增强型绿色荧光蛋白标记的Hela细胞株的建立

目的构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系。方法PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性。结果PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80%Hela细胞内均可见绿色荧光。加入含G418的选择性培养基进行选择性培养,选择荧光较强的Hela细胞经有限稀释,持续筛选及克隆化培养,获得稳定表达绿色荧光的Hela细胞克隆,扩大培养并传至10代以上,将此细胞株命名为Hela-EGFP。激光共聚焦显微镜观察发现:在蓝光(-395nm)激发时,Hela-EGFP细胞绿色荧光激发波长为395nm,最大发射峰为509nm。结论Hela-EGFP细胞株具备稳定表达EGFP的能力,为实时可视化进行宫颈癌侵袭转移机制的研究奠定了基础。     

贝雷法不同CA参数下沥青混合料的压实性能

通过沥青混合料旋转压实密实曲线来评价沥青混合料的压实性能,提出了4个参数CEI、TD、IK1、K2来反应沥青混合料施工及使用阶段的压实特性。在此基础上分析贝雷法不同CA参数的沥青混合料压实难易程度。并基于路用性能和施工特性提出贝雷法CA参数的合理范围。     

某拱式结构施工中组合拱架的变形分析

以某大跨度6连拱式水利渡槽为分析对象,利用堆栽试验和仿真计算2种方法对其钢管立柱与贝雷梁组合拱架在施工中的变形进行分析。得出钢管立柱与贝雷梁拱架系统的弹性变形及非弹性变形规律,并通过对比分析得到拱架底模系统在施工中的变形规律,为该渡槽后续施工提供技术指导。     

渡槽贝雷钢拱架稳定性及承载能力分析

以悬拼贝雷钢拱架施工拱圈的某拱式渡槽为背景,通过对拱架结构的稳定性及承载能力进行分析,揭示拱圈现浇过程中拱架的力学行为,并对拱架不同约束形式下其稳定性和承载力的变化进行比较,得出拱架采用固结约束较铰接能显著提高拱架稳定性且不降低拱架承载能力的结论,可为以后类似工程设计施工提供参考。     

贝雷法在Superpave沥青混合料设计中的应用

采用贝雷法对大量Superpave沥青混合料配合比设计数据进行了分析,提出在Superpave沥青混合料配合比设计过程中引入贝雷法作为级配组成的评价和混合料性能预测的辅助工具,并根据分析研究结果,提出在混合料不同最大公称粒径和不同层位的应用时,对贝雷法参数取值范围进行适当调整。     

采用加强型贝雷梁基础的桥梁支架施工工艺

在公路、市政桥梁建设中,桥梁施工支架系统采用钢管立柱门洞、贝雷梁架门洞及型钢门洞等形式作为跨越通行道路或河道的方法,各地的操作工艺已经非常成熟,但是大跨径的门洞搭设为数不多,也未见理论性指导和操作规程的归属。本文以某高架桥的施工作为工程实例来阐述贝雷梁在桥梁支架系统中的应用。     

基于传统CIC抽样滤波器的改进与仿真

文章分析了传统CIC（Cascade Intergrator-Comb）滤波器幅频响应不理想的原因,并针对其问题提出了分别用级联余弦滤波器以及增益补偿滤波器来改善其性能。仿真结果表明,改进后的CIC滤波器阻带衰减有26dB的提高,且通带特性有良好的改善。最后其实现结构特性表明,改进后的CIC滤波器在实际应用和深入研究中有着现实意义。     

贝雷支架原位现浇铁路简支箱梁施工技术

以温福铁路简支箱梁采用贝雷支架原位现浇代替移动模架制梁施工技术为例,系统介绍了贝雷支架结构体系设计、支架结构检算,以及贝雷支架拼装、贝雷支架现浇施工注意事项。     

一种大跨度桥梁抢修方案

针对单孔跨径约100 m的桥梁遭到严重破坏的情况,提出一种运用装配式公路钢桥与斜拉索的抢修方案,进行了结构设计,应用ANSYS软件对主要构件进行了受力分析,计算结果表明方案基本可行.     

观音湖圣莲岛贝雷式钢便桥的设计与使用

观音湖圣莲岛钢便桥采用贝雷式321型桁架单元,总长度(46×12m+6m+4×12m),其中50跨为上承式结构,边跨(第1跨)为下承式结构。介绍了设计荷载、设计水位的选取、便桥的结构布置及设计注意事项,提出了钢便桥使用维护措施。通载试验表明设计符合要求。实际使用表明,圣莲岛钢便桥安全可靠,加快了圣莲岛开发建设进度。