携带CIP2A shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其鉴定

目的构建携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体,制备靶向性沉默CIP2A表达的高浓度重组腺相关病毒。方法设计合成CIP2AshRNA,退火形成双链与pDC316-EGFP-U6质粒BamHⅠ和HindⅢ双酶切产物相连接构建形成质粒pDC316-EGFP-CIP2AshRNA,以鉴定正确的pDC316-EGFP-CIP2AshRNA克隆为模板PCR扩增EGFPCIP2AshRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切PCR扩增产物及pSNAV2.0质粒后进行连接形成重组质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA,建立载体细胞株BHK/CIP2A-shRNA,采用AAV MaxTM包装系统大规模制备rAAV2-EGFPCIP2AshRNA并对其纯化及滴度测定。将rAAV2-EGFP-CIP2AshRNA感染肝癌细胞HepG2,利用空载病毒载体rAAV2-EGFP作对照,采用Real-time PCR及Western blot方法检测CIP2AshRNA基因沉默效果。结果携带编码CIP2AshRNA腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA经双酶切及测序鉴定,质粒构建正确;将重组质粒与辅助病毒HSV1-rc/ΔUL2共转染包装细胞BHK-21,成功制备重组腺相关病毒rAAV2-CIP2AshRNA,经测定纯化所得rAVV2病毒滴度为0.25×1012v.g./mL。筛选MOI值为1×105感染肝癌细胞HepG2,CIP2A mRNA及蛋白表达水平分别于感染后24h和48h与对照细胞相比出现明显下降。结论成功制备高滴度携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体rAAV2-CIP2AshRNA。     

2010年款奥迪A8自适应定速巡航系统

<正>自适应巡航系统(也叫主动巡航系统,Adaptive Cruise Control,缩写为ACC)是一种新开发的驾驶人辅助系统,它与传统的车速控制系统相比,在功能上有很大扩展。由于减少对油门踏板和制动踏板的操作,可明显提高驾驶舒适性。使用该系统可以使驾驶人严格遵守车速限制以及车距,从而保证交通的畅通。2010年款奥迪A8使用的是BOSCH公司的新一代ACC系统,首次在车的正前方使用了2个     

北极渔业“软治理”的硬法规制及对我国的启示

全球气候变暖引起了北极生态环境变化，这为中北冰洋公海渔业捕捞带来潜在商机的同时，也对该海域渔业“软治理”的模式产生挑战。北冰洋五国在渔业谈判的“扩员进程”中纳入包括中国在内的其他五个利益攸关方，在多种改革路径中选择了“硬法规制”这一选项，于2018年达成了具有法律约束力的《预防中北冰洋不管制公海渔业协定》。该协定不仅基于“预警”机制对中北冰洋渔业采取养护和管理措施，更开启了北极渔业治理的“A5+5”新模式。对我国而言，北极渔业议题是与其他北极国家平等参与北极事务的重要契机，今后应从机制和规则层面继续积极参与和推动北极渔业治理。     

为生活充电 奥迪 A6 Hybrid＆Q5 Hybrid

也许几年前，混合动力车型还是个十分超前的概念，并且车型也屈指可数。而如今，很多车都有了混合动力版。向以科技为主打的奥迪，自然走在科技的前沿。而驾驶一辆混合动力车型也是一种生活态度，既要品质，也要环保。     

CRH380A型动车组空调电源的设计

介绍了CRH380A型动车组司机室空调电源的技术参数、主电路、控制方法、总体结构及主要技术特点,并结合其特定的使用环境,阐述了提升其工作可靠性的设计方法。最后通过进行一系列可靠性验证试验,验证了设计方法的有效性。     

汽车维修技术信息

<正>1部分采用09E(6HP26)、09L(6HP19)自动变速器的奥迪轿车换挡舒适性差的技术通报1.1涉及车辆采用09L(6HP26)和09E(6HP19)自动变速器的奥迪A4、A6和A8轿车。1.2故障现象换挡舒适性差,如换挡生硬等。1.3故障原因随着使用时间的增长,自动变速器内的离合器性能会发     

基于驾驶员眼动信息的A柱视野研究

基于驾驶员眼动信息分析了驾驶员在直行、左转、右转、掉头、静止工况下对A柱视野区域以及A柱本体的主要关注范围,确定了A柱视野细分区域的视野重要度排序,并提出了A柱视野的控制原则以及用于测量A柱障碍角的标准修正方法。验证结果表明:GB 11562测量方法、SAE J1050测量方法所得结果与主观评分出入较大,本文提出的标准修正方法与主观评价结果相符。     

CRH380A型高速动车组移动式特高耐压装置研究

简述CRH380A型高速动车组特高压系统工作原理及特高耐压方法。详细论述了一种用于CRH380A型高速动车组移动式特高耐压试验装置的工作原理、应用及其优点。     

中国港航股指走势月度分析（2013年6月）

1 中国A股码头上市公司指数走势 中国A股码头上市公司指数6月28日收于31．6点，当月累计下跌15．O％。第一期（6月3—713）指数均值为36．4点，比上期（5月27—31日）均值37．3点下跌2．4％；第二期（6月17—21日）指数均值为34．8点，比上期下跌4．6％；第三期（6月24—28日）指数均值为31．8点，比上期下跌8．5％。     

奥迪A3轿车

故障现象 胎压报警，电子风扇常转。 检查分析检查轮胎气压。正常：检查轮胎压力监控系统控制单元的版本号，也没有问题。用VAS5052对该车进行检查，在01-发动机系统中存在“U042300仪表控制单元不可靠信号，静态故障”的记录;