pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达

目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。     

新媒体环境下民办高职院校新闻宣传工作的开展

新闻宣传工作在民办高职院校的发展和青年学生的培养中起着重要的作用。新媒体时代的到来对民办高职院校的新闻宣传工作既是一种挑战,也是一种机遇。文中结合笔者的工作体验,从不同角度探讨在新媒体环境下民办高职院校如何深入开展新闻宣传工作,使其发挥应有的效应,为学校的发展做出贡献。     

高校青年干部到地方挂职工作的实践与研究

文章阐述了高校青年干部到地方挂职工作的意义,指出挂职工作中存在的问题,并提出了相应的研究对策,对今后进一步完善高校青年干部到地方挂职工作具有一定的指导意义。     

基于认知负荷理论的二维教学动画设计

文章阐述了二维教学动画的内涵及其特点,从认知负荷的三种角度分析了影响二维教学动画中的认知负荷影响因素,提出了有效控制二维教学动画的认知负荷的设计原则,并在此基础上进行了案例分析,为二维教学动画的设计提供了参考。     

AC-20多级嵌挤级配优化设计与性能研究

结合在实际工程中应用的AC-20级配的设计过程,对贝雷法和VCAAC的矿料设计和检验方法进行了具体介绍。用贝雷法选定满足骨架密实结构的初试级配,进而用VCAAC方法对压实成型试件进行最终检验,结果发现:该初试级配的未达到骨架密实结构,需要根据VCAAC方法进行调整才能满足骨架密实结构的要求。实例说明该检验方法简便、灵活,且调整后设计级配的高温稳定性、水稳定性以及抗水渗透性能均很好。     

粗集料棱角性对水泥稳定碎石强度的影响

为研究粗集料棱角性对水泥稳定碎石强度的影响,基于数字图像处理技术,采用等效椭圆法评价粗集料的棱角性对石灰岩碎石与破碎鹅卵石的棱角性进行了对比分析,且对不同棱角性集料的工况组合水泥稳定碎石的强度性能进行了室内正交试验.研究结果表明:不考虑水泥因素的影响,无侧限抗压强度与棱角性正性相关;替换率相同条件下,19.0～26.5...     

基于外部效益的农村公路服务设施规划设计研究

为了改善我国农村公路服务设施建设相对滞后的状况,支撑农村公路从规模速度型向质量效益型转变,在系统梳理国内外公路服务设施研究成果及我国农村公路服务设施存在的主要问题的基础上,通过对比其他交通项目外部效益及服务设施研究成果,对农村公路服务设施外部效益的内涵作出定义,提出经济效益、生态效益及社会效益3种外部效益类型.基于外部...     

岘港市某丁字路口立交改造选型探讨

文章以岘港市某丁字路口立交改造选型为实例,探讨了分期修建的平交改立交选型的主要影响因素,并从近远期交通需求、工程造价、占地面积、景观协调性等方面对三种不同立交型式进行方案比选,推荐出符合分期修建要求的立交改造方案,可为类似项目提供借鉴。     

高速公路改扩建工程交通安全设施设计探讨

文章以柳南高速公路改扩建工程为例,分析了高速公路改扩建期间交通安全设施设置的基本要求,并针对标志、标线和护栏对安全设施的设计进行了探讨,提出了具体的设置方案。     

电缆隧道下穿城市桥梁结构数值模拟

以重庆市江北城变电站至五里店站电缆隧道下穿对山立交桥梁工程为背景,利用有限元软件Midas-GTS模拟电缆隧道开挖过程,分析电缆隧道开挖对市政桥梁工程运营的安全性和可行性,并提出电缆隧道施工中应该注意的问题,其对以后类似工程具有良好的参考价值和指导意义。