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目的 通过构建Cav1.3基因K228E突变,观察K228E突变对L-型钙通道电生理特性及蛋白表达和转运的影响.确定钙通道α1亚基结构域ⅠS4段上N-端带正电荷的氨基酸对该通道电生理学特性的作用,从而为创建钙通道起搏器奠定基础.方法 ①一步法快速定点诱变构建Cav1.3基因K228E突变体的真核表达载体;②膜片钳观察突变钙通道电流,激光共聚焦技术观察突变钙通道蛋白在细胞内的表达和定位.结果 ①检测表达于HEK293细胞上的L-型钙电流:转染野生型Cav1.3质粒和相关亚基质粒,可检出L-型钙电流,其半激活电压V1/2=(-36.56±2.08)mV、半失活电压V1/2 =(-42.93±0.14)mV(5mmol Ba2+);而转染K228E-Cav1.3质粒和相关亚基质粒的HEK293T细胞上未检测到钙电流;②检测K228E突变通道蛋白在细胞内的表达和定位:转染野生型和突变型Cav1.3质粒及相关亚基质粒,48h后观察到野生型与突变型钙通道蛋白在细胞膜上都有表达.结论 Cav1.3基因K228E突变虽不影响L-型钙通道蛋白质的表达与转运,但却不表达钙通道电流,是一种功能丧失性突变. 相似文献
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工程概预算采用计算机来编制,可在很大程度上提高概预算的编制速度,大大减少了编制周期。本文论述了工程概预算的基本理论,指出了工程概预算软件的优点,对工程概预算软件系统中的关键技术,保护定额数据库、工程数据保存和工程数据文件的密码保护进行了详细的论述。 相似文献
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本文介绍了微机控制的汽车变速器总成同步器性能与寿命通用试验台的组成及功能,并着重介绍试验台测量控制系统的硬件设计和计算机管理系统的软件设计。 相似文献
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血管支架筋宽误差分析及激光加工工艺优化 总被引:3,自引:0,他引:3
为解决血管支架激光切割中普遍存在筋宽不均匀的问题,通过激光切割工艺试验及对管材的运动分析,得出影响筋宽的主要因素包括系统误差造成的管材切割点切向速度变化和激光离焦量.根据研究结果,优化了激光切割参数.限制管材回转偏心在0.030mm以下,并设置激光离焦量为-0.05mm(设备显示值),筋宽变化幅度控制在0.010mm以内,满足设计要求. 相似文献
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本文基于变刚度调平设计理念,针对桥头连接段与一般路段因不同地基刚度衔接引起的差异沉降控制问题,提出采用PHC5.0/22+CDM2.5/8变刚度调平过渡方案,实现了过渡段基体承载力提高与疏桩基体整体刚度合理降低的统一,有效解决了桥头连接段与一般路段纵向差异沉降控制问题,体现了变刚度调平设计理念应用于桥头过渡段"协调过渡... 相似文献