通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

传统村镇旅游规划与开发模式探讨——以黟县西递古村落为例

传统村镇旅游发展存在着旅游过程生活化与村镇设施功能实用性、景区面积有限性与旅游者人数增长、传统村镇景区面积局限性与旅游者人数增长等之间的矛盾。结合西递古村落实际，认为传统村镇旅游地在发展过程中应坚持“修旧如旧”的原则，对少部分村落内居民进行迁居，同时坚持景区分区、建筑分类、游览分线、服务建区等规划与开发构想，考虑资源本体特征和游客需求等要素，合理开发。     

水飞蓟宾对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用及其机制

目的研究水飞蓟宾(Silibinin,SB)在体外对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用及其相关机制。方法采用MTT法观察不同浓度SB对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察细胞形态变化;RT-PCR检测凋亡抑制因子Survivin的mRNA表达变化。结果MTT检测发现:随着SB浓度增加和作用时间延长,对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用增强,且各组间比较均有显著性差异(P<0.01),并呈时间-剂量依赖关系;倒置显微镜发现应用SB干预后,5637细胞体积缩小,变形,胞浆浓缩,核固缩深染;人膀胱癌细胞株5637中Survivin的mRNA表达随着SB浓度增加和时间延长相应下降。结论SB可抑制人膀胱癌细胞株5637的增殖;并下调凋亡抑制因子Survivin的mRNA表达。     

机场应急救援系统软件架构设计

传统的机场应急救援开展方式暴露出很多缺陷，如何利用计算机信息化技术提高机场应急救援工作的效率，减少突发事件对机场正常运营的影响，降低救援成本具有重要的实际意义。基于J2EE体系结构。提出了集成Struts和Hibernate框架的机场应急救援系统架构模型，并对系统功能模块划分和具体的业务流程进行了分析。     

基于多元回归的司机驾驶行为对油耗的影响

为量化司机驾驶行为对油耗的影响,根据实车运行数据,提取整车行驶数据中有关驾驶行为的特征参数,基于多元回归分析法,得到与整车油耗相关性较强的显著影响特征参数,建立司机驾驶行为模型,并对司机驾驶行为模型与油耗的强相关性进行验证。选取多个整车运行数据,通过模型计算得到油耗与实际油耗的误差在10%以内,验证了所建模型的精确性。该研究可为司机驾驶行为评价提供参考。     

城市对外交通枢纽交通分布预测

交通枢纽是道路网络的重要节点，其对道路网络上交通影响不能忽略．文中探讨了无现状OD情形下的各种类型交通枢纽分布预测问题,把运输费用（时间）最小作为目标函数，以交通小区发生量和交通枢纽容量为约束，建立了线性规划预测模型，并对交通小区与枢纽间的特定联系在分布预测中如何考虑进行了探论．实例研究证明该模型具有实用性。     

永久性路面综述

介绍了永久性路面的产生背景、路面设计原理和路面设计方法,希望以此来更新我国沥青路面设计观念,控制路面结构的早期破坏,降低筑路成本。     

八仙岩小净距隧道施工围岩稳定分析

介绍了八仙岩隧道现场监控量测方法，分析了八仙岩隧道各种结构型式地段典型断面施工中的围岩稳定性，对围岩变形和应力的分布特征进行了探讨．     

我国转体斜拉桥发展综述

桥梁在跨越交通繁忙的既有线路时,采用转体法施工具有显著的优越性。斜拉桥由于结构上的优点及其美观的造型,在城市中常作为跨既有线路桥梁的首选桥型。为了解我国转体斜拉桥的发展状态与趋势,对我国已建、在建的转体斜拉桥进行调研,阐述了我国转体斜拉桥的发展历程。在此基础上,对转体斜拉桥主梁、主塔结构形式及特点、斜拉索构造与布置形式、转体方式进行对比分析,归纳出我国转体斜拉桥的发展特点。同时对转体施工中的转动钢球铰、转动系统以及转体稳定性控制等关键技术进行总结,为今后我国转体斜拉桥的设计与施工提供参考。     

世界自动化集装箱码头发展现状及启示

<正>随着世界集装箱海运量不断增长和集装箱船舶日趋大型化(特别是3E级18 000 TEU船舶的投入使用),集装箱接卸的稳定高效、节能环保和低成本成为港口经营者关注的重点。自动化集装箱码头在降低码头人力成本、提高港口通过能力、降低装卸作业能耗、提升港口品牌形象等方面发挥重要作用,是未来港口发展的必然趋势。