pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达

目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。     

2型糖尿病患者血同型半胱氨酸与缺血性脑卒中关系的病例对照研究

目的 探讨2型糖尿病患者血同型半胱氨酸(Hcy)和缺血性脑卒中的关系.方法 纳入2型糖尿病患者1 49例,其中缺血性脑卒中患者65例(病例组),无脑卒中患者84例(对照组),在入院第2天采空腹静脉血检测Hcy、糖化血红蛋白(HbAlc)、肾功、血脂等指标.对比两组临床资料,通过病例对照研究判断Hcy与缺血性脑卒中有无关联及关联程度.结果 病例组和对照组相比,Hcy显著升高[(24.4±10.1)μmol/L vs.(16.3±7.5)μ mol/L,P＜0.05];高Hcy血症在病例组和对照组暴露率差异显著(x2=18.73,P＜0.05),调整年龄的影响后OR=4.82,95 ％CI:2.21～11.45;采用四分位法对Hcy水平进行分级,OR值逐级递增:5.62、12.96、14.73,线性回归分量(x2=24.44,P＜0.01),发生缺血性脑卒中的概率随Hcy水平的增高而增加.结论 同型半胱氨酸是2型糖尿病患者缺血性脑卒中的危险因素,其缺血性脑卒中的发生率随血同型半胱氨酸水平的增高而增加.     

高校青年干部到地方挂职工作的实践与研究

文章阐述了高校青年干部到地方挂职工作的意义,指出挂职工作中存在的问题,并提出了相应的研究对策,对今后进一步完善高校青年干部到地方挂职工作具有一定的指导意义。     

基于认知负荷理论的二维教学动画设计

文章阐述了二维教学动画的内涵及其特点,从认知负荷的三种角度分析了影响二维教学动画中的认知负荷影响因素,提出了有效控制二维教学动画的认知负荷的设计原则,并在此基础上进行了案例分析,为二维教学动画的设计提供了参考。     

岘港市某丁字路口立交改造选型探讨

文章以岘港市某丁字路口立交改造选型为实例,探讨了分期修建的平交改立交选型的主要影响因素,并从近远期交通需求、工程造价、占地面积、景观协调性等方面对三种不同立交型式进行方案比选,推荐出符合分期修建要求的立交改造方案,可为类似项目提供借鉴。     

挖孔墙结构在长洲水利枢纽三线四线船闸工程中的应用

当在原有船闸基础上新建二线甚至多线船闸时,受到场地条件制约,许多基坑已无法采用传统放坡开挖的形式,需采取基坑支护。文章以长洲三线四线船闸上游导航墙结构为例,介绍了一种新型的导航墙结构——挖孔墙结构的设计思路和计算方法,并提出了该结构应用于船闸工程的挡土防漏措施。该结构成功将基坑支护与导航墙结构结合,可为今后类似工程提供参考。     

山区二级公路接入口风险评价

山区二级公路受地形影响较大,路侧危险,线形设计指标较低,道路线形设计的协调性相对较差。由于二级公路的交通管制力度弱,当地居民随意在道路主线上搭建接入口,这些接入口严重影响了道路的服务水平和安全状况。从道路平面、纵断面、横断面及其他要素选取指标分析山区二级公路接入口的安全状况,应用层次分析法对接入口进行风险评价,针对评价结果采取相应的安全改善对策,并依托云南施孟公路,用层次分析模型对实际接入口进行安全评价。     

重庆两江大桥天梭桥塔设计方案研究

塔、梁、索是斜拉桥结构重要组成部分,其中,桥塔更是彰显桥梁个性和特点的重要部位。针对普通桥塔形式的不足,通过对重庆两江大桥天梭桥塔设计方案的研究,提出适应于环境的新型桥塔设计方法。     

钢箱梁桥面铺装体系结构优化研究

采用有限元分析的结构优化设计方法对钢箱梁桥面铺装体系进行整体优化研究。建立钢桥面铺装体系的有限元模型,选择包括钢板厚度、梯形加劲肋刚度、横隔板间距、铺装厚度等结构参数作为设计变量,建立铺装最大拉应力、铺装与钢板层间最大剪应力、加劲肋挠跨比、钢桥面板最大拉应力等指标的约束条件,采用零阶方法进行优化计算。结果表明,优化设计可以节省材料,降低造价。通过减小梯形加劲肋间距和横隔板间距,增大桥面板厚度和梯形加劲肋高度,可改善铺装的受力状况。     

关于车辆燃油箱取油方案的技术改进

针对目前车辆燃油箱在取油时,采用连接法兰的方案对燃油箱本体造产生了严重的焊接变形,笔者通过分析焊接法兰方案找出不足,提出了新的改进方案。