应用PCR技术克隆人乳头瘤病毒16型E6基因

为进一步研究与宫颈癌发生密切相关的人乳头瘤病毒16型E6基因的转化作用,我们运用PCR技术扩增HPV16 E6 DNA,以pUC—19为载体,大肠杆菌了JM103为宿主菌,组建了质粒pRCE6经限制性核酸内切酶和Southern转印杂交证实,其插入片段约为0.5Kb,含有全部HPV16 E6序列。该质粒的组建为检测HPV感染中mRNA转录提供了特异性的早期基因探针。同时为进一步研究HPV16 E6基因的转化作用及转化蛋白打下基础。     

人白介素17受体样分子的克隆及表达

目的　构建带有 6×myc的人白介素 17受体样分子的重组表达质粒 ,以便检测hIL 17RLM L基因在真核细胞中的特异性表达。方法　设计带有酶切位点 (EcoRⅠ和XhoⅠ )的特异性引物 ,用PCR方法扩增hIL 17RLM L片段回收后插入带有 6×myc标签的 pcDNA3.0真核表达载体 ,转染COS7细胞后作Westernblot检测其表达。结果　成功地构建了带有 6×myc标签的 pcDNA3.0 6×myc /hIL 17RLM L重组质粒 ,Westernblot检测到该质粒可在真核细胞中表达。结论　用分子生物学的方法成功地构建了真核表达质粒pcDNA3.0 6×myc /hIL 17RLM L ,使该基因的特异性检测成为可能 ,为进一步研究hIL 17RLM L的生物学功能奠定了基础。     

关于水泥就地冷再生路面设计及施工技术的探讨

结合辽宁省普通公路近年来应用水泥冷再生技术的工程实践,论述了水泥冷再生路面的设计要点和施工工艺。     

维拉帕米及苯肾上腺素对人输卵管的作用

本文分别观察了维拉帕米(Ver)和苯肾上腺素(PE)对离体人输卵管平滑肌的药理作用及与月经周期的关系。结果表明,PE对人输卵管壶腹及峡部肌均产生收缩效应,酚妥拉明可对抗之,在峡部肌,其增生期的PD_2、PA_2值均大于分泌期,环、纵肌之间无差别。Ver抑制人输卵管平滑肌活动并可对抗PE的作用,其分泌期的PD’2值大于增生期。人输卵管的这种药理特性提示,峡部纵肌与环肌的α受体在调节卵运行上是同样重要的。     

正常人脑氢质子磁共振波谱的研究

目的建立正常人脑额叶、基底节和海马各部位氢质子波谱的正常值标准。方法对160例健康志愿者(青年组和老年组各80例)额叶、基底节和海马进行波谱研究,测定各部位NAA、Cr、Cho的峰下面积并计算NAA/Cr、NAA/Cho、NAA/(Cr+Cho)、Cr/NAA、Cr/Cho、Cr/(NAA+Cho)、Cho/NAA、Cho/Cr、Cho/(Cr+Cho)。结果正常人脑上述比值无性别和部位差异(P>0.05),青年组与老年组间部分比值有显著性差异(P<0.05)。结论氢质子波谱测定应以波峰下面积的比值作为诊断标准,不需要考虑部位和性别因素,但需考虑年龄因素。     

早期人胚神经干细胞分布及分离培养

目的　研究发育早期人胚脑神经干细胞的形态特征及其分布情况 ,并观察其体外生长分化特性。方法　计划生育流产的 6～ 12周胚胎大脑组织切片用vimentin抗体进行免疫组织化学染色 ,光镜观察。机械分离皮质细胞 ,用无血清培养基和含血清培养基进行悬浮和贴壁培养 ,分别用MAP2 、GFAP及GalC抗体进行免疫细胞化学染色 ,鉴定干细胞和神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结果　发育早期大脑Vimentin阳性细胞分布广泛 ,细胞形态单一 ,多呈圆球形 ,体积较小。体外培养的大脑皮质细胞在培养的第 5～ 7天时 ,形成较多克隆 ,可多次传代 ;贴壁培养时细胞发生分化 ,分别为MAP2 、GFAP、GalC阳性的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结论　胚胎发育早期大脑神经干细胞分布广泛 ,形态单一 ,皮质Vimentin阳性细胞数量多 ,便于分离 ,是最佳神经干细胞分离部位 ;人NSCs可以在体外增殖并发生多向分化     

人U_6启动子表达载体的构建及在胃癌细胞中的活性鉴定

目的构建人U6(hU6)snRNA启动子驱动的小RNA分子的表达载体,并在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞中鉴定其表达外源性小RNA分子的活性。方法以人基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hU6snRNA启动子序列,并将其克隆入PUC19载体中,命名为PUC-hU6-extra,经测序证明其序列的正确性;用脂质体法转染SGC-7901细胞;用RT-PCR检测U6启动子的转录活性,并测定培养细胞的生长曲线。结果hU6snRNA基因启动子和紧接转录起始点hU6snRNA的前27个核苷酸被成功地克隆入PUC19质粒载体,重组载体在SGC-7901细胞中能高表达小分子RNA,并且未观察到后者对细胞体外增殖的影响。结论成功构建了以hU6snRNA启动子驱动的、能在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞内高效转录小分子RNA的表达质粒PUC-hU6-extra。     

优化配合比设计方法及其对施工成本的影响

在配合比设计中 ,通过考虑技术上和经济上两方面的要求 ,得出在满足技术要求的同时 ,配合比设计对工程施工成本的影响 ,并提出了优化配合比设计的技术方法 ,对控制施工成本很有现实意义     

宪法应增设几项公民的刑事程序权利

党的十六大提出要尊重和保障人权。通过宪法确认和保障公民基本权利是法治国家的标志。而公民基本权利中最重要的是涉及保障公民人身自由和安全的权利，即公民在刑事司法程序中的权利。参考国际人权公约和各国宪法的规定，我国宪法第二章应当增设无罪推定、不被强迫自证其罪等几项重要的刑事程序权利。     

爆炸法制备钛基体羟基磷灰石涂层试验研究

采用爆炸法制备了钛基体羟基磷灰石涂层，利用热力学和爆轰波原理获得爆炸的各种参数，用爆轰波理论分析了试验的结果。由于曲面波的原因，造成涂层不均匀、试件变形较大，而含铝复合涂层较为均匀。为制备稳定的钛基体羟基磷灰石涂层提供了一种新方法。