Preparation of recombinant firefly luciferase by a simple and rapid expression and purification method and its application in bacterial detection

A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence.     

工程量清单计价与定额计价的差异分析

建设工程实行工程量清单计价已开始推行。此文在介绍采用工程量清单计价的优点和意义的基础上,阐述工程量清单计价与定额计价存在的根本差异(定价方式和价格范围),并对存在的差异进行原因分析。通过分析与研究,提出缩小2种计价方式存在差异的应对措施:根据项目工期要求和对市场价格变化的预测,批复初步设计概算时应充分考虑预备费;缩短定额计价更新期,及时更新人工单价和主要材料价格;依据施工图编制工程量清单,研究开发工程量清单计价及管理系统软件,合理确定标的。     

浅谈企业经济增长差异中的人力资源因素

本文对人力资源和经济增长各进行了全面的阐述,并探究了人力资源因素与经济增长差异的关系,探讨了造成企业经济增长存在差异的因素,并且分析了缩小我国企业经济增长差异的人力资源政策。     

婴儿型脊肌萎缩症的产前基因诊断

对一婴儿型脊肌萎缩症家系统进行前基因诊断。；方法用ＰＣＲ－酶切技术对一家系孕１７ｗ的风险的胎进行ＳＭＮ基因外显子７缺失的检测。结果此风险胎儿ＳＭＮ基因外显子７缺失可继续妊娠。结论婴儿型脊肌萎缩症可通过产前基因诊断避免患儿出生。     

有关量、单位和符号的一般原则

为促进科技期刊的标准化、规范化,《城市交通》杂志遵循国际单位制和中华人民共和国法定计量单位的有关规定,表达量值时,在公式、图表和文字叙述中一律使用单位的国际符号。常见量、单位和符号见表1。此外,下述用法也较为常见:     

高速公路拓宽路基差异沉降影响因素研究

为了研究差异沉降对高速公路拓宽路基的影响,通过Ansys有限元计算分析软件,建立差异沉降力学计算模型,系统分析路基拓宽方式、填筑高度、拓宽宽度和土基模量对拓宽路基差异沉降的影响。研究结果表明:路基采用两侧对称加宽的方式对差异沉降的控制明显优于单侧加宽;随着路基拓宽高度与宽度的不断增加,路基产生的竖向沉降也在逐渐增大,新路基产生的竖向沉降大于旧路基,最大值出现在新路基路肩位置附近,而旧路基中心线处竖向沉降值最小;随着路基填土模量的不断增大,新旧路基产生的竖向沉降与竖向应力在逐渐减小,新路基沉降大于旧路基沉降,沉降峰值出现在新路基路肩附近。     

隐喻的语义理解及其跨文化差异比较

隐喻不仅是一种修辞手段，而且是一种思维方式，是人们的认识、思维、经历、甚至行为的基础，要学好一种语言，了解、正确理解与文化相关的隐喻是非常重要的。文中从语义理解入手．对英汉隐喻的跨文化差异从文化根源差异和英汉隐喻关系差异进行深入比较，有助于读者更好地学习英语隐喻，培养地道英语的思维习惯，提高理解和表达英语的能力。     

浅谈机械专业学生图形表达和识图能力的培养

对工程图学教学中广泛的几何抽象方法进行了描述，对图形表达和识图训练进行了试验，指出了各阶段的训练目的和重点，提出了对图形表达与识图训练的一种模式。     

英语同义词描述维度观察

对同义词的研究重点通常放在历史成因、分类方法及差异性辨析等方面，且止于此。文中提出在此之后还需更进一步：整体观察任一基本意义已知的全部维度，进而分析和比较在英语语言里都有哪些维度拥有独立的词汇，使英语从这些维度对这一基本意义进行描述。在这里用维度这一概念来囊括各种导致同义词差异的特性，包括语义差异、感情色彩、文体特征等。这样做可实现包括对可能存在的未知词汇进行预测，以及转换词汇扩展为维度的扩充与补足，从而提高词汇学习趣味与效率等的原有做法无法实现的积极效果。     

渤海秋冬季偏北大风海陆风力差异的研究

由于缺乏海上常规风的观测资料,气象部门在日常制作和发布海上风力预报时,存在预报不准确,同时也无法了解海上风力预报的准确率.为了解决这个问题,消除航运企业和海事安全管理人员对气象部门所作风力预报的不正确理解及其对指导日常安全生产的影响,依据有关学者对渤海各海区风力的调查统计和研究结果,对渤海秋冬季偏北大风的海陆风力差异情况,以及渤海海陆测站风力的日变化情况进行了重新统计分析和归纳总结.由此分别得到了在渤海出现东北大风和西北大风时.渤海西部、中部和海峡等各海区风力与塘沽站的差值.以及海上平台站与海岛站和陆地站在白天和夜间的风力差异.这些定量结果将便于航运企业和海事安全管理等部门更好地理解气象部门所发布的大风预报,更好地指导船舶安全生产.