Preparation of recombinant firefly luciferase by a simple and rapid expression and purification method and its application in bacterial detection

A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence.     

轮胎驻波现象与胎压的正确选择

造成汽车轮胎爆胎的原因很多,但引起爆胎的实质原因主要在于轮胎产生的"驻波"现象.轮胎的驻波现象又与轮胎气压的高低有着密切的关系. 1 汽车轮胎的驻波现象众所周知,汽车的全部重量都由轮胎所支承,在重力作用下轮胎胎面与地面的接触部位会有轻微变形,车辆行驶时变形的部分在离开路面后将恢复原状.若选取轮胎胎面与地面接触的一个小段来分析,轮胎每旋转一圈,这一小段就会发生一次变形和恢复的过程,即轮胎发生一次弹性变形.     

全球化对公共行政的冲击

在全球化时代，国家主权和公共行政能力遭受到了前所未有的冲击。日益壮大的非政府组织、国际组织和跨国财团正在侵占和瓜分国家的权力。主权危机直接冲击到公共行政，全球化对公共行政所产生的影响可以归纳为：第一，全球化冲击了传统的以地理区域为单位的行政辖区，并逐渐缔造出一种以个人兴趣和利益为纽带的新的距离感；第二，全球化对传统的层级制组织模式构成严重威胁，正在出现的是一种类似于网络结构的组织模式；第三，全球化，尤其是信息全球化，改变了行政机构的决策方式；第四，全球化削弱了民族国家、尤其是发展中国家，制定和实施公共政策以满足国内需求的能力。     

纯横荡和旋臂试验的数值模拟

随着计算机技术和粘性流理论的发展,计算流体力学方法逐渐成为研究船舶操纵性的重要方法.拘束船模试验是获得船舶水动力导数的重要方法,而获得水动力导数也是船舶操纵性CFD的重要目标之一.讨论了如何利用CFD方法对不带自由面的船模旋臂实验和纯横荡试验的数值进行模拟,求取船模的位置导数和旋转导数.利用该方法对我海军某型舰船模的纯横荡试验进行模拟,并得到了定性结果,为拘束船模实验的CFD方法研究提供了有益的经验.     

齿轮传动故障诊断方法综述及应用研究

介绍了基于粒子群优化的小波神经网络,基于相关分析与小波变换,基于小波包和BP神经网络和基于小波分析等故障诊断方法,分析比较了各种方法的优缺点,并对提出了基于多数据融合的故障诊断方法将成为今后齿轮传动故障诊断的主要发展方向。     

云计算技术及应用浅谈

从云技术的含义出发,概括云技术的特点,研究云技术环境下的面向个人、企业、运营商的各种应用,总结各自应用的特点。     

采用斜撑加劲的超宽混凝土梁断面设计与施工

采用内外斜撑加劲的混凝土梁作为宽幅桥梁一种典型断面在国外桥梁建设实践中占有一席之地,但在国内却鲜有采用。从典型断面布置、关键节点构造、桥面板计算、施工工艺等方面出发,结合其在国外桥梁建设中的具体应用,阐述该种断面桥梁的合理结构形式及其技术发展趋势,旨在为宽幅桥梁的建设提供新的思路。     

外墙外保温系统的抗火问题研究

该文阐述了外墙外保温系统抗火的重要性,并分析国内外相关技术的发展现状。在此基础上,从保温材料的选择、节点构造、防火构造等三个方面,对现有外墙外保温系统抗火的要求进行了分析与探讨,并对施工提出了建议。     

IGBT模块在列车供电系统中的应用及保护

介绍了IGBT模块的结构、特点及其在列车供电系统中的应用,探讨了对IGBT的保护问题.     

木薯干专业接卸、运输及灌包工艺和模拟智能控制系统

大宗散货在装卸过程中的污染防治是一个世界性的难题，其中尤以木薯干等多粉尘物料为最难处理。木薯干是粉状、棒状和块状的混合物，流动性差，其粉料黏附性高、亲水性强、易板结、易起拱和易霉变。以前通用码头设备装卸木薯干作业低效率、高污染、高货损的情况严重，为此，我们设计建设了高效、连续、环保型木薯干接卸运输及灌包工艺系统。