基于CRISPR对大肠埃希菌O157∶H7的检测

目的基于成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR),建立对大肠埃希菌O157∶H7的新型检测方法。方法应用PCR扩增实验室保存的443株肠道细菌(310株非O157∶H7大肠埃希菌、35株大肠埃希菌O157∶H7、89株志贺菌和9株沙门菌)的CRISPR1和CRISPR2,并将PCR产物测序;提取CRISPR database数据库中(标准法)100株肠道细菌(47株非O157∶H7大肠埃希菌、5株大肠埃希菌O157∶H7、9株志贺菌和39株沙门菌)的CRISPR1和CRISPR2序列。使用CRISPR Finder在线软件分析PCR产物测序序列和CRISPR database数据库的CRISPR序列。Clustal X软件进行间隔序列比对。比较标准法和PCR扩增CRISPR两种方法检测大肠埃希菌O157∶H7的一致性。结果共分析543株肠道细菌,其中75.6%的非O157∶H7大肠埃希菌、75.5%志贺菌、91.7%沙门菌和95%O157∶H7大肠埃希菌含有CRISPR1,其间隔序列数目为3~26、2~9、2~32、3。57.1%的非O157∶H7大肠埃希菌、77.6%志贺菌、85.4%沙门菌和100%O157∶H7大肠埃希菌含有CRISPR2,其间隔序列数目为1~20、1~6、2~27、1或4个。95%的O157∶H7大肠埃希菌的CRISPR1和90%CRISPR2分别含有3条独特间隔序列(S1-1,S1-2,S1-3)和1条独特间隔序列(S2-1)。间隔序列比对结果显示,S1-1+S1-2+S1-3和S2-1检测O157∶H7大肠埃希菌的特异性分别是100%和99.6%。标准法检测和PCR扩增CRISPR1和CRISPR2检测大肠埃希菌O157∶H7的一致性分别达99.6%和99.3%。基于CRISPR检测大肠埃希菌O157∶H7在模拟样品中的应用,结果显示在原样品大肠埃希菌O157∶H7浓度约2.3CFU/mL时,经12h增菌后即能检测出来。大肠埃希菌O157∶H7聚类分析显示,40株O157∶H7大肠埃希菌可分为3类。结论基于CRISPR的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法,可以作为监测大肠埃希菌O157∶H7感染和高毒株大肠埃希菌O157∶H7有价值的流行病学工具。     

京沪高铁电气化工程全面展开施工

近日，在京沪高铁天津西站至沧州西站区间的施工现场，一根长76米的接触网支柱杆被轰鸣的吊车缓缓吊起，稳稳地落在15米高的桥面支柱基座上。至此，京沪高铁全线电气化工程4个区段内的第一根接触网支柱杆全部完成架设，标志着电气化工程施工在全线展开。     

纯正四驱，20年不变! 铃木维特拉历史

1988年～2008年,连续20年,铃木维特拉坚定不移地恪守了纯正四驱的原则。这是怎样一个跨世纪的追求呢?铃木维特拉(Sukuki Vitara)在日本被称作"Escudo"。与不少日系车一样,维特拉并没有使用全球一致的名字。但在本质上,它始终未变,坚定不移地恪守了纯正四驱的原则。从1988年,铃木揭开紧凑型SUV的序幕开始,直到2008年,超级维特拉被中国SUV迷们追捧,一个跨世纪的历史见证了维特拉的成功。     

Z形刚架半棚式明洞方案比选和设计分析

为了选择落石威胁下的严重偏压地形地段的合理工程方案,满足工程美学和环保要求,通过各种方案比选,提出一种新型结构形式—Z形刚架半棚式明洞。针对落石冲击荷载进行计算分析,分析结果表明:在各种冲击角度下,冲击荷载小于1800 k N时,各部位第一主应力均小于混凝土抗拉极限强度;Z形刚架半棚式明洞具有较强的抗落石冲击能力,具有较好的安全性。Z形刚架半棚式明洞具有开挖小,能承受落石荷载较大,受力特性较好,结构美观,对沿途景观和植被破坏小,施工较为方便等优点,具有较好的应用前景,可给隧道设计、施工和研究提供有益的借鉴和参考。     

福特车常见维修技巧

<正>1福特福克斯车1.1电子节气门的维护由于大多数车主买车主要是代步,因而车辆长时间在市区低速、短行程及走走停停的行驶,导致电子节气门非常容易脏。电子节气门脏污后轻则导致油耗增加,重则直接导致发动机不易起动。因此,电子节气门的清洁维护非常重要。     

体验丰田插电式混合动力汽车

我非常荣幸有机会实际体验丰田汽车公司的普锐斯插电式混合动力轿车，包括所渭的“短版”和“长版”两种。短版的，纯电动续驶里程20公里，长版的，则为30公里。由于在我的停车位已经装了一个220V、16A的交流充电桩，充电很方便。     

再生混凝土柱的受力性能试验

通过对10根再生混凝土柱的试验，研究混凝土强度、初始偏心距、长细比对再生混凝土柱受力性能的影响，并将其承载力和普通混凝土柱受力性能进行了比较。     

钢框架计算的CDC法

本文以文[4]导出的单个梁-柱的增量相关议程为基础，讨论了CDC法在钢框架分析中的计算原理，即 在框架计算中，以各梁=柱为独立单元，根据各单元自身的边界条件和相互的变形连续条件，建立整个结构的内力增量与变形增量的相关方程，从而定出荷载作用下结构的变形状态，再由外力增量与变形增量的相关方程反算荷载增量的合理取值，从而使框架计算的全过程得到大幅度的简化，因此，框架计算的CDC法是解决其计算精度和速度的有效途径。     

汽车侧面柱碰撞的研究以及法规动态

作者对汽车侧面柱碰撞以及法规动态进行深入研究,针对法规的由来、欧洲北美两大派系、汽车设计开发难点等进行分析,对某越野型SUV满足侧面柱碰撞提出设计方案,得出一些结论供读者和汽车设计人员参考。