hGPx-1-198Leu真核表达载体的构建与鉴定及在H9C2细胞中的表达

目的构建含有人GPx-1基因Pro198Leu多态的真核表达载体,为深入研究GPx-1基因Pro198Leu多态在相关疾病中的作用与机制提供依据。方法采用全基因合成的方法合成含多态位点的人GPx-1基因cDNA片段,同时在基因5′端和3′端分别引入BamHⅠ和NotⅠ酶切位点,通过限制性内切酶酶切目的片段和真核表达载体pEGFPN3,再用T4DNA连接酶将含有目的基因的片段定向插入到载体pEGFP-N3真核人巨细胞病毒启动子下游。连接产物转化至DH5α中。挑取克隆、提取质粒进行鉴定。将hGPx-1-198Leu真核表达载体转染HEK293细胞,观察转染效率,并采用RT-PCR检测转染重组载体后细胞中GPx-1的mRNA表达水平。重组载体转染H9C2细胞,观察补硒之后的GPx-1表达情况。结果获得目的基因cDNA片段全长869bp,PCR和测序鉴定载体中含有人GPx-1-198Leu基因cDNA。重组载体转染HEK293细胞后检测到GPx-1的mRNA水平比未转染组及空质粒转染组明显升高,为深入研究GPx-1基因Pro198Leu多态在相关疾病中的作用与机制奠定了基础。H9C2细胞在转染后GPx-1蛋白水平升高并且随着硒浓度的升高而升高。结论成功构建了含Pro198Leu多态位点的hGPx-1真核表达载体,并且也插入了保证该基因有效表达的硒代半胱氨酸插入序列。     

利用ASP实现对Web数据库的访问

通过实例介绍了利用ASP技术实现对Web数据库的访问，在客户端能够使用浏览器对数据库信息的动态浏览。     

美国智能交通系统的研究

近年来，智能交通系统的研究引起了很多研究人员的注意，智能交通系统是一个跨学科、信息化、系统化的综合研究体系。美国智能交通系统的研究在很多领域都是走在世界的前列，因此值得研究其智能交通系统的硬件设备、软件技术、及其基本结构等。借鉴之，以促进我国智能交通系统研究的发展。     

路基防护类型的选择及加固方案

公路因其线型、纵坡等方面的需要，特别是高等级公路因高填深挖较多，需要各类路基防护。但如加固和防护措施不得力，极易引发各类路基防护的病害。故针对不同情况，有必要分析不同路基加固、防护的措施和优缺点，适用条件。     

跨机场路高架桥钢箱梁桥面铺装施工

对跨机场路高架桥钢箱梁桥面铺装施工技术进行较为详细的阐述。     

压实机械技术使用

公路的施工质量和其使用寿命，很大程度上取决于路基和路面压实后，是否达到最佳密度，要保证合理施工，取得最佳经济效益，就必须使施工人员懂得压实机械的结构，使用性能、操作的基本要领、正确的选择和科学的组织施工并且按照公路工程施工中压路机的施工技术规范进行作业。只有这样才能收到良好效果。     

欧洲及美国重型汽车动力学特性比较

尽管美国和欧洲重型汽车一般相似，但影响制动和转向性能的设计参数有所不同，为了比较欧洲和美国汽车的性能，评定其可比较的性能。对一辆欧洲鞍式半挂牵引列车进行了研究。对欧洲牵引车和半挂车的质量、悬挂和制动系参数在实验室和试验场进行了测定。对转向及制动性能通过计算机模拟和试验测定并加以评估。与美国实施中等水平设计参数的同类车相比，欧洲汽车列车的倾翻临界值高9%。欧洲牵引车和半挂车具有较高的悬挂侧倾刚度和较高的底盘重量。这正是其临界值较高的原因，由于在牵引和半挂车上使用了感载比例阀，在空载制动时，欧洲汽车列车也占有一定性能优势，但满载时，美国列车制动性能则优于其欧洲对应车型。     

变速比齿扇加工原理的研究

本文从啮合原理的角度，以循环球式转向器变速比齿扇的加工问题进行了研究，系统分析了变速比传动时的啮合线，啮合面，齿扇齿形与齿廓面等，并对普遍存在的啮合及加工中的干涉问题进行了重点讨论，提出了变速比齿扇的展成加工原理，开发了展成加工装置。     

一种评定板料抗皱性能的新方法

本文提出了一种评定板料抗皱性能的新方法，该方法采用方板双向对角拉伸试验，在一定的变形程度下，纵向载荷和横向载荷之经作为评定抗皱性指标，其特点是测试方法简便，实验重复性好，对实际成形的模拟程度高，能较真实地反映板料的抗皱性能。     

常温固化型桥梁伸缩缝的研究

本文针对中小位移量伸缩缝构造进行设计研究，提出了一种常温固化型桥梁伸缩缝。经过对伸缩量△20cm,△=40cm的多座桥梁的实验应用表明，这是一种适用于中小位移量桥梁中性能良好的伸缩缝，施工简便。其桥缝具体结构为，在两侧拍击区采用钢纤维混凝土增强，缝内用高分子聚合物与一定比例的水泥及掺合物拌和均匀，经一段时间与桥面加固铺装层固化成具有较高弹性和一定强度的整体式桥梁伸缩缝。其效果良好，供应用参考。