RNA：拥抱生物学的美丽新世界

如果说20世纪属于物理学，那么21世纪就属于生物学，其中RNA可能就是打开生物学美丽新世界的一把钥匙。[编者按]     

不同硒化合物对淋巴细胞代谢的影响

本文观察了不同浓度(10~(-8)～10~(-4)mol/L)的亚硒酸钠、硒酸钠和硒蛋氨酸对体外培养淋巴细胞DNA、RNA和蛋白质合成,ATP含量及GSH—px活性的影响,以比较3种硒化合物的毒性。结果表明3种硒化合物对DNA、RNA和蛋白质合成均有双相效应,在10~(-4)mol/L时亚硒酸钠抑制率高于硒酸钠和硒蛋氨酸(P<0.0001),ATP含量随硒浓度增加明显低于对照组。3种化合物的毒性顺序为:亚硒酸钠>硒酸钠>硒蛋氨酸。在实验浓度范围内GSH—px活性均高于对照组。     

ADAM10基因对肝癌细胞HepG2生物学特性的影响

目的探讨ADAM10基因对肝癌细胞HepG2增殖、侵袭、迁移等生物学特性的影响。方法采用RNA干扰的方法抑制肝癌细胞HepG2中ADAM10基因的表达,通过细胞增殖实验和集落形成实验检测该基因沉默前后肝癌细胞HepG2增殖等生物学特性的改变,通过细胞侵袭实验和细胞迁移实验检测HepG2侵袭、迁移等生物学特性的改变。结果 ADAM10基因沉默后细胞增殖能力下降(P<0.05);细胞体外侵袭能力、迁移能力显著下降(P<0.05)。结论 ADAM10基因表达变化参与原发性肝癌的发生、发展,ADAM10基因的高表达能促进肝癌细胞HepG2的增殖、侵袭和迁移能力。     

Nucleostemin基因特异性RNA干扰对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响.方法 阳离子脂质体法将构建好的NS siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表达情况,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V FITC/PI法检测细胞凋亡率.结果 与对照组相比,S组细胞的增殖减慢,24、48、72h细胞增殖抑制率分别为53.21%、71.54%、87.47%;NS基因表达量下降,G0/G1期细胞百分率显著升高(58.34%),S期细胞减少(20.68%),细胞凋亡率增加(26.85%).结论 RNA干扰技术可抑制胃癌SGC 7901细胞株NS基因的表达,使细胞增殖减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增加.     

大鼠PER2基因RNAi慢病毒载体的构建及干扰效率的测定

目的构建及筛选有效干扰大鼠血管平滑肌细胞PER2基因的shRNA慢病毒载体,并测定其干扰效率。方法设计大鼠PER2的siRNA靶序列,插入慢病毒载体质粒pGLV-U6-EGFP中,构建pLentivirus-per2-rat表达重组体并转染至A7r5大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞内,利用Real-time PCR方法检测PER2基因的mRNA表达水平,筛选有效沉默钟基因PER2表达的RNAi慢病毒载体。结果经电泳、基因测序证实插入的目的序列正确,有PER2表达,成功构建了pLentivirus-per2-rat表达重组体;转染慢病毒载体pLentivirus-per2-rat至A7r5大鼠胸血管平滑肌细胞,测定转染效率达70%;Real-time PCR检测PER2基因的mRNA相对表达量,筛选出有效干扰大鼠血管平滑肌细胞钟基因Per2表达的siRNA片段,使PER2mRNA表达量下调约84%。结论成功构建了大鼠PER2的RNAi慢病毒载体,为进一步研究时钟基因的功能奠定了基础。     

长链非编码RNA-TDRG1高表达对宫颈癌临床进展及预后不良的影响

目的探讨长链非编码RNA睾丸发育相关基因1 (lncRNA-TDRG1)在宫颈癌组织中的表达特征及其与临床进展和预后的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测宫颈癌组织(60例)和相应毗邻正常宫颈组织(60例)中lncRNA-TDRG1的表达,比较不同年龄、FIGO分期、肿瘤细胞分化程度以及淋巴结转移患者宫颈组织中lncRNA-TDRG1的表达差异;并在4种不同类型宫颈癌细胞株(SiHa, HeLa, CaSki, C-33A)及正常宫颈细胞株Ect1/E6E7中验证其差异表达。卡方检验分析lncRNA-TDRG1表达水平与患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验绘制生存曲线,比较生存差异。同时,进行单因素和多因素Cox回归分析,分析生存数据。结果 lncRNA-TDRG1在宫颈癌组织、宫颈癌细胞株中均呈高表达。宫颈癌组织中lncRNA-TDRG1的表达和癌细胞分化程度(高中分化vs低分化,P=0.019),以及淋巴结转移情况(有vs无,P=0.037)有显著相关性。同时,宫颈癌患者高表达lncRNA-TDRG1时,表现出更差的总体生存预后(P<0.05)。单因素和多因素分析显示,lncRNA-TDRG1高表达是宫颈癌患者预后不良的危险因素(P=0.006)。结论 lncRNA-TDRG1在宫颈癌进展和预后中起十分重要的作用,可能作为宫颈癌患者预后的生物标志物。     

siRNA抑制hTERT对脑胶质瘤T98G细胞增殖及周期的影响

目的研究人端粒酶逆转录酶被抑制后胶质瘤细胞系体外增殖及周期的变化,以期寻找控制胶质瘤细胞恶性行为的有效途径。方法人工合成小干扰RNA(siRNA)序列,并将其通过lip2000转入体外培养的T98G胶质瘤细胞系中,荧光显微镜观察转染效率,免疫印记检测蛋白表达情况,MTT法检测细胞体外增殖表现,绘制生长曲线图,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果成功转染siRNA,并有效抑制人端粒酶逆转录酶的活性,免疫印记验证干扰效果可靠,体外可抑制胶质瘤细胞的增殖,与对照组比较其抑制效率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外条件下,可以通过siRNA有效抑制人端粒酶逆转录酶,从而有效抑制胶质瘤细胞的体外增殖,使胶质瘤细胞周期发生变化。这可能为胶质瘤的治疗带来新的启示。     

基因

基因是遗传的物质基础,是DNA或RNA分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列。基因通过复制把遗传信息传递给下一代,使后代出现与亲代相似的性状。从这段简短的医学解释不难看出基因对下一代的影响,优秀的基因可以遗传给下一代,使下一代同样优秀。在汽车领域也同样存在着类似于遗传学的规律。优秀的品牌基因和车型基因一起影响着新一代车型。其实Mini最初的设计初衷是一台小巧的家用车,但由于JohnCooper的加入使得Mini融入了赛车基因,     

肿瘤相关长非编码RNA的表达及调控机制的研究进展

肿瘤相关性长非编码RNA的研究尚处于方兴未艾的阶段,其表达与肿瘤侵袭、转移及预后有着密切的关系,但是有关其转录调控的研究仍然比较少见。本文介绍了长非编码RNA的组织细胞表达、与肿瘤侵袭转移和患者预后的关系、转录调控和表观遗传学调控研究的现状,探讨了本研究领域将来的发展方向。     

Peroxiredoxin1基因沉默对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721放射增敏的研究

目的 探讨Peroxiredoxin (Prx)1基因的小分子干扰RNA(siRNA)对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的放射增敏作用及机制.方法 通过逆转录PCR方法研究Prx家族(Prx1～6)在人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中的mRNA表达谱;使用siRNA敲低HepG2和SMMC-7721细...