通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

单纯疱疹病毒2型gG-2"独特区"基因的原核表达及其血清学诊断价值

目的在大肠杆菌中表达HSV-2的gG-2"独特区"基因(gG-2T)并对其免疫学特性进行初步研究。方法克隆HSV-2的gG-2T,并在大肠杆菌中表达gG-2T融合蛋白。通过Western blot和间接ELISA鉴定融合蛋白的活性。结果通过原核系统表达的gG-2T融合蛋白可以与GST多克隆抗体结合并在46 ku附近出现特异性结合条带。并且能够与确诊的HSV-2患者血清反应,而不与HSV-1患者血清和正常人血清反应。结论获得了HSV-2 gG-2T融合蛋白,它可以与GST多克隆抗体特异性结合并且可以同HSV-2型患者血清特异性反应;获得的gG-2T蛋白为研究以gG-2蛋白作为靶区域的诊断试剂盒和疫苗研发打下实验基础。     

北盘江石板寨水库泥沙准二维数学模型研究

通过对北盘江石板寨河段实际情况的勘察,结合历史流量和输沙率资料,采用准二维泥沙数学模型对石板寨水库有堰和无堰两种设计方案进行了计算比较.最后给出了无堰方案更有利于确保电站及水库的安全运行的结论.     

简支变连续梁法加固多跨T梁桥效应分析

多跨简支T梁变连续加固措施是多跨简支T梁桥加固改造、提高承载能力的行之有效的方法.但实践中发现该方法存在着一定的问题.以跨径为16.76m+16.76m的两跨简支T梁为例,通过理论分析计算表明,该方法在提高跨中抗弯承载能力的同时,却降低了中间支点处梁的抗剪承载能力.建议在采用此方法加固多跨简支T梁的同时应对中间支点梁的抗剪能力进行加固.     

SNS柔性防护技术在边坡危岩防护中的应用

SNS柔性防护系统具有施工快捷、方便、环保、美观等独特的优势,应用于庐江至铜陵高速公路边坡危岩防护中．替代传统的加固防护措施,解决了在山区复杂环境地质条件下传统防护措施施工困难、进展缓慢等难题。     

基于J2EE体系结构的在线考试系统的研究与设计

通过对RUP开发过程及J2EE架构中的多层模型的分析,研究并设计了在线考试系统,克服了传统设计方法的弊端,体现了本设计方法的优越性,为建立性能优良的在线考试系统提供了一条新途径．     

利用GAUSSIAN计算NO在TiO2(110)表面吸附和脱附

运用GAUSSIAN半经验分子轨道理论计算一氧化氮(NO)吸附在二氧化钛(TiO2)的(110)面上的Ti5O10原子簇模型,以Ti-NO结合方式的Ti5O10原子簇模型的计算结果表明NO在Ti5O10表面容易发生化学吸附,其吸附的方式为桥式化学吸附,吸附反应放出大量的能量,其能量值为-279.406 kJ/mol,但在热脱附进行过程中,这个稳定的吸附状态,经过一个过渡态,向另一个稳定态发生变化.在整个反应过程中吸附状态的能量最低,说明了吸附的稳定性.     

一个新的二元copula类

建立了一个新的二元copula类,并证明了它所包含的二元函数是正二次相依的;同时给出了新的copula类的应用和相依性的讨论.     

兔肾VX2移植瘤模型的建立及其超声显像检测

目的比较建立兔肾VX2移植瘤模型的不同方法的优劣。方法分别用瘤液穿刺法、瘤块液种植法、瘤块包埋法建立兔肾VX2癌模型。采用超声技术动态检测肿瘤体积及CDFI的变化,确定该模型最佳实验干预时段及其血流参数范围。比较各自的成瘤率;观测肾脏肿瘤的大小及其回声、瘤内血管生成以及血流阻抗等指标。结果瘤块包埋法可建立稳定的兔肾VX2移植瘤模型。B超可以实时、准确、方便的监测肿瘤体积及血流动力学变化。结论兔肾VX2移植瘤是一种造模方法简便且成瘤率高的肾癌动物模型,采用超声技术能精确、无创的动态监测肿瘤体积变化及血流特征。     

过滤技术在TiO2回收中的应用

TiO2生产厂的污水中含有大量的TiO2粒子,如果不回收而排放,不仅会造成原料的大量流失,而且造成环境污染.为解决TiO2生产厂家所面临的这一难题,在分析过滤机理的基础上,利用流体力学理论和机电一体化控制原理,结合工业污水性质和钛白粉的特性开发了一种全自动、高精度反冲洗过滤器,用以回收污水中的钛白粉.