GFP重组腺相关病毒报告病毒的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组腺相关病毒载体和报告病毒,并观察其在真核细胞的表达。方法采用DNA重组技术将GFP基因片段亚克隆到pss HGCMV载体的EcoRⅠ和BamHⅠ位点,构建表达GFP重组腺相关病毒载体pss HGCMV-GFP。以此载体转染143细胞进行GFP重组腺相关病毒包装,产生重组报告病毒颗粒并作纯化。用地高辛标记的CMV polyA片段作为探针,采用斑点杂交方法检测重组病毒的物理滴度。采用氯化钙法体外转染培养的NI H3T3细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察其在细胞中的表达。结果成功构建了GFP重组腺相关病毒载体和报告病毒—VssCMV-GFP,所获病毒的滴度为3.16×1012病毒颗粒/mL。重组腺相关病毒VssCMV-GFP感染NI H3T3细胞后48h开始出现绿色荧光,并逐渐增强,至120h荧光更加集中且很强。结论VssCMV-GFP对真核细胞具有感染能力,并且GFP可以在活细胞内有效表达,提示该重组腺相关病毒可应用于介导基因转移真核细胞进行基因治疗。     

β淀粉样前体蛋白裂解酶特异性小干扰RNA真核表达载体的构建和鉴定

目的构建β淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)特异性小干扰RNA真核表达载体。方法用PCR扩增BACE特异性小干扰RNA,转入带有增强型绿荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pUC19质粒,再将重组基因片段导入逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,通过限制性酶切对该重组表达载体进行鉴定。结果成功构建了BACE真核表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE。结论pLXSN/EGFP-U6-siBACE载体的成功构建对进一步利用基因干扰技术治疗阿尔茨海默病的研究奠定了重要的基础。     

路面半刚性基层回弹弯沉发展的试验分析

通过路面弹性层状体系理论及基层表面回弹位移分析，对铺筑后水泥稳定砂砾基层早期表面弯沉进行连续实测并加以数值概率统计，描绘半刚性基层表面初期弯沉变化曲线；结合道路各结构层厚度及弹性模量，由弯沉系数诺谟图计算基层的回弹模量值，并得出模量发展变化非线性回归公式；再根据不同水泥剂量基层试验段测试结果。采用指数函数回归拟合基层材料回弹模量随不同龄期和剂量的增长变化规律，以用作评估和检测路面结构层施工质量技术控制指标。     

海-冰-气无人冰站极地工作环境下的结构特性研究

本文提出一套海-冰-气无人冰站系统,其能对北冰洋浮冰区海洋-海冰-大气三界面进行长期连续观测,观测内容可为北极海冰快速变化机制的研究和冰区船舶航行保障提供重要支撑.介绍了海-冰-气无人冰站的系统设计和结构设计,分析了无人冰站海洋工况的稳定性,利用有限元分析软件ABAQUS对无人冰站的极区抗风能力进行了仿真与分析,研究了无人冰站结构的受力情况,为其结构设计提供了依据.设计并研发的三套无人冰站系统分别于2018年、2019年、2020年在北冰洋中央区被成功布放并取得了良好的观测效果,验证了无人冰站系统的适用性和可靠性.     

政协视察摆渡巴士

2010年12月15日下午，市政协主席贡培兴一行视察公交，了解“大力发展公共交通”重点提案落实情况，副市长吴建选等市领导、市交通运输局局长顾韬、市交通产业集团董事局主席薛军陪同视察，市公交董事长张保国、总经理陈目富向视察团一行汇报了公交优先发展三年来的建设情况，     

轮轨异常磨耗成因分析

南京地铁1号线开通初期轮轨出现异常磨耗。为此,对轮轨产生异常磨耗的原因进行初步分析,并提出初步预防、整治建议。     

负极板浸硼酸液的控制及硼酸池的改进

此文分析了负极板浸硼酸的作用机理,介绍了浸不同温度硼酸液对负极板氧化铅的影响和补加硼酸量的试验方法,以及针对不锈钢硼酸池存在的铁含量较高等问题进行优化改进的情况。     

感受亲情

在拥有生命的日子里，人们有无数个追求。高高兴兴与家人过个团圆年，是许多中国人最大的快乐和愿望。每当万家灯火、迎春的鞭炮炸响时，坐在其乐融融的家里，被人世间最真挚的亲情浸润着，一种幸福的感觉油然而生。在这种亲情的包裹中，任何物质的东西都显得那么微不足道。     

三跨钢箱连续梁人行桥人致振动舒适性分析与减振控制

人行桥跨度的增加以及轻质高强材料的广泛应用，使得结构基频不断降低，进而带来了较为显著的人致桥梁振动舒适性问题。现基于人致振动理论，分析了行人荷载的作用特性和国内外规范对行人舒适度评价方法的异同，并采用有限元仿真计算，分析了高密度人群下的人致振动响应，比较了三种不同的梁高方案与其产生的人致振动效应，以及采取减振控制后的效果。结果表明，在钢箱梁人行桥结构人致振动性能保证的前提下，基于多组TMD的振动控制措施具有良好的成本控制可行性。     

闲侃马5

无论从哪个角度来说，马5（严格地讲应该称Mazda5，但是既然进口到中国，就入乡随俗吧，叫“马5”亲切上口）都可以算得上是一款不错的城市家用型MPV，因为它把MPV的特性演绎得十分清晰，与此同时还为紧凑型MPV设计理念带来了新的内容。此外，马5的“小伎俩”也足以让人“侃资”大增，足可小过一把“侃瘾”——