pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达

目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。     

高职院校航海类毕业生的海员从业倾向研究

文章分析了高职院校航海类毕业生海员从业倾向下降的影响因素,从加大经费投入、加强人才培养、优化职业环境等方面提出了相应的解决对策,以保障高级船员队伍建设。     

酸化油生物柴油碰壁试验研究

为研究酸化油生物柴油作为车用柴油机代用燃料的可行性,对高压容器内酸化油生物柴油的碰壁现象进行了试验研究,分析了碰壁距离和碰壁角度对酸化油生物柴油碰壁过程的影响。试验结果表明：酸化油生物柴油碰壁后油束形态与柴油相似,与柴油相比,酸化油生物柴油的扩散直径和卷吸高度略大;随碰壁入射角的增大,酸化油生物柴油雾注上游半径减小,下游半径增大,卷吸高度变化不大,近壁区油气卷吸运动加强;随着碰壁距离的增加,酸化油生物柴油喷雾体的扩散直径和卷吸高度有所减小,近壁区油气卷吸运动减弱。     

大挑臂预应力盖梁支架施工技术

肇花高速公路狮岭高架桥大挑臂预应力盖梁属于国内首次采用35m跨六车道大挑臂预应力盖梁应用于高速公路上,具有较大的施工技术难度.施工中采用下设门洞,钢管支墩,贝雷架主梁支架结构形式,克服了交通组织难度,减少了投入费用,保证了工程质量,确保了施工安全,为以后类似桥梁施工提供了指导性意见.     

刘家峡大桥主缆空隙率及索夹抗滑移试验研究

刘家峡大桥主桥为单跨536 m 的桁式加劲梁双索面悬索桥,单根主缆采用44股127根φ5．2 mm 镀锌高强钢丝,设计空隙率在索夹处取18％,在索夹外取20％,主缆索夹由2个半圆形铸钢结构通过高强度螺栓上下对接紧箍在主缆上,接缝处嵌填橡胶防水条。索夹的抗滑移性能是影响悬索桥主缆正常使用的一个主要因素。为了解该桥索夹抗滑移性能是否满足设计要求,在大桥主缆架设完紧缆后,在主缆上同时安装制动索夹、试验索夹以及推力千斤顶,利用千斤顶模拟索夹下滑力,对计算确定的最不利索夹进行顶推试验,测试索夹抗滑移摩阻系数和索夹内、外部空隙率。试验结果表明：实测索夹抗滑移摩阻系数为0．213,大于设计要求的0．15,满足设计要求;实测索夹内、外部空隙率分别为17．6％、18．4％,满足设计要求。     

线控转向系统对汽车操纵稳定性的影响

基于MATLAB/Simulink软件建立线控转向系统的动力学模型,分析线控转向系统关键部件——转向电机的转动惯量、阻尼系数、刚度等对汽车操纵稳定性的影响。合理设计线控转向系统转向电机的结构参数,可提高汽车的操纵稳定性。     

新近吹填超软土地基浅层加固技术卸载标准探讨

新近吹填超软土地基浅层加固对沉降控制要求不严格,因此,现有的卸载标准不完全适用于该类地基。鉴于此,通过理论方法建立了该类地基浅表层加固卸载标准的判别条件,并结合工程应用证实该判别条件是现有卸载标准的有效补充方法之一。     

电磁屏蔽舱门优化设计

介绍方舱的屏蔽原理和屏蔽效能的计算及测试方法,针对方舱舱门屏蔽效能设计问题进行分析,并对某电磁屏蔽方舱舱门进行了对比测试.     

浅谈山区高速公路空心薄壁高墩施工技术

本文通过对石柱高架桥空心薄壁墩施工特点、施工方案比选、施工工艺等方面进行了分析研究,着重论述了各施工平台设置的方案,并对空心薄壁墩的模板施工、测量控制、砼施工质量控制等质量控制措施进行了总结,为今后高墩施工提供技术支持.     

浅析海员的心理素质

海员心理素质是海员综合素质的重要组成部分。文章分析了海员心理素质的重要性,结合职业特点指出了对海员心理素质的要求,并从个人层面、家庭层面、学校层面和公司层面入手阐明了提高海员心理素质的措施。