

自主品牌的悖论

<正>悖论(paradox)来自希腊语"para+dokein",词面直译是"多想一想"。悖论其实就是:在逻辑上可以推导出互相矛盾之结论,但表面上又能自圆其说的命题或理论体系。悖论的出现往往是因为人们对某些概念的理解认识不够深刻、正确所致。古今中外有不少著名的悖论,它们震撼了逻辑和数学的基础,激发了人们求知和精密     

析记名提单

本文围绕着一个问题展开——记名提单是否是物权凭证,承运人是否需要凭正本记名提单放货。该问题的现状是各国各地区立法不明确、司法实践不统一。     

营业性道路旅客运输安全影响因素探讨

以探讨营业性道路旅客运输安全的影响因素为目的,以成都市公路客运安全调查为基础,提出了客运安全生产的影响因素,并构造有向图明确了客运安全要素间的关系,最后阐述了有向图的基本含义并提出了进一步研究的建议。     

布尔归来 2012 EBR 1190RS

2009年10月15日,哈雷在发布第三季度业绩报告时,宣布在全球经济危机的困境下,哈雷将停止生产麾下的布尔(Buell)摩托车。2009年10月30日,布尔位于威斯康星州东特洛伊的工厂生产线上,推出了"闪电"Lightning XB12Scg,这是布尔创建26年来的第136923辆摩托车,也是布尔的最后一台摩托车。2009年12月18日,布尔将各个时期的12款代表车型捐赠给了巴伯摩托车运动博物馆,这意味着今后骑手们只能在博物馆瞻仰这些经典车型的风采了。布尔公司被哈雷雪藏,但是布尔公司的创始人,充满激情的艾力克·布尔,是无法被雪藏的。他重新组织了埃里克·布尔赛车公司(EBR)试图东山再起,2012年即将投放市场的1190RS,就是对哈雷雪藏布尔的最有力回击!