全血环孢素A浓度荧光偏振免疫法监测及评价

应用特异性单克隆抗体荧光偏振免疫法（ＭＡＦＰＩＡ）对６８例肾移植患者进行３６２次临床环孢素Ａ（ＣｓＡ）全血药物浓度监测。结果表明：合并用药会影响ＣｓＡ全血浓度。术后时间与ＣｓＡ全血浓度有一定关系。ＭＡＦＰＩＡ是一种简便、快速、准确的监测方法，对指导临床鉴别排异与中毒反应以及个体化给药，具有重要意义。     

新型EGFP标记的杆状病毒转移载体的构建及EGFP的制备

目的构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP。方法用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转化E.coliDH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Ac-EGFP;感染Sf-9昆虫细胞;利用激光共聚焦显微镜和SDS-PAGE观察并检测EGFP的表达。非变性法纯化EGFP。结果荧光显微镜和激光共聚焦显微镜证实感染的Sf-9细胞可表达EGFP;通过SDS-PAGE获得的EGFP,大小为27ku。结论重组pFB-EGFP载体具备表达EGFP的能力,为分子生物学研究提供了一种新型可表达EGFP融合蛋白的昆虫杆状病毒表达载体。     

城市轨道交通无线车载电台“未就绪”问题及解决方案

对城市轨道交通无线集群系统中车载电台在列车折返过程中出现"未就绪"异常现象的原因进行了详细分析;并结合分析结果对引起此类故障的"同频同色码"现象进行了网络优化,从而避免色码干扰对无线网络的正常运行造成影响。分析表明,不合理的色码规划会给网络带来不良的影响,故在无线网络的建设和维护中,需要对色码进行合理的规划;色码的复用方式应避免与频率的复用方式相同,且同一个小区的邻区组中应避免出现同频同色码小区。     

用于发动机开发的气缸内测试技术

描述了用于揭示气缸内过程的光学诊断技术.说明了可在气缸内安装光学通路的可视化发动机特点和激光诊断技术的原理.给出了典型的测试结果,如气体流动、燃油喷射、混合气形成、燃烧及燃烧产物.此外,探讨了光学诊断技术在发动机内部及外部废气再循环研究中的应用.     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞及其亚群的变化和意义

研究丙型肝炎病毒慢性感染过程中ＨＣＶ与机体免疫功能间的关系。方法 用间接免疫荧光法检测７５例ＨＣＶ慢性感染者及５０例正常人外周血ＣＤ＾＋３Ｔ细胞及ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋８Ｔ细胞亚群的数量。结果 发现；１．慢性感染者外周血ＣＤ＾＋３Ｔ细胞及ＣＤ＾＋４Ｔ细胞亚群明显低于正常对照组，ＣＤ＾＋８细胞亚群明显高于正常对照组。２．ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的慢性感染者外周血ＣＤ＾＋３Ｔ细胞及ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋８Ｔ细胞     

髓样细胞触发受体-1在寻常型银屑病中的表达及意义

目的通过对比髓样细胞触发受体-1(Trem-1)在寻常型银屑病患者与正常人皮肤组织及血液中的表达差异,探索寻常型银屑病发病的可能机制。方法采用免疫组化及实时荧光定量PCR的方法检测Trem-1在不同组织中的表达情况,应用SPSS21.0统计软件进行统计学分析。结果 Trem-1在寻常型银屑病患者皮损中表达增加,主要表达于表皮全层,正常皮肤组织中主要表达于基底细胞层,其表达差异具有统计学意义(P<0.05)。Trem-1mRNA在寻常型银屑病皮损、血液中表达升高,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05);且Trem-1mRNA表达与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)呈正相关(P<0.05)。结论Trem-1的异常表达可能参与了寻常型银屑病发病,Trem-1可能成为治疗寻常型银屑病的潜在靶点。     

热诱导肿瘤特异性基因治疗载体的靶向性鉴定

目的检测已构建热反应元件修饰的端粒酶逆转录酶hTERT基因启动子(8HSEs-hTERTp)调控的基因表达载体肿瘤特异性和热诱导特性。方法①RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测细胞内hTERT mRNA和蛋白表达水平,选择hTERT高表达和低表达的细胞株作为该研究阳性细胞株和阴性细胞株;②收集前期已包装成功的热反应元件8HSEs和人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp联合调控自杀基因PNP表达的慢病毒表达载体8HhP病毒液,感染hTERT+SW480细胞及hTERT-MKN28细胞、hTERT-MRC-5细胞,细胞免疫荧光技术检测该治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性;并用Western blot和RT-PCR分别检测热刺激条件下目的基因PNP在不同hTERT水平细胞株中的表达水平。结果 hTERT mRNA及蛋白在SW480细胞中高表达,在MKN28细胞和MRC-5细胞中低表达甚至阴性表达;免疫荧光、RT-PCR和Western blot结果显示,8HSEs-hTERTp调控的目的基因PNP只有在43℃处理下的SW480细胞中呈现高表达,而在阴性细胞株MKN28和MRC-5中PNP表达较少,而常温下SW480细胞中PNP的表达水平明显低于热处理组。结论 8HSEs修饰的hTERT启动子可以明显提高治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性。     

离子缔合物溶剂萃取荧光法测定痕量汞

在酸性介质中,Hg2+、Br-和亚甲蓝形成离子缔合物,该缔合物易被1,2-二氯乙烷等有机溶剂所萃取,在689nm处有较强荧光。在优化的实验条件下,在0.01～6.4μg/mL范围内,Hg与荧光强度成正比,该法综合荧光的高灵敏度特点和溶剂萃取的浓缩作用,使其灵敏度得到极大提高,检出限为3 ng/mL,更适合用于痕量汞的测定。经过用于乌江水样中痕量汞的实际测定,结果比较满意。