构建及鉴定携带角蛋白启动子和人乳头瘤病毒16E6/E7基因的重组腺病毒

目的利用AdEasy系统构建携带人角蛋白启动子的人乳头瘤病毒-16(HPV-16)E6/E7基因重组腺病毒,并通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。方法应用PCR方法从含有HPV-16全基因序列的质粒上扩增E6/E7基因,构建pCDNA3.1(-)-K14-E6/E7-polA载体,扩增、酶切获得K14-E6/E7-polA片段插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack上,构建重组穿梭载体pAdTrack-K14-E6/E7-polA,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组得到腺病毒质粒pAd-K14-E6/E7-polA,经人胚肾293细胞包装后得到重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。氢化铯(CsCl)梯度离心纯化病毒,提取病毒再感染后的293细胞总RNA,通过RT-PCR方法检测E6/E7基因的表达。结果通过同源重组的方法构建了腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA载体,经酶切和测序鉴定该质粒构建成功。293细胞包装3d后观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,CsCl梯度离心纯化最终获得7.2×1010pfu/mL滴度的重组病毒;用该滴度病毒重新感染293细胞3d后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测E6/E7有表达。结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和E6/E7的重组腺病毒pAd-K14-E6/E7-polA。这将为进一步研究HPV-16E6/E7基因功能及利用基因治疗女性宫颈癌奠定了基础。     

ROLE OF PERIPHERAL LYMPHOCYTES SIALYL LEWIS（X） （CD15s） ANTIGEN BEFORE AND AFTER KIDNEY TRANSPLANTATION

Objective To investigate the role of peripheral lymphocytes Sialyl Lewis（x） （CD15s） antigen before and after kidney transplantation. Methods Flow cytometry technique was applied to examine the expression of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen after renal transplantation, and to evaluate various therapeutic regimen. Results The statistic analysis results of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression level showed that there was significant difference among the patients with acute rejection, long-term dialysis and with normal renal function post-transplant; significant difference of CD15s expression level between group of rejection and infection; no significant difference of CD15s expression among the different groups treated by various therapeutic regimens. Conclusion The different therapeutic regimen has no influence to CD15s expression; Detection of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression periodically, intelligently make convenience to understand suitable status of immunosuppression.     

高速公路房建地基与基础工程的质量控制

本文简要介绍了高速公路房建工程的地基与基础工程在施工中的质量控制.     

谈丹本高速公路供配电系统

本文主要阐述了高速公路收费站、服务区、管理处供配电系统的组成.     

拖缆系统运动仿真

建立拖缆的三维运动模型,通过欧拉角的变换把拖曳线列阵微元段矢量动力平衡方程在局部坐标系下展开,在时间和空间上作中心差分数值离散.程序能够计算不同航速定常直航状态下列阵的阵形与姿态,可解决不定常运动（例如回转运动）、考虑海流等多种运动状况的阵形预测.取有关文献资料中的拖曳线列阵进行了直航、回转运动计算,计算结果与相应文献资料中计算和试验结果基本吻合.     

基于构件面向体系结构的C4ISR系统设计方法

介绍了C4ISR体系结构描述和设计方法("3A"视图),描述了在其指导下使用结构分析法和面向对象分析法开发体系结构产品的过程,并比较了这两种方法的优缺点.在此基础上,提出基于构件面向体系结构的设计方法来解决系统的互操作和复用问题,给出了支持该方法的迭代开发过程,阐述了该方法与C4ISR体系结构设计方法的对应关系, 为开发可复用、易于互操作的C4ISR系统提供了一种可行的技术途径.     

一种新型非接触式IC卡电路

利用变压器原理并通过对需要传输的信号调频调幅，实现非接触能量和信号的双向传播，这种传播方式不仅可以用于ＩＣ卡，同时也可以应用于其它恶劣环境下信息的采集以及可编程部件内的软件更换。     

考虑收缩、徐变和松弛相互影响的预应力长期损失计算

由于混凝土的收缩、徐变和预应力筋松弛的影响,会产生截面应力重分布,使得混凝土的预压应力减少,预应力筋的拉应力降低。若对预应力长期损失预测得不准确,会引发桥梁运营后工作状况的劣化,如混凝土的开裂和过大的下挠或上拱。文章考虑混凝土收缩、徐变和预应力筋松弛三者相互影响,考虑了非预应力筋重心和预应力筋重心不重合的一般情况,推导了预应力长期时变损失的计算公式,并与试验结果及现桥规进行了比较,最后对桥规中计算预应力长期损失的方法提出了改进建议。     

进展期肿瘤主动特异性免疫治疗的临床研究

目的探讨自体肿瘤疫苗的作用机制。方法50例进展期肿瘤患者术后第4周开始以自体肿瘤细胞疫苗行主动特异性免疫治疗。免疫接种共4次,每次间隔7-10 d;接种前3 d及第4次接种后1周,采集外周血,分离单个核细胞,以流式细胞分析术/细胞内细胞因子检测法测定CD8+-IFN-γ+、CD8+-IL-10+细胞及CD4+-INF-γ+、CD4+-IL-10+细胞;用自体肿瘤抗原做皮肤迟发型过敏试验(DTH),48 h后测量红斑、硬结大小(mm)。对DTH反应部位皮肤活检,用免疫组化染色了解局部细胞免疫反应。结果自体肿瘤细胞疫苗治疗后表现为:①CD8+-IFN-γ+阳性细胞由(3.90±1.42)%升至(7.12±2.15)%;CD4+-INF-γ+阳性细胞由(4.19±1.50)%升至(7.20±2.29)%(P<0.05);②与治疗前相比,治疗后患者对自体肿瘤抗原的特异性DTH反应明显增强(P<0.01);③DTH反应部位CD8+T细胞、CD4+T细胞浸润明显增多;④患者耐受性良好。结论自体肿瘤细胞疫苗免疫后,可改善肿瘤患者细胞介导的抗瘤免疫反应;自体肿瘤疫苗可激发患者特异性细胞介导的免疫反应。     

水泥混凝土路面的施工质量控制研究

水泥混凝土路面是两大高级路面类型之一。本文从施工机械评价、施工工序管理、施工工序的相关控制三个方面对水泥混凝土路面的施工质量控制进行深入研究,提出的质量控制方法对促进我国水泥混凝土路面建设水平有重要借鉴意义。