Preparation of recombinant firefly luciferase by a simple and rapid expression and purification method and its application in bacterial detection

A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence.     

构筑抵御融资风险的“铁三角”

2009年8月27日,一场令船东备感温暖的船舶融资研讨会在大连举行.短短两天的会程,一天半时间给了航运,造船企业,让这些有融资需求的企业与银行一对一地商讨融资合作.与此同时,会议的主办方,国家开发银行大连市分行和中国船级社大连分社,也在会上签订了新一轮的<开发性金融合作协议>.与会嘉宾表示,在产业与银行结合的过程中,正是有了中国船级社的大力支持,构筑了抵御船舶融资风险的银行、船级社、客户间的"铁三角",在减轻企业融资压力的同时,为中国金融资本的安全使用提供了保证.     

客专ZPW-2000A轨道电路防雷整治初探

统计和归纳客运专线ZPW-2000A轨道电路设备的雷击故障及其特点,并依据其原理框图,结合现场环境调查和相关设备防雷性能测试,寻找出雷电损坏其设备的途径和系统的防雷薄弱环节,有针对性的提出防雷整治措施。     

重视航行实习 培养合格船员

高等院校航海类专业具有学历学位教育和职业技术教育的双重性质，而航海类学生的航行实习则体现了典型的职业教学特色及模式。文章阐述和分析了我国航海类专业学生航行实习的要求、现状和影响因素。并针对目前航行实习存在的问题，结合我国“04考试规则”等相关公约和法规，提出了高质量完成航行实习的几点建议与措施。     

有源干扰影响反舰导弹命中概率的效能分析

分析典型有源干扰对反舰导弹各个阶段的干扰方式和作用机理,提出有源干扰对反舰导弹的单发命中概率影响的干扰模型,解决有源干扰影响反舰导弹命中概率的综合效能分析问题,对提高我军舰艇电子对抗反导能力,保证部队战斗力具有实际意义.     

韩国集装箱码头的特点

介绍韩国集装箱港口的现状、发展规划,以及在功能定位、建设标准、总体布置和设备配置等方面的一些特点。     

格蕴涵代数的超滤

通过超滤构造超积是模型论中构造模型的一种重要方法。文中提出了格蕴涵代数中超滤的概念，研究了它与素滤子及有限交性的关系，并证明了它与极大真滤子的等价性，为进一步研究相应的超积理论打下了基础。     

某型船用蒸汽动力装置加装除盐装置的可行性分析

针对某型船用蒸汽动力装置盐度过高的现状,分析影响其水质的主要因素,并据此提出在其冷凝器后和造水机后加装除盐装箕的新构想.通过分析得出在造水机后加装除盐装置方便可行,并依此设计1台除盐装置.设计计算表明,加装除盐装置能使口用水柜水质提高近50倍,冷凝器后凝水总含盐量下降22%,基本上解决盐度过高的问题.     

油轮消防探析

油轮火灾的破坏性和危险性是极大的。文章列举出油轮及油轮火灾的特点，分析了油轮火灾的扑救难度，阐述油轮火灾的预防措施和火灾扑救的基本方法。     

沃纳模型在大学生敏感性问题调查中的应用

利用随机化回答技术的Warner模型对大学生考试作弊这一属性特征的敏感性问题进行了抽样调查，并针对出现的问题及应采取的有效措施进行探讨。