瘢痕疙瘩间充质干细胞的分离与培养及其生长曲线的研究

目的探索获得瘢痕疙瘩来源的高纯度间充质干细胞(MSCs)的培养方法。方法来源于第四军医大学唐都医院皮肤科住院的4例患者的瘢痕疙瘩标本,所取病变部位均位于前胸及后背皮肤,采用DMEM∶F12/(100mL/L)胎牛血清(FBS)初步培养,再改用低糖DMEM/(100mL/L)FBS培养,接着用低糖DMEM/(10mL/L)FBS培养,最后用无血清的干细胞培养基(SCM)培养,并通过观察细胞形态特征及应用流式细胞术检测细胞表面标记物的表达情况进行鉴定。结果经血清梯度培养后得到了长梭形、形态均一,纯度较高的纤维样细胞,经流式细胞仪检测后细胞表面标记物表达情况为:CD29为99.99%,CD44为99.7%,CD45为0.69%,CD73为99.96%。结论血清浓度逐渐降低的梯度培养法可获得高纯度的瘢痕疙瘩MSCs。     

别克君威轿车车身电气系统

四、音响系统与车载电话 1．CD音响系统别克君威2．0G、2．5GL车型装用单碟CD音响系统,CD机供电电路见图1。电路640是蓄电池供电电路,常电源电路用来维持音响各种设置的记忆。电路43是点火供电电路,当此端供电时,CD机才能工作。电路8是CD机面板照明调光电路,CD机面板亮度受变光器开关控制。     

富士通前置六碟CD机芯正时校对

目前笔者见过富士通CD机机芯共有两种,两种机芯均应用于丰田、雷克萨斯车系,将其中一种正时校对方法介绍给大家。此种机芯较松下前置六碟CD机机芯相比,结构更简单, 但此种机芯由于传动机构和碟夹均采用较为单薄的塑料材质, 且由于冬季天气寒冷刚开机时车内温度低,误操作很容易造成塑料机构损坏,一旦更换则需重新校对正时,以下为机芯正时校对图,如图1所示。     

高手DIY之加装音频输入口

当车载CD机没有普及以前,多数汽车原配音响音源多为磁带收放机。而现在一些车型的低配置版本仍然使用磁带机。可是现在好听的流行歌曲多为CD或MP3格式,以磁带方式发行的新歌几乎绝迹,这让磁带收放机几乎要“隐退江湖”了。联想到现在各种海量的MP3．MP4、iPod播放器,它们使用方便。音质也越来越完美。真想把原车音源与它们连接起来．让面临“下岗”的磁带播放机焕发出新的活力。当然,如果去更换一台支持MP3功能的CD机是最省事的方法,但是这怎么会有DIY的乐趣呢？何况可以节约几百上千元。于是我一边边收集资料,一边开始了一次“高难度”的DIY。虽然说过程比较复杂。但是成功过后的喜悦与成就感也会是成倍增加的。[编者按]     

公路山岭隧道洞口“零开挖”单向出洞施工技术研究

为研究公路山岭隧道单向安全出洞方案,以广东梅平高速公路育豪隧道为依托,通过结合育豪隧道工程特点及原设计情况,将隧道出洞端明暗交界桩号由ZK12+654调整为ZK12+656,在距离洞口明暗交界处10m范围内(ZK12+646～ZK12+656),上台阶开挖采用CD法,采用双层小导管超前支护,并利用MIDAS/GTS对隧道ZK12+646～ZK12+656段开挖进行了数值模拟,分析结果得出:最大沉降为8.1mm,最大水平位移为3.0mm。对施工过程中的隧道变形情况进行监测,ZK12+643累计拱顶沉降量和周边位移量分别为15mm、13mm,ZK12+651累计拱顶沉降量和周边位移量分别为11mm、10mm。监测结果验证了该出洞方案的可行性,并在实际应用中取得了良好的效果,可为同类隧道工程提供参考。     

国内CD级润滑油质量水平及企业评定方法的建立

参照美国评定ＣＥ级发动机润滑油的康明斯ＮＴＣ－４００热箱试验，用康明斯６ＢＴＡ ２５０ｈ可靠性试验对国内几个有代表性石化企业生产的ＣＤ级柴油机油进行了评定。试验结果表明，几种ＣＤ级柴油机的质量水平差别很大。康明斯６ＢＴＡ ２５０ｈ可靠性试验对油品质量上的差异有明显的反应，可以作为ＣＤ级以上柴油机的企业评定方法。     

CD95L和TGF-β在与胰岛细胞共同培养的Sertoli细胞上表达

目的　观察生物半透膜 (BSM)包裹胰岛样细胞团 (ICCs)与富含Sertoli细胞的睾丸样细胞团 (SC)体外培养时 ,Sertoli细胞是否同时表达CD95L和TGF β基因及体外抗免疫排斥作用的效果。方法　BSM包裹猪ICCs和SC ,与人淋巴细胞进行培养。免疫组化染色观察CD95L、TGF β的表达。通过测定胰岛素浓度和刺激释放实验 ,AO PI荧光双染色和TUNEL染色 ,观察培养细胞的结构功能状况。结果　ICCs和SC共同培养时 ,许多Sertoli细胞表达CD95L和TGF β蛋白。与淋巴细胞培养后 ,胰岛素分泌良好 ,刺激释放实验比值 >2 0 ,AO PI荧光染色超过 95 %的细胞存活 ,TUNEL染色未发现凋亡细胞。结论　Sertoli细胞与胰岛细胞共同培养时可出现CD95L和TGF β同时表达的微环境     

人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究

目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果　Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定 ,未见质粒丢失 ,目的蛋白的表达不受影响 ,且在 3 7℃诱导 5h、IPTG终浓度为 4mmol·L- 1 时其表达量最多。结论　证明了利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)的可行性。     

ROLE OF PERIPHERAL LYMPHOCYTES SIALYL LEWIS（X） （CD15s） ANTIGEN BEFORE AND AFTER KIDNEY TRANSPLANTATION

Objective To investigate the role of peripheral lymphocytes Sialyl Lewis（x） （CD15s） antigen before and after kidney transplantation. Methods Flow cytometry technique was applied to examine the expression of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen after renal transplantation, and to evaluate various therapeutic regimen. Results The statistic analysis results of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression level showed that there was significant difference among the patients with acute rejection, long-term dialysis and with normal renal function post-transplant; significant difference of CD15s expression level between group of rejection and infection; no significant difference of CD15s expression among the different groups treated by various therapeutic regimens. Conclusion The different therapeutic regimen has no influence to CD15s expression; Detection of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression periodically, intelligently make convenience to understand suitable status of immunosuppression.