双靶向诱导超抗原TSST-1基因重组逆转录病毒的包装及鉴定

目的包装出携5拷贝缺氧反应元件(5 HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合调控的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)基因的逆转录病毒,并建立稳定表达TSST-1的人结肠癌Lovo细胞株。方法应用已构建好的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5 HRE-CEAp-TSST-1-linker-CD80TM,与辅助质粒pMB-MLV、pMB-G共转染入293T细胞,LaSRT法检测病毒滴度。包装出的逆转录病毒感染CEA阳性的人结肠癌细胞株Lovo和CEA阴性的人宫颈癌细胞株Hela。应用RT-PCR和免疫组化方法鉴定TSST-1的表达。结果获得重组逆转录病毒滴度约为1×106CFU/mL。RT-PCR及免疫组化证实经病毒感染的Lovo细胞在mRNA和蛋白水平均有TSST-1表达,缺氧环境中的mRNA表达量更高,且细胞传代20次后依然有TSST-1 mRNA表达;经病毒感染的Hela细胞在常氧或缺氧状态下均无TSST-1 mRNA及蛋白表达。结论包装出较高滴度重组逆转录病毒,并能靶向性在CEA阳性肿瘤内稳定表达TSST-1,为后续检验TSST-1对肿瘤的杀伤效应奠定了基础。     

Rh抗原缺失Dc-型抗体研究

目的 研究Rh抗原缺失患者血清中抗体性质和效价.方法　结合其临床表现和家系调查,利用血型血清学方法对RhDc -孕妇体内的抗体性质及效价进行分析.结果 患者血型为B、Dc-型,其亲代血清学表型为父AB、Dccee型,母O、DCCee型,患者血清中存在IgM及IgG抗-Hr0,效价分别为128、512;IgM及IgG抗-e,效价分别为16、8.结论 国内外有报道在RhD-和Rh-患者中查到1gG性质抗-Hr0,在RHDc -患者体内查出IgM和IgG性质的抗-Hr0和抗-e在国内外尚属首次报道;该患者体内RhEe缺失可能的原因为RHCE基因的遗传和变异;IgM型抗-Hr0会干扰血型检测,导致ABO正反定型不符,在临床工作中应引起注意.     

乳腺癌癌旁组织中PCNA、c-erbB-2、p53、ER、PR基因的表达

目的 通过检测乳腺癌癌旁组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、C-erbB-2、p53、雌激素受体(estrogen receptor, ER)﹑孕激素受体(progesterone receptor, PR)蛋白的表达,探讨适合中国女性保乳手术的安全切除范围.方法 收集40例乳腺癌根治术患者的切除标本,将每一标本分为癌肿区和癌旁区,癌旁区再划分为癌旁1cm、2cm、3cm及>3cm组.采用免疫组化SP法检测以上5组乳腺组织中非典型增生的发生率以及PCNA、c-erbB-2、p53、ER、PR蛋白表达的差异.结果 距离原发癌肿越远,癌旁组织发生非典型增生以及c-erbB-2、p53蛋白阳性的比例越低(P<0.05);癌旁1cm、2cm组高危因素(非典型增生以及c-erbB-2、p53)的比例明显高于3cm组(P<0.05),而癌旁1cm与2cm组间比较未见统计学差异(P>0.05);PCNA、ER、PR在癌旁组织中的表达与组织分化、淋巴结转移无明显关系(P>0.05).结论 在乳腺癌保乳手术中,推荐以癌旁2cm作为安全切除范围.     

Significance of carbohydrate antigen 50 expression in colorectal carcinoma

Objective To evaluate the significance of carbohydrate antigen 50 (CA50) expression in colorectal carcinoma. Methods Immunohistochemical staining was used to detect CA50 expression in 10 cases of normal colorectal mucosa and 40 cases of cancer mucosa. Results The expression of CA50 increased in normal colorectal mucosa, cancer distant mucosa, cancer adjacent mucosa and cancer mucosa, and there were significant differences among them (P<0.05). The expression of CA50 in colorectal carcinoma was correlated with the degree of differentiation, Duke's stage and lymphatic metastases (P<0.05). Conclusion The expression of CA50 can be used as a valuable index in evaluating the biological characteristics and prognosis of colorectal carcinoma.     

西安市与上海市百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性、耐药相关分子特征及多位点抗原序列分型的比较研究

目的 比较西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性、耐药相关分子特征及多位点抗原序列分型(MAST)特征,为改进我国百日咳的防治和疫苗策略提供参考。方法 采用E-test法检测2018年至2019年西安市和上海市临床分离百日咳鲍特菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的耐药性;采用PCR法检测可水平转移的耐药基因与耐药相关突变位点;采用MAST方法对菌株进行分型,比较两市菌株耐药性的差异及抗原序列型别构成比的差异。结果 本研究共分离出百日咳菌株60株,其中西安市34株,上海市26株。西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌对大环内酯类抗生素的耐药性存在统计学差异(χ²=13.650,P<0.001)。两市菌株MAST分型型别构成比也存在统计学差异(χ²=18.642,P<0.001),西安市菌株以prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1型别为主,而上海市prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1与prn2/ptxP3/ptxA1/fim3-1/fim2-1型别几乎各占一半。两市所有耐药株...     

基于分类回归树的中国健康成年男性血清CA19-9参考值冷热点联合空间分布

目的为临床制定中国健康成年男性血清糖类抗原19-9(CA19-9)参考值统一标准提供科学依据。方法建立9 382例分布于全国64个市县的健康成年男性血清CA19-9参考值数据库,结合主成分分析、变异系数、相关分析进行地理指标体系降维并建立分类回归树模型;依据2 322个观测数据点绘制血清CA19-9参考值冷热点联合空间分布图。结果血清CA19-9参考值空间分布总体表现为南高北低,东北地区的吉林、辽宁等地高于中东部地区。热点多分布于南部地区,冷点多分布于北部地区。结论健康成年男性CA19-9参考值空间分布存在差异性,临床诊断需考虑地域性差异。     

vIL-10对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈“操纵子”表达的影响

目的研究病毒白介素-10(vIL-10)对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"表达的影响。方法收集不同时间段vIL-10处理的鼻咽癌细胞(CNE-1和CNE-2),采用RT-PCR、Western blot方法检测vIL-10处理的鼻咽癌细胞中MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"(TAP-1、2,LMP-2、7及HLA-I)表达的变化。结果1mRNA水平:CNE-1和CNE-2的TAP-1水平在不同时间点均未表现出显著差异;vIL-10作用1、4、6、12h时,CNE-1和CNE-2的TAP-2、LMP-2均未出现变化,24h时,两者均出现显著下降甚至消失;CNE-1在vIL-10作用后4h即出现LMP-7下降,而CNE-2在vIL-10作用后6h出现下降;在vIL-10作用24h时CNE-1和CNE-2的HLA-I出现显著下降。2蛋白水平:vIL-10作用后24h时,两种细胞的TAP-1均出现显著下降,TAP-2则在vIL-10作用后1、6、12、24h出现逐渐下降;CNE-2的LMP-2、LMP-7在vIL-10作用后随时间逐渐下降,而CNE-1的两种蛋白仅在作用后12h出现显著下降;HLA-I在vIL-10作用后出现下降趋势,但在CNE-1中各时间段变化无统计学差异,CNE-2在24h显著下降。结论 vIL-10可明显抑制鼻咽癌MHC-I类分子抗原加工和提呈的"操纵子"的表达,并且呈一定的时间依赖性。     

急性髓系白血病免疫治疗的研究进展与展望

大多数急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者化疗诱导缓解后不可避免地面临复发。异基因造血干细胞移植作为AML最有效的治疗,通过免疫介导的移植物抗白血病效应根除白血病细胞,能有效预防AML复发。移植技术和单倍体移植模式进展使得"人人都能进行造血干细胞移植"。靶向治疗,如基因工程T细胞(嵌合抗原受体T细胞)、单克隆抗体、新型双特异性单抗,能特异性杀伤表达特殊抗原的白血病细胞,而不伤害正常细胞,将成为AML免疫治疗的新策略。研究发现高表达于急性单核细胞白血病细胞的新抗原急性单核细胞白血病相关抗原-34(monocytic leukemia associated antigen-34,MLAA-34)具有抗白血病细胞凋亡作用,且MLAA-34多肽可诱导特异性CTL杀伤活性,具有较强的免疫原性,MLAA-34可作为急性单核细胞白血病免疫治疗新的理想靶抗原。总之,新近进展有价值的免疫治疗白血病相关抗原的鉴定有可能根除化疗后白血病微小残留病变,有望降低AML复发,延长AML患者生存。     

沉默HLA A2表达的骨髓间充质干细胞安全性的研究

目的探讨人白细胞抗原A2(HLA A2)表达沉默后人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的安全性。方法实验分为对照组(正常培养至第8代细胞组)及实验组1和实验组2(分别为HLA A2表达沉默后第5代、第15代)。复苏HLA A2表达沉默的hBMSCs,通过观察细胞的生长曲线、端粒酶活性和抑癌基因P27的表达水平、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)和Cyclin D2的表达水平,分析细胞的安全性。并将细胞接种于裸鼠的皮下,24周后观察荷瘤组织的种类。结果实验组1、实验组2与对照组相比,细胞生长曲线没有明显的左移或右移。HLA A2表达沉默的hBMSCs在沉默HLA A2表达后,3组间的端粒酶活性没有明显差异;3组的Cyclin D2、CDK4和抑癌基因P27的表达量也没有明显变化。细胞接种于裸鼠皮下24周,只有异位成骨,而没有形成肿瘤组织。结论人BMSCs的HLA A2表达沉默后,在实验周期内,没有明显证据表明有安全性的改变。     

肺癌患者放疗前后血清LCA的检测及其临床意义

采用混合单克隆抗体金标免疫斑点法对46例肺癌患者放疗前后及30例肺良性病和20例正常对照血清的肺癌相关抗原（LCA）进行检测。结果表明：肺癌患者放疗前LCA的阳性率为97．83％，明显高于正常对照（0％）及肺良性病（13．33％）（P＜0．005）；放疗后LCA的阳性率为82．61％，较放疗前明显下降（P＜0．05），LCA的阳性率在不同病理类型、临床分期及近期疗效间无显著性差异（P＞0．05）。