G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析

目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/C-G250肽-C,为更换酶切位点,以pGEMEX/C-G250肽-C为模板,PCR扩增C-G250肽-C基因片段,最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a(+)中,IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni 2+-NTA亲和层析法纯化重组融合蛋白,SDSPAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化后融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗体的滴度。结果酶切及基因测序鉴定证实融合基因正确重组于表达质粒pET28a(+)中,原核表达并纯化后,该分离纯化融合蛋白纯度达95%以上,其相对分子质量约为22.35。BALB/c小鼠经4次免疫后,所有小鼠血清中均可检测到抗体,免疫第6周其血清中抗体滴度可达到1∶5.12×105,抗G250肽抗体滴度达到1∶6.4×104,抗HBcAg抗体滴度不超过1∶4×103。结论成功构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,在大肠杆菌中可高效表达,纯化后融合蛋白具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体。     

副词“さっそく”与“すぐ”的语义及表现差异

副词"さっそく"与"すぐ"是日语学习者接触到的常用副词词汇。用于叙述某种状态下所进行或发生的行为动作,都是表现情态或样态的副词。其用法看似简单易懂,但在教学中笔者发现学生们对"さっそく"与"すぐ"的了解有失全面,在语言实践中语用错误、翻译差错屡见不鲜。     

高速公路监控系统中数字硬盘录像技术的使用

随着近几年科学技术的不断进步和人们对监控系统要求的不断提高,现有传统的监控录像模式受到了极大的挑战,越发显的无法适应时代和工作的要求.本文从目前高速公路收费监控录像系统的现状和特点入手,介绍了数字硬盘录像系统的优势,并从分类上对当前时兴的数字硬盘录像(DVR)进行了分析.     

连云港港经济腹地空间演变及其影响因素

<正>位于江苏省连云港市的连云港港是我国沿海主枢纽港之一,新亚欧大陆桥的东桥头堡,亚欧间重要的水陆中转港。作为腹地型港口和外贸运输为主的连云港港,与腹地的互动关系也会愈显重要。通过对1990年代以来连云港港口货物吞吐量、集装箱吞吐量、外贸进出口总额及货件货源地等重要指标和货种货源地进行调查分析,探讨连云港港口腹地的空间层次变化规律,有助于了解腹地内的资源状况和经济潜力为连云港港口合理分工、港口布局和规划提供科学依据。     

ATP中各子系统间通信协议（总线）的研究

在分析了列车超速防护系统（ＡＴＰ）所需具备的通信功能的基础上，对几种常用的通信协议（总线）进行了具体分析，并针对不同的ＡＴＰ系统提出各自的一个最佳的通信协议（总线）。     

再认识语法在外语教学中的重要性

现在人们对语法的学习越来越不看重,教学过程中也忽略语法作用.从语法教学的历史回顾、习得外语必须学习语法及语法教学必须改革几方面来看,语法在外语教学中依然重要,但需要改革教学方法.     

配置HRB500E,HRB600钢筋的混凝土圆柱抗震性能试验

为了研究高强度钢筋对试件抗震性能的影响,对11个配置HRB335,HRB500E,HRB600钢筋的混凝土圆形柱进行了水平低周反复荷载作用下的拟静力试验.对比分析钢筋等体积代换和等强度代换时,纵筋强度、箍筋强度、箍筋间距、混凝土强度等因素对试件破坏机理、抗弯承载力、耗能能力的影响及位移延性等对抗震性能的影响.研究结果表明:采用不同强度钢筋时,试件均为典型的弯曲破坏,墩底形成塑性铰,纵筋断裂;钢筋等体积代换时,纵筋强度对试件承载力、变形能力和总耗能能力影响较大,箍筋强度影响较小;等强度代换时,试件抗震性能基本保持不变,采用高强钢筋可以减小钢筋用量;箍筋间距增大时,箍筋对纵筋约束减小,试件变形能力和耗能能力减弱;混凝土强度对试件抗震性能影响较小.     

动力定位船控位能力计算软件平台构建研究

围绕环境载荷计算和推进器推力分配两大关键问题,对控位能力计算软件平台功能实现进行设计。通过对环境载荷计算、推进器配置、推力分配、动力定位能力图绘制等功能进行集成,完成界面友好的控位能力计算软件平台。最后通过实例验证了自研软件的稳定性与输出结果的可靠性。     

半潜运输船双向变频电源系统设计

海洋工程领域的需求是灵活多变的,介绍了某个半潜运输船项目中,根据多类型对外供电装置和多类型岸电接入设备综合在一起的需求,介绍了多种可行的设计方案,并进行了综合比较分析,最后选择设计出一个最适合的双向变频电源系统的设计应用案例,为海洋工程领域电气设计人员在类似需求项目中提供了一个参考解决方案。