甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响

目的 研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用.方法 激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8 在Bel 7402细胞内的共定位;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与caspase-3、caspase-8的相互作用;RNA干扰(RNAi)技术封阻AFP表达,并用Western blotting检测RNAi干扰肝癌Bel 7402细胞内AFP表达的效果;用蛋白酶活性比色法检测AFP对肝癌细胞 caspase-3、caspase-8活性的影响;MTT法分析干扰AFP表达30 h后再给予TRAIL(2nmol/L)处理24 h,Bel 7402细胞的生长情况,并用荧光显微镜观察经TRAIL处理后肝癌细胞的凋亡状况.结果 共聚焦显微镜观察发现AFP、caspase-3、caspase-8主要表达于Bel 7402细胞的细胞质,发现AFP能与 caspase-3共定位于细胞质,但与caspase-8在细胞质的共定位可能性很小;Co IP技术研究发现AFP能与caspase-3结合,但不能与caspase-8结合;2nmol/L 剂量的TRAIL单独处理Bel 7402细胞并不能显著改变caspase-3活性,但能提升caspase-8活性,而用全反式维甲酸(ATRA)40 μmol/L加TRAIL(2nmol/L)处理时,则能提高Bel 7402细胞caspase-3活性;干扰AFP表达后,单独用TRAIL(2nmol/L)也能激活caspase-3,而干扰AFP表达前后对caspasE-8活性没有显著性改变;MTT分析发现, 2nmol/L剂量的TRAIL对Bel 7402细胞的生长并没有显著性抑制作用,但是干扰AFP表达后TRAIL(2nmol/L)能明显抑制Bel 7402细胞生长(抑制率为48.4%);荧光显微镜观察表明,干扰AFP表达后TRAIL(2nmol/L)能诱导Bel 7402细胞凋亡.结论 AFP选择性抑制caspasE-3活性是阻断人肝癌Bel 7402细胞内凋亡信息传递的重要机制,也是AFP抵抗TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的关键环节.     

装配式涵洞施工技术研究

依托云茂高速装配式管形涵洞与装配式箱形涵洞工程,从施工工艺流程、预制施工及构件运输与拼装3个方面阐述装配式涵洞施工工艺,从构件预制及构件安装两方面分析装配式涵洞施工技术难点,并针对各难点提出解决措施。最后,从进度、质量、安全、经济和局限等方面分析装配式涵洞与传统涵洞间的区别。     

库区水位变化条件下高速公路路基高边坡稳定性分析

针对库区水位升降过程中边坡稳定性研究问题,依托库区影响范围内某高速公路路基边坡工程实例,采用现场调研和数值仿真分析相结合的方法,重点分析了库水位上升和下降过程中边坡稳定系数的变化规律。结果表明：随着库水位上升或下降,边坡稳定系数均呈现出先降后升的特性,且存在最危险水位(为628 m),高度位置不受水位变化过程影响;水位降落比水位上升更容易引起边坡失稳,应重点关注。     

可调浆船舶主推进装置运动工况优化研究

将航行工况当作变量之一,分别建立了主推进装置耗油量最小和推力量大时的优化控制程序的数学模型,在对模型特性分析之后编制了有关参数的回归计算程序和模型求解程序,并应用于某装配了可调浆装置的消防船,表明软件具有一定的实用性。     

可调桨船舶主推进装置运行工况优化研究

将航行工况当作变量之一, 分别建立了主推进装置耗油量最小和推力最大时的优化控制程序的数学模型;在对模型特性分析之后编制了有关参数的回归计算程序和模型求解程序,并应用于某装配了可调桨装置的消防船,表明软件具有一定的实用性.     

水下爆破的危害与防范

通过对水介质特性及作用的分析,说明了水下爆破危害的严重性及水下爆破安全的重要性,进而通过对危害性的预测,提出对水下爆破施工中所产生危害的有效防范措施。     

农村公路建设与养护一体化管理初探

针对农村公路建设与养护一体化管理问题,做了简单的论述,提出了管理策略,共享给相关人员参考。从当前农村公路管理实际来说,存在以下问题:(1)重视建设忽略养护管理,施工单位技术设备和技术供给不足;(2)基层交通技术力量薄弱,建设质量管控力度弱;(3)脱贫攻坚和乡村发展对农村公路建设需求较大,建设资金供需矛盾突出;(4)养护技术力量薄弱,机械化水平不高等,难以保证公路建设以及养护工作的质量,因此需要加以完善和优化。现结合贵州创新推行公路建设与养护一体化模式实践,进行如下分析。