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1.
《西安交通大学学报(医学版)》2019,(3):459-464
目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。 相似文献
2.
本文主要介绍了大跨度空间三维曲面钢管桁架的制作过程,以及对其尺寸精度和焊接质量的控制,有效地解决了三维空间尺寸平面化和焊接变形及收缩内应力的控制。 相似文献
3.
地铁屏蔽门系统构成分析 总被引:2,自引:0,他引:2
文章较详细地介绍了广州地铁使用的屏蔽门系统,重点是它的机械和电气部分的组成和作用. 相似文献
4.
丁诺 《现代城市轨道交通》2005,(6):63-63
2005年底,北京地铁1、2号线和八通线地铁站内将设置“E拍通”,该设备可用于市政交通“一卡通”IC卡充值、乘车路线和路况查询,还可以提供购买游戏点卡、电信充值卡、电影票、演出票等小额购物服务。乘客只需在检票口把IC卡对着电子感应屏轻轻一晃,就可以通过“剪式”门,进入地铁站台,这种验票机1mm可以查验40人左右。 相似文献
5.
6.
陈中杰 《电力机车与城轨车辆》2007,30(6):49-50,54
分析地铁限界中抗侧滚扭杆对车辆动态包络线的影响及车辆与站台间隙问题,并提出在标准中增加相关内容的建议。 相似文献
7.
8.
热环境分析是地铁筹建的一个重要课题,而地铁站台是否采用屏蔽门又必须从经济和技术等各方面去综合评价。本论述了影响地铁环控系统初投资和运行费用的因素,并结合实际工程对站台屏蔽门方案进行了技术经济分析。 相似文献
9.
10.
赵铁柱 《城市轨道交通研究》2017,20(5)
随着城市轨道交通飞速发展,站台门得到广泛运用,其设计工作量以及业主对站台门BIM(建筑信息模型)设计需求与日俱增。为了提高设计质量与效率,研究站台门系统结构组成、安装设计工艺与模型特征参数,利用遍历命名技术与基于模型特征化的三维设计技术,开发了站台门参数化三维建模软件。实现了站台门参数化建模和自动装配,提供了可视化模型,并在5 min内响应设计方案,为站台门BIM设计打下基础。 相似文献