应用激光捕获显微切割技术制备肺癌蛋白质组学研究样品

目的探讨应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术获取高同质性肺癌组织细胞及正常对照肺泡上皮细胞的方法及可行性。方法将新鲜肺癌组织标本及其配对正常组织常规制备8μm冰冻切片,采用改良的HE方法染色;应用LCM技术大宗切割肺鳞癌、腺癌及正常对照肺泡上皮细胞;选择性获取同质肺癌细胞和配对正常细胞。结果通过LCM技术可以准确、快速地分离癌细胞、间质及其他坏死组织,得到同质性不低于95%的肿瘤细胞和正常细胞。按照Duration 15.5 s的激光脉冲频率和平均8 000 shots条件,既可保证每个帽子的细胞收集数量,也能够有效地缩短实验时间,提高实验可控性,从而使操作过程标准化。结论应用LCM技术可以成功获取同质肺癌细胞和正常细胞。其所需标本量少、组织同质性高、操作过程稳定、可控性好,是肺癌分子生物学及蛋白质组学研究有价值的样品制备方法。     

血液系统恶性肿瘤细胞共刺激分子的检测及其临床意义

目的　探讨共刺激分子B7 1(CD80 )在血液系统恶性肿瘤发病学及免疫基因治疗中的重要作用。方法　应用免疫荧光法检测了 76例恶性血液病患者共刺激分子B7 1及MHCⅠ、MHCⅡDR分子的表达 ,并与自体瘤苗主动免疫治疗的疗效进行了相关分析。结果　所有患者MHCⅠ类分子表达均阳性 (10 0 % ) ,MHCⅡDR分子表达阳性率为95 %。B7 1在急性单核细胞白血病 (M5 )及多发性骨髓瘤 (MM)表达阳性率较高 ,分别为 6 9%和 10 0 % ,而在粒细胞起源的白血病几乎无表达。这与自体瘤苗免疫治疗的临床疗效基本符合 ,即疗效好的M5和MM病例 ,其B7 1表达均阳性 ,而B7 1阴性者几乎无疗效。结论　缺乏共刺激分子 (如B7 1)是血液肿瘤细胞逃避宿主免疫监视的重要原因 ,可能是人类血液肿瘤的发病机理之一 ;B7 1介导的免疫基因治疗将成为治疗人类血液系统恶性肿瘤尤其是急性白血病的一种有效方法 ,具有重要的临床应用价值     

Si-Al-F 系可加工陶瓷制备工艺的研究——化学成分对玻化、结晶过程的影响

玻化和结晶过程是可加工陶瓷制备过程中重要的环节．本文研究了化学成分对玻化和结晶阶段的影响，在玻化阶段希望得到均匀的玻璃熔体，并且冷却过程中不出现晶化；在结晶阶段又希望得到较高的结晶度，这就必须控制晶化成分的加入量．Ａｌ２Ｏ３和ＭｇＯ的含量降低可使玻化温度降低；ＭｇＯ又是结晶过程的形核剂，含量不宜过低；氟化物含量高可使玻化温度降低，既是助熔剂又是形核剂．最后给出了可以在玻化阶段得到均匀透明玻璃熔体而结晶阶段可获得较高结晶度的最佳配方．     

西安汉族人群HLA-DQA1基因座遗传多态性研究

目的　了解西安汉族群体HLA DQA1基因座的基因及基因型分布 ,获得西安汉族群体HLA DQA1群体遗传学数据。方法　采用PERKIN ELMER公司生产的AmpliTypePM试剂盒 ,PCR扩增HLA DQA1基因座 ,与 11个寡核苷酸探针杂交 ,对西安地区汉族 10 2名无关个体HLA DQA1基因座进行基因频率调查。结果　检出 7种等位基因、2 8种基因型 ,经 χ2 检验基因型的观察值与期望值符合Hardy Weinberg平衡定律 (P >0 .5 ) ,其杂合度 (H)、个体识别率 (DP)、非父排除率 (EPP)和多态信息量 (PIC)分别为 0 .8317、0 .9393、0 .786 6和0 .82 5 0。结论　所得到的群体遗传学数据为遗传学、法医学个体识别和亲权鉴定提供依据     

CORRELATIONS BETWEEN BLOOD PRESSURE AND BODY WEIGHT, SERUM LEPTIN IN HIGH CALORIE DIET-INDUCED OBESE RATS

Objective To examine the change of body weight （BW） and blood pressure （BP） in obese rats, clarify relationships between BP and BW and other factors. Methods Male Spraque-Dawley rats were fed either with normal diet （ND） or high calorie diet （HC） for 20 weeks. BW and BP of tail artery were observed biweekly and tetraweekly respectively; serum leptin and fasting insulin （FINS） were detected by enzyme-linked immunoadsordent assay （ELISA） and radioimmunoassay （RIA） respectively. Fasting plasma glucose （FPG） and free fatty acid（FFA） were measured by conventional means. Results BW, abdominal fat weight （AFW）, ratio of abdominal fat weight to body weight （RF/W）, systolic blood pressure （SBP）, diastolic blood pressure （DBP）, serum levels of leptin and FINS, FPG, FFA increased in the HD group after 20 weeks diet intervention （P〈0.05 or P〈0.01 ）. SBP was strongly correlated with BW, leptin, FINS and FFA （P〈0.05）, DBP was correlated with FFA （ r =0.47, P〈0.05）. In addition, leptin was positively correlated with BW, AFW, RF/W, FINS and FFA （P〈0.05 or P〈0.01 ）. Conclusion In this study of high calorie-diet induced rats, the gain of BW is accompanied by increased BP. The obese rats have hyperleptinemia, hyperinsulinemia, hyperglycemia and dyslipidemia which may have important effects on the development of obesityrelated hypertension. RF/W is the key factor in which affect serum leptin level.     

全血环孢素A浓度荧光偏振免疫法监测及评价

应用特异性单克隆抗体荧光偏振免疫法（ＭＡＦＰＩＡ）对６８例肾移植患者进行３６２次临床环孢素Ａ（ＣｓＡ）全血药物浓度监测。结果表明：合并用药会影响ＣｓＡ全血浓度。术后时间与ＣｓＡ全血浓度有一定关系。ＭＡＦＰＩＡ是一种简便、快速、准确的监测方法，对指导临床鉴别排异与中毒反应以及个体化给药，具有重要意义。     

白血病瘤苗对正常小鼠免疫作用的观察

目的　观察自制的一种白血病瘤苗对C57BL/ 6小鼠一般状况 、抵御FBL 3细胞的攻击及小鼠免疫功能的影响。方法　用自制的白血病疫苗 ,内含灭活的FBL 3细胞 +不完全弗氏佐剂 (incompletefoundadjuvant,IFA) +细胞因子(rIL 2、rIL 6、rGM CSF) ,皮下注射免疫C57BL/ 6小鼠 ,用FBL 3细胞皮下注射攻击小鼠 ,观察小鼠一般状况、成瘤率、瘤块生长情况 ;用病理学方法了解瘤块及疫苗注射部位病理变化 ;用MTT比色法检测小鼠巨噬细胞 (macrophage ,Mφ)及细胞毒性T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)杀伤活性。 结果　与对照组相比 ,发现自制成的白血病瘤苗能有效的提高小鼠的细胞免疫功能 ,Mφ及CTL杀伤活性明显提高 ,用FBL 3细胞攻击 ,小鼠成瘤率低 ,成瘤小鼠瘤块生长缓慢 ,瘤周单个核细胞浸润明显 ,瘤块内瘤细胞坏死明显。结论　所用白血病疫苗制备简单 ,疗效肯定 ,副作用小 ,有必要进一步研究     

PROPERTIES OF PROLIFERATION AND DIFFERENTIATION OF NEONATAL RAT RETINAL PROGENITOR CELLS IN VITRO

Objective To investigate the properties of proliferation and differentiation of neonatal rat retinal progenitor cells （RPCs） in vitro. Methods RPCs were isolated from neonatal SD rats neural retina and cultured in DMEM/F12 ＋ N2 with EGF and bFGF （suspension medium ） or 10 % FBS without EGF and bFGF （ differentiation medium）. The cells grew as suspended spheres or adherent monolayers, depending on different culture conditions. The neural stem cells or retinal progenitors, neurons, astrocytes, retinal ganglion cells, rod photoreceptors and the proliferating cells were evaluated with immunofluorescence analysis by Nestin or Pax6, Map2, GFAP, Thy-1, Rhodopsin and BrdU antibodies respectively. Results RPCs could propagate and differentiate in suspension or differentiation medium and express the markers of Nestin （92.86%） or Pax6 （86.75%）, Map2 （38.54%）, GFAP （20.93%）, Thy-1 （27. 66%） and Rhodopsin（13. 33%）in suspension medium; however, Nestin （60.27%）, Pax6 （52%）, Map2 （34.94%）, GFAP （38.17%）, Thy-1 （30.84%） and Rhodopsin （34.67%） in differentiation medium. 96.4 % of the population in the neurospheres was BrdU-positive cells. The cells could spontaneously adherent forming some subspheres and retinal specific cell types. Conclusion Neonatal rat RPCs possess the high degree of proliferation and can differentiate into neurons, astrocytes, retinal ganglion cells and rod photoreceptors in vitro. There are different proportions for RPCs to differentiate into specific cell types.     

苦参素对Hela细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨苦参素(Matrine)对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法Hela细胞体外培养,MTT法检测细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白的表达水平。结果与对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0g/L苦参素均能显著抑制HeLa细胞生长(P<0.05),药物浓度在0.5-1.5g/L之间时表现出时效和量效关系;苦参素2.0、2.5、3.0g/L与1.5g/L相比,抑制无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,1.0、1.5、2.0g/L苦参素组可见到显著性细胞凋亡(P<0.05);1.5g/L苦参素组作用48h和72h时PCNA蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论苦参素可能通过抑制增殖和诱导凋亡的双重途径抑制宫颈癌Hela细胞的生长,苦参素有可能成为治疗子宫颈癌的一种药物。     

公路施工中特殊结构物放样的计算方法

桥梁锥形护坡、曲线斜桥梁板等结构物的施工放样在公路施工中非常重要。本文结合实际工作介绍了这两种特殊结构物施工放样的计算方法及计算过程。方法简单实用，可提高工作效率并保证施工放样的精度。