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论述风积沙路基施工工艺及质量控制措施 总被引:1,自引:1,他引:0
风积沙路基施工很复杂,必须严格按照风积沙路基施工工艺进行路基的填筑,并在施工中可能出现的问题,采取合理有效方案去解决,确保风积沙路基的施工质量并保证工程施工的进度要求。为此,在这里对风积沙填筑路基的施工工艺及其质量控制措施进行了分析。 相似文献
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目的 从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR(RtPCR)反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量.方法 将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠β-actin mRNA的RtPCR扩增.通过扩增曲线和熔解曲线考察反应的稳定性,以梯度模板拟合标准曲线获得反应的扩增效率,其线性相关程度反映模板量是否合适.另外,构建大鼠降植烷诱导的关节炎(pristane-induced arthritis, PIA)模型,采用选定的反应体系,分别对模型组和正常组大鼠脾脏TNF-α mRNA进行扩增,通过TNF-α的相对表达趋势反映小体积扩增的可靠性.结果 在大鼠β-actin mRNA的RtPCR扩增中,10、15、20μL 3个体积组均能特异稳定地进行扩增,并保证高扩增效率.而且每个体积组中的模板梯度表现出很好的线性相关趋势.同时选用10μL和20μL反应体积、0.2μL模板对关节炎大鼠脾脏进行TNF-α mRNA扩增,结果一致表现出了预期的显著性上调.结论 实验证实10μL、15μL等小反应体积应用于RtPCR扩增中是可行的,具有较好的稳定性和可靠性,同时0.1~0.4μL cDNA模板在3种体系的合适模板范围内.这种较小的PCR反应体积,不仅节省了试剂和实验材料,对一些来之不易的临床标本尤为重要,也利于高通量大规模的RtPCR检测的实现. 相似文献
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目的 探讨高压氧治疗对人体血液淋巴细胞DNA氧化损伤的影响。方法 16名健康男性志愿者随机分为甲,乙两组,均属于HBO(0.25MPa)治疗环境中,每天暴露20分钟3次,中间吸空气分钟,共3天。甲组单纯HBO处理,乙组在HBO暴露前三天开始静脉注射维生素C1g,每日1次。分别于第一天HBO暴露前和暴露后即刻,12小时,24小时,第2天和第3天HBO暴露前和暴露后即刻采集静脉血样,经单细胞凝胶电泳分 相似文献
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目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取rno-miR-15b、rno-miR-16、rno-miR-195、rno-miR-497作为研究对象,分别用茎环引物和试剂公司提供的试剂盒方法反转录总RNA,并应用实时定量PCR方法检测这些miRNAs的表达量。提取人血浆中总RNA,用上述两种RT-qPCR方法实时定量检测has-miR-16的表达量。结果两种方法检测这些miRNAs表达量,在大鼠21d和42d这两个时间点其表达量变化趋势相同,都呈现增高的趋势,这与我们前期Solexa测序结果相同。在血浆中的结果显示,其中茎环引物反转录方法灵敏度相对较高。结论茎环引物法在少量几个重要的miRNAs检测中具有优势,而试剂盒方法适用于大量miRNAs的筛查。 相似文献
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目的检测G蛋白偶联的内整流钾通道(G protein-coupled inwardly rectifying potassium channels,GIRK)在哮喘模型中的表达改变,并寻找调节其表达变化的因素。方法用卵清蛋白和铝佐剂致敏E3大鼠14d后,用卵清蛋白进行攻击以诱导哮喘模型,用磷酸盐缓冲液致敏并攻击的大鼠作为对照,通过观察肺组织病变、总IgE水平的改变等手段评价哮喘模型。用RT-PCR检测GIRK亚基1~4的mRNA水平,用Western blot等手段检测大鼠肺组织中GIRK1和GIRK3的蛋白水平,并用免疫组化确定肺组织中GIRK表达的解剖部位。根据免疫组化的结果,选用A549细胞株作为模型,用IL-4刺激,用PCR、Western blot等手段检测IL-4对GIRK表达的影响。结果与对照组相比,哮喘模型组肺组织中GIRK的mRNA水平下降,哮喘模型组肺组织中GIRK蛋白水平也下降。免疫组化结果显示,GIRK在大鼠主要表达于气道上皮。随IL-4浓度的升高,在A549细胞中GIRK的所有的亚基的表达均呈剂量依赖性下降趋势;选择50ng/mL IL-4刺激A549细胞,GIRK的所有的亚基的表达均呈刺激时间依赖性的下降。结论在E3大鼠哮喘模型中,IL-4下调气道上皮中GIRK的表达。 相似文献
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目的 研究中国男性群体中D-氨基酸氧化酶激活剂(DAOA)基因多态性与精神分裂症的相关性.方法 采用等位基因特性PCR方法对272例男性精神分裂症患者和206例对照DAOA基因区域的3个单核苷酸多态性位点(SNP:rs778294,rs778293和rs3918342)进行基因分型和统计分析.结果 DAOA基因区域rs778294的一个等位基因(C)与精神分裂症显著相关(P=0.03).由3个SNP构建的单倍型分析表明,单倍型CAT在病例-对照组中表现出显著的差异.结论 在中国汉族男性群体中,DAOA基因可能是精神分裂症的一个易感基因,NMDA受体途径可能是发生精神分裂症的一个重要潜在因素. 相似文献
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目的 探讨佐剂降植烷诱导自噬增强的确切机制。方法 构建降植烷刺激的大鼠巨噬细胞系模型;Western blotting检测细胞模型能量代谢分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及内质网应激通路真核起始因子2α(eIF2α)和肌醇依赖酶1α(IRE1α)的表达与活化,及转录因子EB(TFEB)的表达及入核情况;采用二硫苏糖醇(DTT)、4-苯基丁酸(4-PBA)调控细胞内质网应激水平并观察对mTOR表达和细胞自噬的影响。结果 降植烷刺激的NR8383细胞模型中,eIF2α在刺激0.5 h活化,mTOR表达在刺激后1、3 h较对照组(0 h)显著降低,AMPK及IRE1α无明显变化。降植烷刺激的NR8383细胞模型的mTOR表达下调,在4-PBA干预时表达回升,而增强的LC3-II表达受到抑制;在DTT干预细胞模型时,mTOR表达则进一步下调,同时LC3-II表达则更高。降植烷诱导细胞的TFEB表达升高并活化入核。结论 降植烷可能通过诱导内质网应激实现巨噬细胞自噬增强。 相似文献