内皮素受体基因在冠心病患者外周血中表达及意义

目的 研究内皮素受体基因（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇｅｎｅ Ａ，ＥＴＡ）在冠心病患者外周血中的表达情况，探讨其临床意义，并建立外周血ＥＴＡ基因的ＲＴ－ＰＣＲ检测方法。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测外周血循环中ＥＴＡ基因表达水平。结果 ３５例冠心病患者中有３０例出现阳性条带，阳性率为８５％。对照组２０例中有１６例阳性，阳性率为８０％。对两组中出现的阳性条带应用义作半定量分析，冠心病患     

未来的符号——力帆“劲车族”

在大排量摩托车日益风靡之时,力帆紧跟时代步伐,经过对市场的长期调研和发展战略的精密部署,在产品研发上循序跟进,产品线上升级拓新,时至今日,其孕育多年的大排战略终于日渐明了,在保持通路产品优良品质的同时,又在高端产品线上有了巨大突破。力帆,首次将"劲车族"系列产品纳入推广阵容,厚积薄发,准备开启新的征程。     

汽车营销渠道模式与通路管控

纵观汽车企业营销渠道现状，大体可分为两种模式：一种是间接营销渠道模式，另一种是直接营销渠道模式。文章从分析比较两种营销渠道模式及其优缺点入手，分别探讨了两种渠道模式的通路管控。     

层黏连蛋白及其受体在正常绒毛和绒癌组织中的表达及意义

目的探讨层黏连蛋白(LN)及层黏连蛋白受体(LN-R)与滋养细胞侵袭的关系。方法采用免疫组织化学的方法,观察正常早期妊娠绒毛和绒癌组织中LN、LN-R的表达。结果在正常绒毛组织中从绒毛、细胞柱到浸润的绒毛外滋养细胞,随着滋养细胞侵袭力的增加,LN及LN-R的表达呈下降趋势。绒癌组织的LN表达较正常绒毛明显减弱,两组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论在滋养细胞侵袭的过程中,LN和LN-R起着重要作用。     

PBRRI： A Hybrid Peer-to-Peer Communication Model in Distributed Systems

In distributed systems independent agents need to interact with each other to accomplish their task. Modern peer-to-peer computing technologies always concern with enabling interaction among agents and help them cooperate with each other. But in fact, access control should also be considered to limit interaction to make it harmless. This paper proposed a proxy based rule regulated interaction (PBRRI) model. Role based access control is introduced for security concerns. Regulation rules are enforced in a distributed manner so that PBRRI can be applied to the open distributed systems such as Internet.     

黄芪甲苷改善高糖诱导的足细胞损伤和线粒体功能障碍并抑制Notch通路激活

目的 研究黄芪甲苷对高糖诱导足细胞损伤和线粒体功能障碍的保护作用及其分子机制。方法 构建高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导足细胞损伤模型,分别用低、中、高剂量黄芪甲苷与高糖共处理细胞;CCK-8检测细胞活性,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,试剂盒检测ATP含量,Western blotting检测凋亡及足细胞损伤相关蛋白和Notch通路相关蛋白表达水平。结果 与control组相比,HG组细胞活性降低、细胞凋亡水平增加(P<0.05),抗凋亡蛋白(Bcl2)表达降低,凋亡蛋白(Bax、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3)表达升高(P均<0.05);和HG组相比,HG+AS-IV组改善高糖诱导的细胞活性和细胞凋亡水平(P<0.05),抗凋亡蛋白(Bcl2)表达升高,凋亡蛋白(Bax、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3)表达降低(P均<0.05);和control组比较,HG组细胞线粒体发生功能障碍,JC-1单体含量升高,ATP含量降低(P均<0.05);和...     

人促甲状腺激素受体A亚单位蛋白在昆虫细胞体系中的分泌性表达

目的 拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor, TSHR) A亚单位蛋白。方法 将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)基因连接到质粒,并通过转化、蓝白斑筛选获得重组杆粒,将其转染入sf9昆虫细胞收获重组杆状病毒,扩增并测定滴度。最终通过蛋白印迹实验鉴定重组蛋白的表达并优化表达条件。结果 在蛋白表达体系的构建过程中,PCR鉴定和测序均证实了重组质粒和重组杆粒序列的正确性。将重组杆粒转染入细胞后观察到病毒出芽迹象,空斑实验鉴定P1代病毒的滴度为2×10⁷pfu/m。蛋白印迹显示重组蛋白分子质量为55 ku,主要在培养基中。蛋白表达的最佳感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1,最佳感染时程为72 h。结论 本研究构建了TSHR A亚单位的昆虫细胞杆状病毒表达体系,该体系能够外泌性表达分子质量为55 ku左右的蛋白TSHR 22-289,且蛋白能够成功...     

AG490抑制M2样巨噬细胞JAK2/STAT3通路影响胃癌细胞增殖和凋亡

目的 探讨JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490对M2样巨噬细胞功能表型的调控作用,以及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 采用佛波酯(PMA)体外诱导人单核细胞系THP-1分化为M0型巨噬细胞,分别用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)诱导为M1样表型,IL-4和IL-13诱导为M2样表型,并应用免疫荧光标记CD68、CD86和CD206鉴定。RT-qPCR检测巨噬细胞的CD163、Arg1、CCL22、PPARγ、IL-10、IL-20和TNF-α的mRNA表达。Western blotting检测JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达。JAK2/STAT3抑制剂AG490处理M2样巨噬细胞,检测M2表型的标志基因。分别将巨噬细胞与胃癌细胞共培养,通过CCK-8法、划痕实验、Transwell小室基质胶侵袭实验及流式细胞术检测巨噬细胞对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。制备裸鼠MKN45胃癌异种皮下移植瘤模型,造模后连续20 d观察肿瘤大小及质量。结果 AG490处理的M2样巨噬细胞时,P38MAPK、JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低...     

TRPC6参与内质网应激诱导的肾小球系膜细胞凋亡

目的 探讨TRPC6离子通道在内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)诱导的肾小球系膜细胞(HBZY-1)凋亡中的作用及机制。方法 实验分为正常对照组(NC)、thapsigargin(TG)、TG+SKF96365和TG+TRPC6siRNA组。qRT-PCR和Western blot技术检测TRPC6和ERS相关蛋白(GRP78和Caspase12)的mRNA和蛋白表达。流式细胞术和Hoechst33258方法检测细胞凋亡。Fluo-4AM Ca²⁺成像技术测定细胞内Ca²⁺内流(intracellular calcium,[Ca²⁺]i)的变化情况。结果 TG组细胞出现核浓缩或核碎裂为特征的凋亡形态变化,细胞凋亡率增加。TRPC6和ERS相关蛋白(GRP78和Caspase12)的表达明显高于NC组(P<0.05)。SKF96365和TRPC6 siRNA预孵育HBZY-1细胞可减轻细胞凋亡(P<0.05)。TG刺激后[Ca²⁺]i也增加(P...     

家兔心肌缺血后α－受体在心律失常发生中的作用

利用家兔在体心肌缺血模型研究了儿茶酚胺排空、α－受体激动剂和α－受体阻断剂对心肌缺血后心律失常发生率及心肌细胞单相动作电位的影响。结果表明，利血平排空儿茶酚胺及α－受体阻断剂酚妥拉明可明显降低心肌缺血时心律失常的发生率；并使心肌有效不应期和动作电位时程延长；α－受体激动剂甲氧胺则具有相反作用。提示α－受体激动在心肌缺血早期具有重要的致心律失常作用。