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41.
42.
《西安交通大学学报(医学版)》2016,(4):478-483
目的构建稳定表达EYFP荧光蛋白的HeLa细胞作为阴离子(卤素)通道阻断剂筛选的细胞模型,为高通量筛选阴离子(卤素)通道阻断剂提供条件。方法通过基因重组技术构建表达YFP突变蛋白(EYFP-H148Q/I152L)和puromycin抗性的慢病毒载体。将慢病毒载体和包装质粒混合物转染包装细胞293T细胞产生慢病毒颗粒,感染HeLa细胞,进一步利用抗性基因对细胞进行puromycin筛选,纯化细胞并扩增至所需细胞量。采用实时定量PCR和Western blot方法检测目的基因EYFP-H148Q/I152L的表达效率。并验证EYFP-HeLa稳转细胞系作为卤族离子通道阻断剂筛选模型的活性。结果基因测序验证了目的基因成功插入慢病毒载体。RT-PCR和Western blot检测结果显示,目的基因在HeLa细胞中实现了过表达。荧光显微镜下观察到EYFP-HeLa稳转细胞株能够表达特有的EYFP黄色荧光,效率接近100%。碘离子(I-)(低渗)溶液刺激细胞阴离子(卤素)通道的开放,内流的I-能够使黄色荧光淬灭。结论构建的EYFP-HeLa细胞系能够稳定表达EYFP黄色荧光蛋白,对内流入细胞的I-敏感,可以作为理想的阴离子(卤素)通道阻断剂的筛选模型。 相似文献
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1 概述 近年来,随着国外客户对煤炭质量要求的不断提高,我国港口对外贸煤炭的除铁、除杂及筛选工作愈来愈重视,各煤炭输出港口纷纷加装除铁除杂设备.大港一般是在原有固定装船线上加装该类设备,其投资大,建设周期长.对于无煤炭专用装船线的中小型港口,这种方案的实施受到一定限制.为此,我们针对自己港口的特点,研制出一种新型移动式除铁除杂筛选设备.从1999年10月正式投产以来,运行良好,效率高,煤炭质量完全达到客户要求(煤炭杂质率不超过0.02‰).现对该设备的原理、结构特点、性能参数作一介绍. 相似文献
44.
宏基因组学及其技术的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
宏基因组学是研究生态群体基因功能和其相互作用的新科学领域,以特定生态环境中微小生物遗传物质的总和作为研究对象,基本研究策略是通过克隆、异源表达,筛选出有用的新基因及其产物。宏基因组学为生命学科和药学研究提供了一个强有力的新技术,并在包括医学在内的许多领域取得了新成就。本述评对宏基因组学的概念、技术和应用作了简要介绍。 相似文献
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以具有抗肿瘤抗菌活性的产孢子海洋真菌Aspergillus unguis DLEP2008001为出发菌株,对其采用介质阻挡放电等离子体技术进行了诱变处理.在采用肿瘤细胞替代模型——DNA损伤修复基因缺陷型的大肠杆菌E coli AB3027进行突变株活性筛选的过程中,比较了三种筛选方案,最终确定了一种使用96孔板液体摇床发酵的筛选方法,该方法与通常的液体深层发酵有较好的对应性,且方便易行.通过该方法,灵敏快捷的筛选出了基于DNA损伤机制的高活性突变株,同时也显示介质阻挡放电等离子体技术对提高该菌株生物活性具有显著效果. 相似文献
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47.
针对采用拉维娜行星齿轮机构和传统多挡变速器的并联混合动力构型选择,采用基于杠杆法以挡位设计规则、动力特性规则、工作模式规则、可制造性规则相结合的一种综合评价方法,对混合动力系统构型进行分析和筛选,并确定了构型方案和该方法的筛选流程。其次针对整车的设计目标,对发动机、电机的参数进行了选择,并运用GT-SUITE软件搭建整车纵向动力学模型。在此基础上,采用Pareto前沿对变速器参数进行了优选,最终在确定混合动力构型的基础上,优选确定了混合动力系统的设计参数,并通过仿真验证了方案的可行性,为采用拉维娜行星齿轮机构和传统多挡变速器的并联混合动力系统研究提供了理论依据。 相似文献
48.
局口车号自劝识别系统(ATIS)必须保证对列车100%识别.本文提出了在现有系统基础上增加数据筛选计算机改进方案,以提高局口ATIS的识别率,资金投入少,效果明显. 相似文献
49.
平西高速公路生态恢复适用技术研究 总被引:7,自引:0,他引:7
公路路域生态恢复是一个技术难题,特别是对于西宁这样的生态环境比较脆弱的地区,本研究从平 西高速公路的路域特点出发,通过对气候、土壤和高速公路特点的分析,参考本地区植物演化方向,从两个方面研 究生态恢复适用技术,一是从植物本身特性出发,通过多种植物的有效组合,以适应当地的土壤和气候条件;第二 个是通过不同的建植方法,改善土壤和小气候条件,以促进植物群落的正常发育。 相似文献
50.
钛纳米聚合物涂料在酸性水罐的应用 总被引:7,自引:3,他引:4
对硫磺车间的酸性水气体装置中的酸性水罐存在的严重的应力腐蚀问题进行分析。对防腐涂料进行了筛选 ,确定采用钛钠米聚合物涂料作防腐涂层。通过 1年的使用证明其达到了提高酸性水罐使用寿命的目的。 相似文献