临床致病性不动杆菌的分子生物学鉴定

目的对临床致病性不动杆菌进行种属鉴定,并比较3种方法(44℃生长试验、特异性引物PCR扩增和16SrRNA测序)对鲍曼不动杆菌鉴定的特异性、准确性及应用价值。方法收集临床致病不动杆菌56株,首先接种在胰蛋白胨大豆肉汤中44℃进行培养,观察是否可以生长;其次,提取56株不动杆菌基因组DNA,用两组不同的特异性引物进行PCR扩增鉴定;最后,用通用引物对56株不动杆菌的16SrRNA进行测序鉴定。结果 56株不动杆菌中有17株可在44℃生长。经特异性引物PCR扩增鉴定,发现8株鲍曼不动杆菌和3株13TU型不动杆菌均可在44℃中较早较快生长。金标准16SrRNA测序确定56株不动杆菌中含有9个种,其中鲍曼不动杆菌和13TU型不动杆菌的鉴定结果与特异性引物PCR扩增法相同。结论应用分子生物学方法鉴定鲍曼不动杆菌具有准确、高效且可重复性高的优点,尤其是特异性PCR扩增法,可作为较难诊断的鲍曼不动杆菌的首选鉴定方法。     

Screening of Bioflocculant-Producing Strains and Characteristics of Microbial Flocculation

A high effective bioflocculant-producing strain named LB1 was isolated and screened from the leachate by routine micro-method. The strain was identified as genus Pseudomonas according to the morphologic and physiological-biochemical characteristics of the strain. The biological characteristics of the microbial flocculants produced by LB1 were investigated. The results show that the optimal production period of microbial flocculant using LB1 is 96 h; and the products, found in the fermentation liquor, comprise the extracellular organic matter (EOM) of LB1 generated during LB1 growth and the secondary metabolites in the anaphase of LB1. Meanwhile, the mycelia can improve the performance of the microbial flocculants. Because heat has a greater influence on the active substance in the microbial flocculants than other factors, the activity of the flocculants decreases with increasing temperature and the time of heating. The flocculants can flocculate mud-containing and melanin-containing wastewater effectively with a flocculation ratio of 85.1% and 92. 2% , respectively. The optimal heating temperature varies from 20 to 45 ℃. When flocculating the two wastewater, the flocculating activity of the flocculants is above 57. 7% and 70.9% , respectively, in a wide pH range from 3 to 11.     

空调蒸发箱需要定期清洗的深层原因

<正>一个有效的蒸发箱清洗产品可以达到的效果,除了一般常见的改善空调异味之外,还可改善制冷效果,并减少细菌/微生物对人体的威胁。蒸发箱清洗是空调养护中最常见的一种。在笔者看来,一个有效的蒸发箱清洗产品可以达到的效果,除了一般常见的改善空调异味之外,还可改善制冷效果,并减少细菌/微生物对人体的威胁。本文将介绍后面两个部分的原理。     

结核分支杆菌phoS2重组质粒的构建、表达、纯化及生物信息学预测

目的构建结核分支杆菌phoS2表达重组质粒、原核表达及纯化重组蛋白,并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法将目的基因亚克隆到pET32a表达载体,成功构建的重组质粒双酶切鉴定并测序。加IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定后用含Ni 2+的His-bind树脂柱亲和层析纯化phoS2,并用Western blot对其进行鉴定。应用DNAstar等生物分析软件对该蛋白的理化特性、跨膜区域、二级结构、三维结构进行预测。结果双酶切鉴定及测序分析表明,成功构建了基因工程菌株高效表达质粒phoS2/pET32a。IPTG诱导表达的SDS-PAGE鉴定结果显示,上清液中只见极少量的特异蛋白表达带,沉淀部分可见明显的特异表达带,说明phoS2主要是包涵体表达。经免疫印迹分析获得的phoS2分子质量为37 953ku。生物信息学预测该蛋白分子质量为37 953.1ku,理论等电点为5.75,具有1个跨膜区,位于1¹9位,结构域位于119位,结构域位于1³70位。结论成功构建了结核分支杆菌phoS2/pET32a重组质粒,phoS2能够高效表达。蛋白结构功能的预测对本实验的实施及进一步的研究提供了理论依据。     

车内陌生而又熟悉的敌人-军团杆菌

夏季的时候,我们在车上会遇到一种陌生而又熟悉的敌人。说它陌生,是因为我们很少有人知道它的名字;说它熟悉,是因为我们经常会感受到它的存在,它就是-军刚杆菌。     

非多重耐药及多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵及其表达

目的探讨多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)及非多重耐药鲍曼不动杆菌(non-multidrug resistant Acinetobacter baumannii,N-MDRAB)的外排泵表型、基因型和外排泵基因表达情况。方法应用K-B法将120株临床分离的鲍曼不动杆菌,分成MDRAB 96株和N-MDRAB 24株两组;参照Sylvia Valdezate方法检测鲍曼不动杆菌的外排泵表型,即采用微量肉汤稀释法,观察加入泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)前后其MIC值的变化,筛选出加入泵抑制剂后MIC值比原值降低1/4倍或以上的菌株为AB外排泵表型阳性;PCR法扩增外排泵蛋白基因并测序进行序列分析。结果 96株MDRAB对β-内酰胺类、头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类、磺胺类、多黏菌素类抗菌药物的耐药率分别为76.04%~92.71%、73.96%~97.92%、40.63%~42.71%、92.71%~98.96%、93.75%~98.96%、98.96%、79.17%、0。24株N-MDRAB对头孢菌素类、β-内酰胺类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类、磺胺类、多黏菌素类抗菌药物的耐药率分别为16.52%~20.43%、11.22%~15.65%、0、17.83%~18.26%、20.43%~23.39%、14.78%、19.57%、0。外排泵抑制检测结果显示,96株MDRAB有34株外排泵阳性,外排泵基因检测有33株adeB、32株adeR、33株adeS、33株adeJ、0株adeE和33株abeM,检出阳性率分别为97.06%、94.12%、97.06%、97.06%、0、97.06%;24株N-MDRAB未检测到外排泵阳性菌株,但外排泵基因检测有12株adeB、20株adeR、16株adeS、18株adeJ、0株adeE和16株abeM,检出阳性率分别为50%、83.33%、66.67%、75%、0、66.67%。对adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM基因进行测序,经比对,所测序列与GenBank中序列同源性为100%。结论外排泵基因广泛存在于MDRAB中,但在N-MDRAB中亦可以发现主动外排泵基因的存在。     

太原铁路局坚持“五个不动摇”，推行“1233”安全工作法的几点体会

太原铁路局在今年运输安全工作会议上．提出了要坚持“五个不动摇”和推行“1233”安全工作法。“五个不动摇”即坚持安全第一思想不动摇．坚持预防为主的方针不动摇，坚持强化设备基础不动摇．坚持从严务实抓管理不动摇．坚持党政工团齐抓共干不动摇。“1233”安全工作法即确立一种精神——解决安全问题不过夜的精神：坚持“两主原则”——主要领导必须用主要精力抓安全的原则；狠抓“三基”建设--基层、基础、基本工建设：围剿“三个主义”——不负责任的官僚主义、不敢碰硬的好人主义、不解决问题的形式主义。     

一株产蛋白酶植物内生菌的分离、鉴定及产酶条件研究

采用明胶平板筛选法从植物防风的根中分离得到一株高产蛋白酶的内生菌株FFR3.结合生理生化特性和16S rDNA序列分析,初步鉴定此菌株为类芽孢杆菌Paenibacillus sp..以胞外蛋白酶活力为指标,对内生细菌FFR3的产酶培养条件进行初步研究.结果表明:5 g/L葡萄糖和7.5 g/L酵母浸膏是菌株生长产酶的较适碳源和氮源;无机盐MgSO_4·7H_2O、KH_2PO_4和FeSO_4·7H_2O浓度分别为3、5和0.1 g/L时有利于胞外蛋白酶的产生.菌株在发酵培养条件为2%接种量、50 mL/250 mL装液量、pH 7.0、转速180 r/m,温度37℃时,发酵48 h可获得较高的酶产量,蛋白酶活力可达633.19 U/mL,较初筛时的酶活力提高15.94倍.     

基于改性巴斯德杆菌的桥梁环境下细菌混凝土技术的研究

选择巴斯德杆菌进行培育及矿化实验,并在亚硝酸盐溶液的环境下对其进行改性,筛选出了适合混凝土环境、产生碳酸钙和胶质物最多的巴斯德杆菌菌株M102。然后进行粉砂固化能力的对照实验,扫描电镜分析结果表明新菌株M102对粉砂的固化能力远大于原始巴斯德杆菌。