两种实时定量RT-PCR方法检测miRNAs表达的技术分析

目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取rno-miR-15b、rno-miR-16、rno-miR-195、rno-miR-497作为研究对象,分别用茎环引物和试剂公司提供的试剂盒方法反转录总RNA,并应用实时定量PCR方法检测这些miRNAs的表达量。提取人血浆中总RNA,用上述两种RT-qPCR方法实时定量检测has-miR-16的表达量。结果两种方法检测这些miRNAs表达量,在大鼠21d和42d这两个时间点其表达量变化趋势相同,都呈现增高的趋势,这与我们前期Solexa测序结果相同。在血浆中的结果显示,其中茎环引物反转录方法灵敏度相对较高。结论茎环引物法在少量几个重要的miRNAs检测中具有优势,而试剂盒方法适用于大量miRNAs的筛查。     

血浆代用品——海脉素在骨科手术中的应用

目的 为证明海脉素在应用是一血浆代用品。方法 观察骨科择期手术中需要输血的大中手术２０例，出血量在１０００ｍｌ以下，术中静滴海脉素５００－１０００ｍｌ，均未予输血，结果 输入海脉素后能维持患者的血流动力学的基本稳定，手术前后血常规，血生化测定比较常虽有差异性，但各值均在正常范围之内，患者出现不良反应。结论 海脉素是一种安全、有铲、便利、快速的较理想的血浆代用品。     

库存血液胆碱酯酶水平变化

观察库血保存天数与血浆胆碱酯酶水平变化关系；探讨急性重症有机磷农药中毒抢救中合理选择用于换血疗法或者输入的血源。方法输血前随机留取保留不同天数的库血测定血浆ＣＨＥ值；血液中心采血当日留取正常人血浆、即日测定ＣＨＥ值对照组。ＣＨＥ测定用ＢＭ公司的胆碱酯酶试剂盒，Ｂｏｃｈ公司的Ｃｏｂａｓ－ＦａｒａⅡ自动分析仪测定。结果库血保存天数６－１１、１２－１７、１８－２１三组血ＣＨＥ值与正常对照组比较，均显著低     

慢性肾脏病患者血清硒元素水平及其与临床指标的相关性

目的探究血浆硒含量在我国慢性肾脏病(CKD)患者各个阶段的严重程度及与临床指标相关性。方法检测107名研究对象(包括23名健康对照、10名CKD3期、11名CKD4期、45名CKD5期、6名腹膜透析及12名血液透析患者)的基本临床指标和硒、铁、铜、钙、钾、磷6项元素的血浆含量。结果随着患者肾功能不全的进展,患者血浆中的硒元素不断下降,尤其在终末期接受血液净化治疗的患者中,以腹膜透析患者血浆中硒含量最低;CKD患者血浆硒含量与血白蛋白、血总胆固醇、血三酰甘油呈正相关,与甲状旁腺素、血尿素氮及血肌酐水平呈负相关;CKD不同分期患者的血浆硒含量与钙元素呈正相关。结论 CKD患者普遍存在低血硒,且与病情严重程度及临床指标相关,应深入研究,以期为低硒地区人群精确补硒及CKD发病率的防治提供坚实的理论依据。     

Development and validation of analytical method for the estimation of lamivudine in rabbit plasma

Lamivudine has been widely used in the treatment of HIV disease. A reliable, sensitive reversed phase high performance liquid chromatography （RP-HPLC） method was developed and validated for lamivudine ...     

Sensitive determination of 4-O-methylhonokiol in rabbit plasma by high performance liquid chromatography and application

A novel high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of 4-O- methylhonokiol in rabbit plasma and was applied to its pharmacokinetic investigation. Plasma samples were treated by one-fold volume of methanol and acetoni     

双波长薄层扫描法测定血浆中硫酸奎尼丁浓度

本文报道用薄层扫描法测定血浆中硫酸奎丁尼浓度,方法简便灵敏。血浆样品用氯仿提取后,直接点于硅胶GF_(254)板上,以环己烷:氯仿:二乙胺(5∶4∶2)为展开剂,斑点于岛津CS-930扫描仪在λs=237nm,λ_R=257nm处进行扫描。在0.4μg～8.0μg之间,线性关系良好,平均回收率为98.78%。为临床监测硫酸奎尼丁的血药浓度及动力学研究提供了可行方法。