pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达

目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。     

关于骨干校建设对推进高职内涵发展的思考

文中对国家骨干高职院校建设在推进高职内涵发展方面存在的问题进行了梳理,如中观层面指导与监管的不健全、建设环境不够完善、建设院校自身存在的问题等。在此基础上,提出以骨干校为契机建设高职院校内涵建设的若干策略,包括加强顶层设计,处理继承与创新的关系、重点与非重点的关系,解决好人才队伍问题、树立强大的文化自信等。     

校企合作人才培养模式的中德比较

德国在校企合作培养人才方面举世闻名。其双元制的校企合作在世界职业教育史上堪称典范。中国虽然学习借鉴德国双元制校企合作模式,但对比中德校企合作运行机制,发现中国校企合作存在诸多问题。文中认为需要加强职业教育法制建设、强化政府统筹管理职能、发挥各类商会的协调服务职能,提高中国职业教育校企合作人才培养模式质量和效益。     

中低速磁浮车辆-桥梁耦合系统动力性能试验

为探究中低速磁浮车辆-桥梁耦合系统的振动特性,对其在上海临港中低速磁浮试验基地开展了现场动力学试验,研究了车速和桥梁结构形式对耦合系统动力响应的影响;试验车辆采用(悬挂)中置式悬浮架,试验桥梁为25 m混凝土简支梁和25 m钢结构简支梁;为明确2种桥梁的固有振动特性,对其进行了模态测试;提取了不同工况下车辆-桥梁耦合系...     

巴东红层路堑边坡失稳机理分析及治理措施

巴东组红层是中国红层的典型代表。以湖北宜巴高速公路红层路堑边坡为例,采用定性分析与定量分析相结合的方法,对其失稳机理进行分析。结果表明:降雨作用是诱发滑坡的主要原因,并对路堑边坡治理,提出以抗滑挡墙与锚杆框架梁等相结合的加固措施,达到了较好的治理效果。     

面层模量对沥青路面结构受力特性影响分析

面层模量是沥青路面结构设计的重要参数。为分析面层模量对沥青路面结构受力特性的影响,采用有限元软件计算各面层模量变化、模量比对典型半刚性基层沥青路面结构层底拉应变、面层内部剪应力、基层层底拉应力和土基顶压应变等力学特性的影响。分析结果表明:各面层模量对沥青路面结构的受力有显著影响,路面结构设计时应综合考虑选择各面层模量及面层之间模量比。     

非线性M—C准则下的大断面坦三心圆隧道塌方的上限分析

塌方是隧道施工过程中的重大安全事故,不仅造成施工中断、工期延误,还可能导致施工机械的损坏,严重者造成安全事故,给现场施工造成巨大损失。所以,为了保证隧道工程现场的施工安全,以免造成生命财产损失,对隧道施工过程中塌方现象进行研究和分析具有重要的经济意义和安全意义。采用极限分析上限理论,基于非线性Mohr-Coulomb破坏准则,对坦三心圆深埋隧道的塌落机制进行理论计算,对隧道的各参数对塌方的影响进行分析,为实际工程的设计和施工提供参考。     

柴油机微粒捕集器被动再生平衡研究

建立了柴油机微粒捕集器（DPF）的三维仿真模型,并验证了模型的准确性。模拟计算了DPF连续被动再生过程中 m （NO2）/m （Soot ）比例、排气温度及450℃时 O2浓度对再生平衡的影响。结果表明：排气中m（NO2）/m（Soot）比例为5时再生达到平衡,比例越高越有利于去除微粒物;排气温度越高参与再生反应的O2越多,越有利于DPF再生达到平衡;排气温度为450℃及O2浓度为5％时达到平衡,其浓度越高则再生速率越高。     

复杂城区建筑偏压连拱隧道合理开挖顺序研究

重庆渝中连接隧道位于重庆市最复杂的城区,隧道沿线高楼林立、管网密集,上跨轨道交通6号线,下穿轨道交通1号线小什字车站。该隧道设计、施工、管理难度极大,施工控制性节点环节多。选取有代表性的施工控制性节点———侧穿华夏银行段作为研究对象,通过分析隧道在不同开挖顺序对中隔墙偏移情况的影响,确认该隧道先开挖右洞后再开挖左洞是较优的开挖方式。此外,还对建筑偏压情况下隧道的合理开挖的机理进行分析,研究结果可为复杂城区类似隧道的设计、施工提供借鉴。     

冻融腐蚀对沥青混凝土疲劳性能的影响

通过模拟北方地区季节温差规律,针对3种不同级配的沥青混凝土,在清水和氯化钠饱和溶液中,进行冻融条件下沥青混凝土疲劳性能研究;分析疲劳破坏的作用机理,确定影响沥青路面疲劳性能的主要因素;综合评价级配、盐分腐蚀对疲劳性能的影响,为提高沥青路面的使用年限和耐久性提供理论依据.试验结果表明,在-18 ～60℃冻融循环作用下,随着冻融次数的增加,沥青混凝土疲劳寿命总体逐渐下降;在相同冻融条件下,3种不同级配的沥青混凝土疲劳寿命大小顺序为:AC-13、AC-16、AC-20;2种不同溶液中的沥青混凝土疲劳寿命,清水中的大于氯化钠饱和溶液中的.