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991.
增强型绿色荧光蛋白标记的Hela细胞株的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系。方法PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性。结果PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80%Hela细胞内均可见绿色荧光。加入含G418的选择性培养基进行选择性培养,选择荧光较强的Hela细胞经有限稀释,持续筛选及克隆化培养,获得稳定表达绿色荧光的Hela细胞克隆,扩大培养并传至10代以上,将此细胞株命名为Hela-EGFP。激光共聚焦显微镜观察发现:在蓝光(-395nm)激发时,Hela-EGFP细胞绿色荧光激发波长为395nm,最大发射峰为509nm。结论Hela-EGFP细胞株具备稳定表达EGFP的能力,为实时可视化进行宫颈癌侵袭转移机制的研究奠定了基础。  相似文献   
992.
改进的BP神经网络在路基沉降预测中的应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
针对传统BP神经网络存在的缺点,提出基于遗传优化的变梯度反向传播的BP神经网络预测方法,采用遗传算法优化BP神经网络的初始权重,建立路基沉降预测模型。该模型可克服BP神经网络模型存在的收敛速度慢、易陷入局部极小点等缺点。结合现场实测数据,将该优化模型与指数曲线模型、双曲线模型、灰色预测模型和传统BP神经网络预测模型对比,结果表明改进的BP神经网络在路基沉降预测中精度最高,适宜于广泛推广应用。  相似文献   
993.
文章介绍德国桥梁概况、桥梁标准体系和基本形式以及桥梁的设计特点,例如设计活载的规定,刚度与自振频率的限值要求,桥上无缝线路的设计特点等,为我国桥梁设计提供借鉴。  相似文献   
994.
995.
检测50例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者红细胞膜流动性、氧自由基变化及抗氧化剂对其影响。结果:患者SOD活性减弱,红细胞内MDA含量增加,膜流动性下降,并且与感染及缺氧程度有关。维生素C及辅酶Q10可提高SOD活性,阻断减弱脂质过氧化反应,增大膜流动性。  相似文献   
996.
Magneticmotorevokedpotentialisanon-invasiveelectrophysiologictechnique,currentlyinuse,intheclinicaldiagnosisoftheextentofspin...  相似文献   
997.
为了研究西安地区丙型肝炎病毒(HCV)基因组中C区基因的变异性,采用单链构象多态性(Single-StrandConformationPolrmorphism,SSCP)分析万法,对36份HCVRNA阳性血清的PCR产物进行分析,结果有31份样品的SSCP图谱相同,对其中二份样品进行测序,证明序列是相同的;另外5价样品SSCP图谱不相同,其序列与前者也有差异。说明本地区HCV基因组中C区基因存在一个主要的基因类型。该实验为本地区HCV诊断试剂和疫苗的研究确定了研究材料。  相似文献   
998.
主要介绍了液压成形的技术原理和优点及其在副车架中的应用。  相似文献   
999.
作者报告了西安市雁塔区城区及郊区1~5岁儿童生长发育监测结果。其体重较1985年西安市横断面调查研究的结果增高,身高无明显变化;城区儿童体重及身高均高于郊区农村儿童;应用Kaup指数及“营养状况评价图”评价结果显示,Kauq指数评价西安市儿童的营养状况更接近干实际情况。  相似文献   
1000.
在弹塑性理论的基础上,考虑了材料性能随温度的变化,应用J2流动理论导出了高温下钢筋混凝土构件弹塑性增量本构模型,编制了该模型的有限元求解程序.该模型具有明确的物理意义,表达形式规范,便于数值手段实现.数值计算结果与现有的试验模型基本吻合.  相似文献   
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