用于生物人工肝的猪肝细胞三维立体培养

目的　研究猪肝细胞在三维立体培养系统 (中空纤维生物反应器 )中的生长、增殖及功能表达情况 ,探讨肝细胞的生物活性与培养时间之间的关系 ,找出在该培养系统中生物人工肝的有效肝功能支持时段。方法　用体重 5～ 8kg健康杂种小猪作为肝细胞供体。用胶原酶原位灌注法分离肝细胞 ,将分离计数好的肝细胞悬液 ( 5× 1 0 7～ 1 0× 1 0 7·mL- 1 )注入中空纤维管内间隙进行培养。定期对肝细胞的活性、形态、生长情况及功能表达 (白蛋白合成 )情况进行观察和检测。结果　猪肝细胞在中空纤维管培养系统内生长、增殖及功能表达良好 ,能够在长达 35d的时间内保持活力 ,并呈现一定的生长规律。结论　该系统培养的猪肝细胞在第 5～ 2 5天的范围内能够达到生物人工肝支持治疗的要求 ,猪肝细胞—中空纤维生物人工肝在该有效使用时段内可随时应用于实验和临床研究     

人类宫颈癌中自细胞介素-6与髓样细胞白血病-1表达的相关性及临床意义

目的研究白细胞介素-6（IL-6）、髓样细胞白血病-1（MCL-1）蛋白及MCL-1mRNA在宫颈癌、癌前病变及正常宫颈组织中的表达情况及其相关性。方法采用免疫组化法检测30例宫颈鳞癌、10例宫颈上皮内瘤变（CIN）及10例正常宫颈组织中IL-6和MCL-1蛋白表达情况，采用逆转录PCR法检测组织中MCL-1mRNA的表达情况。结果IL-6和MCL-1蛋白在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织及CIN组织（P〈0．01），且IL-6和MCL-1蛋白的表达呈正相关性（r=0．566，P〈0．01）；MCL-1蛋白与MCL-1mRNA表达呈正相关性（r=0．772，P〈0．01）。结论IL-6和MCL-1的表达在宫颈癌的发生、发展过程中起着共同调节作用，这一发现有助于对早期癌前病变的筛查，并为宫颈癌的治疗提供了一个细胞因子靶点。     

EFFECTS OF CEREBRAL CORTICAL CONCIS ON CELL PROLIFERATION OF THE SUBVENTRICULAR ZONE IN ADULT RATS

Mechanical injuries to the external regions ofthe brain including the cerebral cortex and otherparts of the telencephalon are common yet relativelyuntreatable[1].The predicament in recovery frombrain injury is that the adult central nervous systemis generally thought to be incapable of replacingdead neurons.As the SVZis nowknownto be neu-rogenic andis in close proxi mitytothe cerebral cor-tex and other functionally i mportant forebrain nu-clei,hope has risen that its neurogenesis may be co-op…     

硒对慢性肝病患者外周血单个核细胞膜流动性的影响

目的　探讨硒对慢性肝病患者外周血单个核细胞 (PBMC)膜流动性的影响。方法　分离健康人和慢性肝病患者的PBMC ,分别体外培养 ,对比观察了预加硒 ( 1.15 6× 10 -7mol·L-1)和不同剂量脂质过氧化诱导剂叔丁基过氧化氢 (tBHP)作用后各组PBMC膜流动性和培养液中过氧化脂质 (MDA)含量变化。结果　健康人PBMC膜流动性随tBHP剂量的增加而降低 ,培养液中MDA含量呈相反变化 ;慢性肝病患者PBMC膜流动性明显下降 ,培养液中MDA含量增加。而经硒预保护作用 6h后两组细胞上述指标均有改善。结论　脂质过氧化反应可影响人PBMC的膜流动性 ,硒对此具有保护作用。     

PDCD5基因在初诊Graves'病患者PBMCs中表达情况的初步研究

目的探讨促凋亡基因PDCD5 mRNA在初诊Graves'病(GD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达。方法半定量RT-PCR法检测53例初诊GD患者外周血单个核细胞PDCD5 mRNA表达的阳性率和表达水平。结果35例PDCD5 mRNA在GD患者PBMCs中表达呈阳性,阳性率为66.1%,较正常对照者(55.6%)升高;其表达水平(1.01±0.13)显著高于正常对照(0.52±0.13,P<0.05),且GD患者高T3水平组PDCD5 mRNA的表达显著高于低T3水平组(P<0.05)。结论PDCD5 mRNA在GD患者PBMC表达升高,可能与GD淋巴细胞凋亡异常有关。     

HAIR CELL-LIKE CELL GENERATION INDUCED BY NATURE CULTURE OF ADULT RAT AUDITORY EPITHELIUM

Objective To establish adult rat auditory epithelial cell culture and try to find precursor cells of auditory hair cells in vitro. Methods With refinement of culture media and techniques, cochlear sensory epithelial cells of adult rat were cultured. Immunocytochemistry and Bromodeoxyuridine （BrdU） labeling were used to detect properties and mitotic status of cultured cells. Results The cultured auditory epithelial cells showed a large, flat epithelial morphotype and expressed F-actin and cytokeratin, a subset of cells generated from auditory epithelium were labeled by calretinin, a specific marker of early hair cell. Conclusion Adult rat auditory epithelium can be induced to generate hair cell-like cells by nature culture, this phenomenon suggests that progenitor cells may exist in rat cochlea and they may give birth to new hair cells. Whether these progenitor cells are tissue specific stem cells is still need more study.     

体外观察紫杉醇对人胆管癌细胞QBC939凋亡的诱导作用

目的观察微管稳定剂紫杉醇对胆管癌QBC939细胞的作用。方法MTT法检测紫杉醇对QBC939细胞的抑制作用;光镜和电镜观察紫杉醇作用后细胞形态的变化;流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果随着药物作用时间的延长及浓度的增加,紫杉醇对QBC939细胞的增殖抑制作用就越明显。形态学及流式细胞仪分析显示S期及G2/M期阻滞和细胞凋亡。结论紫杉醇诱发的人胆管癌细胞的凋亡与细胞DNA合成期及分裂期阻滞密切相关。这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

脂质体介导c-myc反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的　观察脂质体 (LR)介导c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对高表达基因c myc的人肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤生长的影响。方法　人肝癌细胞株SMMC 772 1以 1.5× 10 6 分别接种于裸鼠背部皮下 ,第 14天均生长出瘤结节 [大小为 (4± 1)mm]后 ,分为实验组、空白对照组和错配链寡核苷酸对照组三组。实验组用脂质体包裹的10 μmol·L- 1 浓度ASODN每天一次直接瘤体注射 ,连用 5d ,观察 2 8d。结果　测量裸鼠瘤体外表 ,发现第 5天ASODN组瘤体明显小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,瘤质量在第 2 8天后ASODN组明显轻于对照组 (P <0 .0 5 )。组织学HE染色显示瘤体组织在实验组较对照组坏死明显 ,免疫组化结果显示C myc蛋白表达在实验组较对照组降低。 结论　推测应用脂质体包裹ASODN可能对人肝癌细胞SMMC 772 1成瘤的组织细胞生长有一定的抑制作用     

siRNA directed against TrkA sensitizes human pancreatic cancer cells to apoptosis induced by gemcitabine through an inactivation of PI3K/Akt-dependent pathway

Pancreatic cancer is a lethal disease.Despite sig-nificant advances in diagnosis,staging,and surgicalmanagement of the disease,less than10%of pa-tients survive for more than one year fromthe ti meof diagnosis[1-2].The largely refractory response tochemotherapy is a common feature of this disease,and eventhe principal therapeutic agent,the nucleo-side analogue gemcitabine(2′,2′-difluorodeoxycyt-idine),only marginally affects clinical outcomes[3].Therefore,further understanding of the chemores…     

硒对离体人胚肝细胞膜的保护作用

在原代培养人胚肝细胞脂质过氧化损伤模型上，观察硒对肝细胞膜流动性及膜表面超微结构的影响。结果：预加硒可有效地维持肝细胞膜流动性，保护膜表面结构完整。硒保护组培养液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性明显增加，丙二醛（ＭＤＡ）水平下降，与损伤组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。且其ＧＳＨ－Ｐｘ／ＭＤＡ比值与膜流动性增加呈正相关。提示上述硒的保护作用与增强细胞抗氧化能力有关。