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Fas靶向RNA干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定 总被引:6,自引:2,他引:6
目的 构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础。方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6 siFas。脂质体法将pU6 siFas导入P815 细胞,免疫组化法检测对P815 细胞Fas表达的抑制情况。结果 所构建的载体pU6 siFas能够干扰P815细胞中Fas的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G 418 筛选稳定转化的细胞株。结论 成功构建了抑制小鼠Fas表达的RNA干扰质粒载体。 相似文献
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树突状细胞介导的T淋巴细胞对肝癌细胞的特异性杀伤效应 总被引:4,自引:0,他引:4
目的通过体外诱导高效特异的抗肝癌细胞系免疫反应,制备一种以树突状细胞(DC)为基础的肝癌疫苗。方法分离人外周血单核细胞,经IL4和GMCSF联合刺激诱导DC分化。培养第4天,DC用人肝癌细胞系SMMC7721的冻融抗原致敏。培养第7天,将肝癌冻融抗原致敏的DC和未经肝癌冻融抗原致敏的DC分别与T淋巴细胞混合培养24h作为效应细胞,以人SMMC7721肝癌细胞、MCF7乳腺癌细胞和PC3前列腺癌细胞作为靶细胞,用MTT法检测细胞毒活性。结果经肝癌冻融抗原致敏的DC对SMMC7721细胞有高效而特异的杀伤活性,对其他肿瘤细胞系也有一定的杀伤活性,但无明显特异性;未经肝癌冻融抗原致敏的DC对3种肿瘤细胞系均有一定的杀伤活性,但无明显特异性;各组效应细胞对靶细胞的杀伤率随效靶比(EC/TC)的升高而增强。结论以肝癌细胞冻融抗原冲击致敏的DC刺激T淋巴细胞增殖在体外可诱导产生高效特异性的抗肝癌免疫反应,为肝癌的主动特异性免疫治疗提供了可靠的理论依据。 相似文献
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为研究下丘脑神经细胞衰老发展的规律,采用分散细胞培养法,以新生大鼠下丘脑细胞的胞体平均直径、突起长度、数目及电镜下所见的结构变化作为观察指标.把细胞培养期分为静止期、生长期、成熟期和衰老期四个阶段。其中第1周至第6周是培养细胞的主要生长阶段。这期间,细胞形态丰满,突起生长活跃,网络分枝丰富。电镜观察表明培养细胞在3周左右,各种细胞器发育渐趋成熟,并有突触样结构出现。第6周后,突起出现萎缩僵硬,常有串珠样变性,同时胞体进行性增大,线粒体肿胀变性,常有颗粒空泡及电子致密斑块出现,这时细胞进入衰老期。这种分期也同样适于培养的皮层及海马细胞的发育和衰老发展的规律。 相似文献
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T. X. Mei R. M. Goodall 《Vehicle System Dynamics: International Journal of Vehicle Mechanics and Mobility》2000,34(1):25-41
This paper presents the development of a modal control strategy for the active steering of solid axle railway vehicles and reveals benefits of actively stabilising the wheelsets of a railway vehicle. A modal decomposition is applied to a 2-axle railway vehicle to de-couple its body lateral and yaw motions and hence to allow more detailed analysis of the vehicle behaviour and more robust design of active controllers. Independent controllers for the two motions are developed based on the two de-coupled modes. Parameter variations such as creep coefficients and wheelset conicity are taken into account in the design process to guarantee a robust design. The study shows that, compared to a passive vehicle, the vehicles with actively steered wheelsets not only perform much better on a curved track, but also improve the ride quality on straight track. Computer simulations are used in the study to verify the development of the controllers and assess the system performance with the control scheme proposed. 相似文献
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