促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的相关性

目的观察阿霉素(ADR)耐药的人慢性粒细胞白血病细胞株K562/AO2在ADR和雄黄作用下细胞活力、凋亡及加入Caspase-3抑制剂前后Caspase-3酶活性的变化,探讨促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的关系。方法①四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定药物作用下细胞株的细胞活力(A值);②DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA断裂情况;③酶显色活性分析法(CAA)测定Caspase-3活性水平的变化。结果①MTT法:K562/AO2细胞的A值与雄黄呈时间、剂量依赖关系。②雄黄作用组有凋亡发生。③未加抑制剂组Caspase-3活性明显升高(P<0.05),对雄黄呈时间、剂量依赖关系,加入抑制剂后此关系消失,对ADR无此关系。结论Caspase-3酶活性水平的变化能显著影响药物诱导肿瘤细胞凋亡的能力,在肿瘤耐药的发生发展中起着重要的作用。     

用RP-HPLC法分析地尔硫在兔体内的药动学及组织分布

以尼群地平为内标,用反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定兔口服地尔硫后血浆和组织器官的药物浓度。药动学符合二房室模型。主要参数∶Ｔ１／２（α）＝０．５１ｈ,Ｔ１／２（β）＝６．１１ｈ,Ｔ１／２（ｋａ）＝０．２５ｈ,Ｔ（ｐ）＝０．５２ｈ,口服２ｈ后在胆汁、血、脾、心、肾、肝、大脑和小脑药物浓度分别为∶０．５５９ｍｇ／Ｌ、０．３７５ｍｇ／Ｌ、４．５６２μｇ／ｇ、０．７７１μｇ／ｇ、１．０９３μｇ／ｇ、１．４３９μｇ／ｇ、０．３５９μｇ／ｇ和０．７４１μｇ／ｇ。     

人血浆中茶碱的效液相色谱测定法

茶碱是临床上常用的抗喘药,它对支气管哮喘的疗效早已被肯定,但由于即使同一剂量的茶碱,在某些人为线性代谢,而另一些人已经出现非线性代谢。所以其在人体内的代谢存在着十分明显的个体差异,又由于茶碱是有一定毒性的药物,因此,有必要对人体血浆中茶碱的浓度进行监测,而建立一准确、快速、简便的监测茶碱血药浓度的测定方法,是确定其合理给药方法的前提。本文旨在建立人血浆中茶碱的高效液相色谱测定方法,并从准确性、重复性、专一性等方面对其进行考证,说明该方法符合生物样品的分析要求,以确定合理的给药方法。     

DCE-MRI Extended tofts模型和Reference Region模型在肺部结节/肿块良恶性诊断中的应用价值

目的对比分析定量动态增强磁共振(DCE-MRI)药代动力学Extended tofts模型与Reference Region模型应用于肺结节/肿块良恶性鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析65例肺部结节/肿块(良性22例,恶性43例)病例资料,所有患者均在CT引导下行肺穿刺活检或手术前行DCE-MRI检查。分别应用Extended tofts和Reference Region模型测量良恶性肺结节/肿块的定量参数:容积转移常数K~(trans)(min~(-1))、组织间隙-血浆速率常数K_(ep)(min~(-1))、细胞外间隙容积分数V_e(mL)。采用独立样本t检验比较良恶性病变各定量参数之间的差异。以病理结果为金标准绘制ROC曲线评估定量DCE-MRI鉴别肺结节/肿块良恶性的诊断效能。结果 Extended tofts模型中K~(trans)、K_(ep)对肺部结节/肿块良恶性有鉴别意义(P<0.05)。Reference Region模型参数K~(trans)、K_(ep)在良恶性病变间差异无统计学意义。结论在时间分辨率较高的前提下,Extended tofts模型比Reference Region模型更适合应用于肺结节/肿块良恶性鉴别诊断,其定量参数K~(trans)较K_(ep)的诊断效能高。     

中小型条形药包爆破技术

３１８国道和中尼公路的路堑石方开挖中，采用中小型条形药包爆破技术获得成功，装卸时间完成２８万ｍ＾３的石方爆破任务，取得了一次爆破基本成形的效果，同时保证了安全，结合工程实践就爆破的设计，施工及经济效益做介绍，以供读者参考。     

郑州市428例结核分枝杆菌耐药结果分析

目的:了解郑州地区2005～2007年间结核病人中结核分枝杆菌的耐药情况。方法:采集428例痰检阳性结核病人的晨痰进行培养,分别接种于含有五种不同抗结核药物的培养基培养,培养结果与不含药物培养基的培养结果进行比较,若比值≥75%即为耐药。结果:分离出的结核杆菌的三年平均耐药率为41.36%,平均耐多药率为11.67%;耐药菌中以人型结核杆菌居多;青壮年病人中结核杆菌的耐药发生率较高。结论:应严格执行结核病治疗的用药原则,减少耐药结核菌的产生,提高结核病治愈率。     

甲基莲心碱抑制K562/A02细胞GST-π的表达

目的探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)对谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)的影响。方法应用MTT法测定甲基莲心碱处理的K562/A02细胞对阿霉素(ADM)敏感性的影响。RT-PCR法分析Nef处理后,GST-πmRNA转录的变化。通过Western Blot观察Nef对GST-π蛋白表达的影响。结果甲基莲心碱对K562/A02的耐药性具有明显的逆转作用。用Nef处理后,对阿霉素药物敏感性的相对逆转效率第1天、第3天和第5天分别为9.6%、41.4%和10.7%;GST-πmRNA转录水平在用药后第3天下调最大,为(50.7±2.3)%。GST-π蛋白的表达于用药后第1天、第3天和第5天分别下降25.57%、48.42%和10.68%。结论甲基莲心碱具有较强的逆转K562/A02细胞多药耐药的作用,其逆转机制可能包括下调K562/A02细胞GST-πmRNA的转录和蛋白的表达。     

紫杉醇诱导人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及DNA polβ、mdrl、mrpl、GST-π、lrp和topo Ⅱ基因的表达

目的体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系，观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdrl、mrpl、GST-π、lrp和topo Ⅱ的表达及意义。方法以紫杉醇为诱导药，采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20；MTT法检测A549／TXL20对紫杉醇、顺铂、长春新碱、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素的耐药指数（RF）；细胞克隆形成法测定A549／TXL20对紫杉醇的敏感性；高效液相色谱测定细胞内紫杉醇的浓度；RT-PCR法测定人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20中DNA polβ、mdrl、GST-π、mrpl、lrp和topoⅡ的基因表达。站杲①A549／TXL20形态不规则，较亲本细胞略小，核／浆比增加，倍增时间没有明显变化；②A549／TXL20对紫杉醇的RF为19．3，对顺铂的RF为67．4，对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和顺铂等抗癌药物有不同程度的耐药性；③A549／TXL20对紫杉醇的敏感性降低，其紫杉醇的含量较亲本细胞下降；④A549／TXL20细胞中 DNA polβ、mdrl、GST-π、mrpl、lrp的基因表达量分别较A549细胞中的表达量明显增加，差异具有统计学意义（P〈0．05）。站论建立了相对稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20，其耐药机制可能与mdrl、GST-π、mrpl、lrp和DNA polβ基因的高表达有关。