胃癌组织来源的突变型DNA聚合酶β的碱基切除修复功能

目的研究胃癌组织中野生型和突变型DNA聚合酶β在DNA修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,以野生型和突变型DNA聚合酶β基因为模板,扩增后构建pGEM-T-polβ克隆载体,经PCR筛选,亚克隆于pET28a(+)表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细菌,经诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,通过镍柱亲和层析法纯化蛋白。设计3条单链DNA引物,退火合成含有单碱基缺失的DNA底物,与纯化蛋白共做碱基切除修复(BER)实验,最后琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果成功构建了pET28a(+-)polβ重组表达载体;在BER实验中,野生型DNA聚合酶β能够在DNA底物的酶切位点处将其切开,突变型DNA聚合酶β不能或部分将其切开。结论野生型DNA聚合酶β能够修复单碱基缺失的DNA底物,而突变型DNA聚合酶β在碱基缺失修复过程中的作用丧失或减弱。     

老年胃癌患者全胃切除后早期肠内膳食纤维素营养液的作用

目的　探讨老年胃癌患者全胃切除后 ,早期使用膳食纤维素营养液肠内营养 (EN)的可行性。方法　 5 0例 6 0岁以上胃癌全胃切除患者 ,随机分为实验组 2 5例 ,用能全力 (TPF) 9d ;对照Ⅰ组 2 5例 ,用等氮、等热卡、等时间肠外营养 (PN)。另随机抽取同期 6 0岁以下同样患者 2 5例为对照Ⅱ组 ,支持方法和时间与实验组相同。结果　①营养指标。三组患者体重、三角肌皮折厚度、肌酐身高比、白蛋白 ,手术后第 9天都分别恢复到近于手术前 1d水平 (P >0 .0 5 ) ,仅谷氨酰胺对照Ⅰ组降低明显 (P <0 .0 5 )。术后第 4天至第 9天氮累积水平对照Ⅰ组也较低 (P<0 .0 5 )。②安全性。全部患者均无严重不良反应 ,都安全渡过术后恢复期。实验组比对照Ⅰ组肛门排气恢复显著提前 (P <0 .0 1)。结论　老年胃癌患者全胃切除后 ,早期使用膳食纤维素营养液EN ,安全适宜 ,效果良好 ,和较年轻患者近似 ,比同龄患者PN疗效高。     

Cox-2、iNOS的表达及其与胃癌血管生成的关系

目的　探讨胃癌中环氧化酶2 (Cox 2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及其与胃癌血管生成的关系。方法　用免疫组化SP法检测45例胃癌、癌旁组织手术切除标本Cox 2、iNOS和微血管密度(MVD)的表达。结果　胃癌组织Cox 2和iNOS的表达率以及MVD 均明显高于癌旁组织(77. 78% vs. 33. 33%, 68. 89% vs. 17. 78%,58.13±19.99vs. 24.02±10.28,P<0.01,P<0.005,P<0.05)。Cox 2 和iNOS均与MVD呈正相关(r=0.63,r=0.54,P<0.05,P<0.05)。Cox 2和iNOS表达有显著相关性(P<0.05)。结论　Cox 2 和iNOS在胃癌的发生中有协同作用,两者可能共同参与肿瘤血管的形成。     

Ki-Ras反义寡核苷酸对人胃癌细胞及血管内皮细胞的作用

:目的　用Ki Ras的反义寡核苷酸 (ASODN)作用于人胃癌细胞和血管内皮细胞 ,为其抑制胃癌生长及其内血管生成进行前期基础研究。方法　MTT法观察Ki RasASODN对两种细胞增殖的影响 ,电镜下观察细胞的超微结构变化及有无凋亡发生。结果　Ki RasASODN可明显抑制人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖。在一定剂量下还可诱发细胞凋亡。结论　Ki RasP2 1在人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖与凋亡调控中具有重要作用。     

幽门螺旋杆菌感染与胃癌部位和类型的关系

目的　探讨幽门螺旋杆菌 (Hpylori)感染与胃癌的部位和不同类型之间的关系。方法　根据内镜所见和Bor rmann分型对 10 9例胃癌的部位和类型进行诊断。用ABpH2 .5 PAS及HE染色区别肠型和弥漫型胃癌。用AgNOR嗜银染色法检查胃癌及癌旁黏膜胃镜活检标本Hpylori感染状况。 结果　胃癌组织内无Hpylori存在。非贲门癌癌旁黏膜Hpylori感染率 (6 6 .2 % )高于贲门癌 (4 3.8% ) (P <0 .0 5 )。H pylori在Ⅱ型和Ⅲ型胃癌旁黏膜阳性率(6 2 .5 % )与Ⅰ型 (5 3.8% )和Ⅳ型 (5 9.3% )比较均无显著性差异 ,肠型和弥漫型胃癌旁粘膜Hpylori阳性率分别为6 5 .4 %和 5 4 .4 % (P >0 .0 5 )。慢性活动和非活动性胃炎 ,H pylori阳性和阴性胃炎在两组的分布频率无差异。结论　Hpylori感染与非贲门癌关系密切 ,与癌溃疡无关。慢性胃炎尤其是H pylori阳性胃炎是发生肠型和弥漫型胃癌的基础病变 ,Hpylori是重要的始动因子     

胃癌及癌旁正常组织细胞膜中蛋白质及脂质改变的傅立叶变换红外光谱研究

目的 研究胃癌及癌旁正常组织细胞膜中蛋白质及脂质的傅立叶变换红外光谱(FTIR)的光谱变化及与相应组织、细胞层次光谱变化的差异.方法 提取肿瘤组织和癌旁正常组织的细胞膜,将细胞膜进行溴化钾压片,应用Nicolet Magna750型红外光谱仪对细胞膜的溴化钾压片进行红外光谱检测,获得细胞膜的光谱图,选择其特征性光谱与胃癌组织、胃癌细胞株的相应光谱进行比对.结果 胃癌组织细胞膜的红外光谱特征与相应正常组织细胞膜光谱特征存在异同,且胃癌组织细胞膜与胃癌组织、胃癌细胞株的光谱特征存在异同.主要表现在与脂类相关的2955、2920、2850、1740cm-1谱带的变化.结论 胃癌组织及癌旁正常组织细胞膜上生物大分子红外光谱发生变化及与相应组织、细胞层次红外光谱之间存在差异,其丰富了生物组织红外光谱研究的内容.     

生物标志物EHD3与胃癌中免疫细胞浸润的相关性研究

目的 探讨EHD3对胃癌(STAD)患者的预后作用及其与STAD中免疫细胞浸润之间的联系。方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)的RNA测序数据,对EHD3表达进行分析。开展差异分析、功能富集、免疫浸润、免疫检查点的探究及临床基线数据分析。采用单变量和多变量Cox回归分析识别独立预后因素,制定列线图模型并用C指数和校准图对模型进行评估。结果 EHD3在STAD中显著上调,功能富集分析表明EHD3的表达与免疫反应有关,多数免疫细胞及免疫检查点与其表达呈正相关。Cox回归结果显示,EHD3是STAD患者独立预后因素(HR=2.112,95%CI:1.340～3.327,P=0.001)。结论 EHD3可能是STAD患者的新预后生物标志物。本研究可为STAD的治疗提供一个潜在的治疗靶点。     

Y-box结合蛋白-1在胃癌组织中的表达及意义

目的 研究Y-box结合蛋白-1(YB-1)在胃癌的不同发展阶段中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学和原位杂交方法检测正常胃组织、肠化生组织、早期胃癌和进展期胃癌组织中YB-1蛋白和mRNA的表达变化.结果 在正常胃组织中YB-1蛋白和mRNA无表达;在肠化生组织中可见YB-1阳性染色于胃黏膜上皮细胞中,但表达较弱;在早期胃癌中YB-1表达于全层胃黏膜上皮细胞中,染色较肠化生组织重,而在进展期胃癌中其表达较在早期胃癌中下降.结论 YB-1的升高可能在胃癌的早期发生和发展中起作用.     

复发性口疮与细胞介导性免疫疾病的对照研究

采用单克隆抗体、间接致敏红细胞花环试验法对复发性口疮（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔａｐｈｔｈｏｕｓ ｕｌｃｅｒ,ＲＡＵ）、胃癌及系统性红斑狼疮（Ｓｙｓｔｅｍ ｉｃ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍ ａｔｏｓｕｓ,ＳＬＥ）患者外周血ＷｕＴ３、ＷｕＴ４、ＷｕＴ８ 及Ｔ４／Ｔ８ 比值进行检测。结果：胃癌患者ＷｕＴ３、ＷｕＴ４ 低于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）,ＷｕＴ８ 高于对照组,Ｔ４／Ｔ８ 比值明显低于对照组（ Ｐ＜ ０．００１）。ＳＬＥ组患者ＷｕＴ８ 较对照组低下,Ｔ４／Ｔ８ 比值增高（ Ｐ＜ ０．０５）。ＲＡＵ组患者ＷｕＴ３ 低于对照组,ＷｕＴ８ 高于对照组,Ｔ４／Ｔ８ 比值下降（ Ｐ＜ ０．０５）。认为：①胃癌的发生是机体总的细胞免疫处于低下无能状态,不能对肿瘤进行正常的免疫监视及免疫应答。②ＳＬＥ的发病与ＷｕＴ８ 功能降低有关,其导致自身反应细胞发生脱抑制而功能亢进。③ＲＡＵ 的发生是因ＷｕＴ８ 细胞功能增强,致使Ｔｃ细胞的作用增强,其直接攻击粘膜靶细胞造成粘膜坏死、溃疡