通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

供应链中的企业合作强度

提出评价供应链绩效的供应链企业合作强度的新概念.影响企业间合作强度的主要因素是供应链中企业的竞争力和合作企业之间的合作阻力系数.假设企业合作强度与企业竞争力成正比,与企业合作阻力系数成反比,构建了企业合作阻力系数的计算方法.在此基础上构建了供应链相邻节点企业之间和企业整体合作强度的计算模型.计算模型中考虑了综合收益和综合成本两个参数,并分别针对整个合作过程提出了具体的计算方法.     

全面从严治党背景下高校基层党组织活动载体建设研究

本文根据全面从严治党这一背景对高校提出的要求,对当前高校基层党组织活动载体建设现状进行分析与总结,针对当前高校基层党组织活动载体建设存在的问题,深入挖掘并创新组织生活模式、宣传教育手段和具体活动载体,探索研究高校基层党组织活动载体建设的新方式新模式,积极创新和发现更多符合高校师生特点的活动载体,从而提升高校基层党组织建设科学化水平。     

政府与高校合作创新产学合作模式之初探

在新的社会主义经济形式和高校自主办学权不断扩大的情况下,除了企业和高校的合作之外,作为中国政治和经济生活中主体的政府能否积极、有效地参与到产学研合作的实践中来?这的确是一个值得深入研究的课题。文中结合广东省交通厅与广东交通职业技术学院合作运作广东省机动车驾驶培训教练员考试中心的例子对政府与高校创新合作的产学结合模式进行了初步探讨。     

企业合作动力的定量评价方法

提出了基于平衡理论和期望理论的企业合作动力的定量化方法,为定量研究企业合作关系提供新的视角.通过分析企业合作动力的构成因素,给出了企业合作动力的计算流程图.基于期望理论,给出了合作目标期望动力的计算方法.基于平衡理论,提出了企业实际平衡系数、修正平衡系数和缓冲值的计算方法,并建立了修正平衡系数的滞后模型;分析了企业采取行动的3个必要条件,即实际平衡系数、总的缓冲值和修正平衡系数必须满足一定的取值范围;构建了企业不平衡动力的计算模型.在此基础上,通过计算企业外部合作阻力,给出了企业合作总动力的计算方法.     

以专业服务市场——恒通客车倾力打造公交运输方案解决专家

重庆恒通客车,客车制造的先行者,伴随着今年品牌建设在恒通客车的逐渐深化,新一轮的销售战略初见成效,仅半年内就开拓了多个新市场,使其市场覆盖率更大;而对于一直以来合作的老客户,恒通客车凭借其专业的公交客车研发技术和完善的售后服务,也在半年时间里获得了不少订单.     

交通需求管理在中非合作论坛期间的应用

2006年11月中非合作论坛北京峰会(以下简称"峰会")期间实施的多项交通需求管理策略,保障了"峰会"期间交通的正常运行.针对"峰会"期间公共交通客运量、道路交通量、车辆运行速度以及市民对交通管理措施的反应等展开调查,结果显示,"峰会"期间的道路交通运行状况明显好转,市民普遍反映良好.在调查数据分析和道路交通运行分析的基础上,总结了实施交通需求管理的经验,并对北京市的日常交通及奥运会交通管理提出建议.     

合力建设长江黄金水道推动四川水运快速发展

一、合力建设长江黄金水道,对促进四川经济社会发展意义重大长江水运作为我省综合交通运输体系的重要组成部分,作为进出川大宗物资、特种物资和旅游、短途客运的重要交通方式,对经济社会发展起到了重要的支撑作用。同时,水运还有力地促进了四川的对外开放,促进了四川与沿江兄弟省市的交流与合作,促进了区域经济一体化进程。1．加快长江黄金水道建设,是四川沿江地区经济社会快速发展的重要基础     

粤港两地加速推进物流合作

3月初，“首届粤港物流合作治谈会”与“香港物流服务博览2004”在广交会进行。这是两地政府机构首次联手搭建促进两地物流台作的桥梁。另外，在CEPA利好的刺激及背后政府强力推动下,粤港两地制造业，零售业,交通运输业以及第三方物流企业对两地加速推进物流合作取得的实质性进展表现出浓厚兴趣。     

构建"长三角"公交合作的运行机制

在中国加入WTO的背景下,"长三角"经济一体化的进程加快.面临机遇和挑战的"长三角"公交合作需要构建规则规范、互利互惠、协商协调等运行机制,使区域公交携手驶上快车道,创造出紧密、规范、高效的合作模式.