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目的制备、鉴定兔抗葎草花粉蛋白多克隆抗体,并初步应用于葎草花粉致敏蛋白组分的筛选。方法用葎草花粉变应原浸液免疫兔,获得高效价抗葎草花粉蛋白抗血清,应用琼脂免疫双扩散、ELISA法以及Western blotting鉴定产生的抗体。同时对葎草花粉过敏性哮喘患者血清进行Western blotting检测。结果兔抗血清效价经ELISA检测,效价>1∶10000,免疫双扩散结果表明抗血清只与葎草花粉变应原形成特异性IgG沉淀线,Western blotting检测兔抗血清IgG可以特异性识别葎草花粉8种蛋白组分,分子质量分别为100、88、76、69、65、55、49、38 ku,患者血清IgG可以识别5种蛋白组分,分子质量分别为100、76、55、493、8 ku。结论制备的兔抗血清具有较高效价和较好的特异性,应用该血清筛选出的葎草花粉致敏蛋白组分与患者血清筛选的组分相似,因此可进一步应用于初筛cDNA表达文库。 相似文献
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目的 通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因cDNA克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法 应用PCR技术从T细胞cDNA文库获得饰胶蛋白全长基因cDNA片段 ,并克隆到pUC1 9载体中 ,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA序列 ,将测序正确的饰胶蛋白cDNA序列插入pGEX 4T 1表达载体中 ,经BamHI和EcoRI双酶切后 1 2 %凝胶电泳鉴定 ,IPTG诱导表达产物经SDS PAGE分析。结果 克隆的饰胶蛋白cDNA序列与GenBank中AF1 3830 0记载的序列完全一致 ,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值(65 6KD)也一致并为可溶性蛋白。结论 本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了GST Decorin融合蛋白 相似文献
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2006年8月16日中午11时许,永康交警大队世雅中队民警在值班时,接到群众举报,有两辆号牌号码相同的五菱车就停在永康市芝英环城西路路段。 相似文献
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采用酚/氯仿抽提、乙醇沉淀提取人基因组DNA,根据GenBank报道的序列设计引物,PCR扩增人β-干扰素核基质结合区(matix at tachment region,MAR),琼脂糖凝胶电泳鉴定,连接T-载体,测序,分析其序列特征。结果显示PCR扩增出800bp条带,与预期片段大小相符。测序结果显示克隆的片段序列和报道的序列同源性为97%,克隆的DNA片段具备典型的MAR特征。结果显示我们成功从人基因组克隆了人β-干扰素MAR序列。 相似文献
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庞蒂克自从2002年起便推出了和丰田Matrix互为双生的Vibe车型,而新款庞蒂克Vibe已是第二代车型,它保留了原有的动感风格,但造型更加圆润,“crossover”风格也符合当今消费者多元化的需求。 相似文献
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本文讨论了产油作物脂肪酸相关基因的研究进展,以及克隆和鉴定产油作物脂肪酸脱饱和酶具有的重要理论价值和应用前景,为产油作物的进一步经济开发提供一定的理论依据。 相似文献
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目的 运用生物信息学技术研究人多发性骨髓瘤MMSA-1(GenBank:AY952881)基因表达蛋白的二级结构和B细胞抗原表位,并制备多克隆抗体.方法 应用DNAStar Protean软件提供的模块分析和预测MMSA-1蛋白的二级结构和B细胞抗原表位.采用多通道同步固相全自动合成系统合成15肽,免疫健康新西兰成年家兔,制备相应的多克隆抗体.结果 MMSA-1蛋白含有较多的β折叠和转角结构.综合柔韧性、亲水性、抗原性、表面可能性、二级结构、偶联难易及实验难度等因素,选取了MMSA-1蛋白序列318~333位作为抗原表位,即SSSLLPQSPAPTEHL,15肽合成产物经HPLC纯化和质谱检测,纯度达到98.65%,序列正确.免疫兔子获得血清抗体采用层析柱纯化,ELISA检测效价:1∶6000.结论 本研究为基于人MMSA-1抗原表位手段的免疫治疗研究提供了理论依据. 相似文献
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为明确参与γ 射线诱导HL 60 细胞凋亡的caspase 家族成员,根据已知caspase家族成员保守肽序列设计简并引物,经RT PCR从凋亡HL 60 细胞m RNA扩增出一条带,通过基因克隆及序列测定进行鉴定。结果克隆出caspase 3 cDNA的一段序列。说明caspase 3 参与了γ 射线诱导的HL 60 细胞凋亡,可能是该凋亡途径的枢纽元件 相似文献